Witamina D i hipoteza wolnego hormonu

Wstęp:

Witamina D jest wszechstronną cząsteczką sygnałową o ugruntowanej roli w regulacji homeostazy wapnia i zdrowia kości. Spektrum narządów docelowych dla witaminy D rozszerzyło się i zasugerowano, że witamina D wpływa na układ odpornościowy, narządy wydzielania wewnętrznego, takie jak trzustka, jądra i jajniki oraz wiele innych narządów (Blomberg Jensen 2014). Ostatnio zwrócono uwagę na pacjentów chirurgicznych sugerujących hipowitaminozę D w celu zwiększenia chorobowości pooperacyjnej. (Turan A i in., Zaloga i in.). Jednak literatura okołooperacyjna jest utrudniona przez mieszankę ostrych i przewlekłych chorób wskazujących na operację, różne rodzaje operacji i różny czas oceny witaminy D (przed i po operacji) (Turan A i wsp. Zaloga i wsp.).

Witamina D jest hormonem steroidowym związanym z białkami, a interpretacja badań chirurgicznych witaminy D wymaga wiedzy na temat wpływu klinicznego urazu chirurgicznego per se na fizjologię witaminy D, jak wykazano w przypadku kortyzolu, hormonów tarczycy i innych hormonów steroidowych (Kehlet , Brandt, Rem). W przeciwieństwie do innych hormonów steroidowych, witamina D wymaga dwuetapowego procesu aktywacji, zanim będzie mogła związać i aktywować receptor witaminy D (VDR). Najpierw przez 25-hydroksylację (CYP2R1) w wątrobie, która tworzy 25-hydroksywitaminę D (25-OHD). 25-OHD jest również biologicznie nieaktywny, ale jest używany klinicznie do określania statusu witaminy D, ponieważ poziomy 25-OHD w surowicy są związane z krzywicą, zdrowiem kości i homeostazą wapnia. Krążący 25-OHD wiąże się z białkiem wiążącym witaminę D (DBP) (Prosser i jones 2004). Kompleks ten jest filtrowany w kłębuszkach nerkowych, a następnie transportowany do komórek kanalików proksymalnych przez wychwyt za pośrednictwem megaliny (Nykjær 1999). Tutaj 25-OHD ulega 1α-hydroksylacji (CYP27B1), a powstały 1,25(OH)2D3 wiąże się i aktywuje receptor witaminy D (VDR). Fakt, że frakcja związana z białkami jest wychwytywana przez megalinę, różni się od klirensu metabolicznego i/lub aktywacji innych hormonów steroidowych i stawia pod znakiem zapytania, czy hipoteza wolnego hormonu ma zastosowanie do układu witaminy D. Fakt, że białka wiążące są tracone podczas stresu chirurgicznego, wskazuje, że ta grupa pacjentów jest idealna do badania stężeń całkowitych i wolnych hormonów oraz możliwych zmian wtórnych, na przykład PTH i wapnia w surowicy, spowodowanych funkcjonalnymi aberracjami hormonalnymi.

Cel studiów:

Celem pracy jest opisanie zmian parametrów witaminy D przed, w trakcie i po dobrze zdefiniowanym planowym urazie chirurgicznym (protezoplastyka stawu kolanowego) oraz porównanie tych zmian z innym hormonem steroidowym (testosteronem i estrogenami). Hipoteza jest taka, że ​​głębokie zmiany w wolnej i całkowitej witaminie D wystąpią w wyniku zmian między wewnątrznaczyniowymi i pozanaczyniowymi przedziałami białkowymi podczas urazu chirurgicznego.

PROJEKT Jest to prospektywne badanie obserwacyjne

Pacjenci i metody 20 poza tym zdrowych pacjentów (10 mężczyzn i 10 kobiet) w wieku 50-75 lat poddanych planowej alloplastyce stawu kolanowego na Oddziale Chirurgii Ortopedycznej Szpitala Hvidovre. Wszyscy pacjenci przechodzą standardowe znieczulenie i leczenie przeciwbólowe w trybie przyspieszonym ze wypisem nie wcześniej niż 48 godzin po operacji.(Husted et al 2011) Kryteriami wykluczającymi są

• przyjmowanie dużych dawek witaminy D (powyżej 10 mikrogramów dziennie),
• poważne choroby współistniejące, takie jak przebyty zawał mięśnia sercowego, niewydolność serca, nerek lub wątroby, ciężkie schorzenia reumatologiczne, istniejące zaburzenia endokrynologiczne tarczycy, trzustki, jąder, nadnerczy,
• Zaburzenia związane z metabolizmem wapnia, hiperkalcemia,
• Choroba ziarniniakowa, taka jak Wegener, gruźlica itp.,
• Przebyta lub obecna choroba nowotworowa, nieswoiste zapalenie jelit
• Obecne stosowanie leków wpływających na wiązanie białek i wydalanie przez nerki (allopurynol, leki moczopędne, hormony). terapia immunosupresyjna)
• Podwyższona kreatynina w surowicy
• Pochodzenie etniczne spoza Europy

OBLICZANIE WIELKOŚCI PRÓBY I STATYSTYKI W tym badaniu asocjacyjnym z udziałem 20 uczestników oszacowaliśmy na podstawie badań przeprowadzonych z kortyzolem i innymi hormonami steroidowymi, że wielkość kohorty jest wystarczająca do pokazania kinetyki metabolizmu witaminy D po operacji

PRZESIEW I PRZEBIEG CZASOWY Mężczyźni i kobiety badani na Oddziale Ortopedii szpitala Hvidovre zostaną poddani badaniu przesiewowemu pod kątem zakwalifikowania do badania. Osoby, które spełnią kryteria uczestnictwa zostaną poinformowane, a jeśli wyrażą zgodę, zostaną przydzielone do badania. Badanie rozpocznie się w styczniu 2015 r. i zakończy się w kwietniu 2015 r. po uwzględnieniu ostatniej osoby.

Każda osoba będzie miała jedno pobranie krwi przed operacją oraz 2, 6, 24 i 48 godzin po operacji. Trzy tygodnie po włączeniu od pacjentów zostanie pobrana ostateczna próbka krwi.

Próbki krwi Krew Wenus jest pobierana przed operacją przed i.v. podanie płynów, 2, 6, 24,48 godzin i 3 tygodnie po operacji. Surowica musi zostać zamrożona w ciągu 1 godziny i będzie przechowywana w temperaturze minus 20 stopni Celsjusza do czasu analizy.

POMIARY WYNIKÓW

• Podstawowe punkty końcowe

  •Zmiany całkowitej i obliczonej wolnej 25-hydroksywitaminy D i 1,25-dihydroksywitaminy D po operacji.

• Drugorzędowe punkty końcowe

  • Stężenia wapnia całkowitego, wapnia skorygowanego o albuminy, fosforanów, fosfatazy alkalicznej, białka wiążącego witaminę D i hormonu przytarczyc (PTH) w surowicy
  • Całkowity i obliczony wolny testosteron i estradiol odpowiednio u mężczyzn i kobiet.
  • czy zmiany w hormonach płciowych różnią się od witaminy D
  • Poziomy gonadotopin w surowicy
  • uzależnienie od seksu. Czy zmiany dostępności witaminy D są zależne od płci?
  • zależności od przedoperacyjnego poziomu witaminy D. Czy zmiany w dostępności witaminy D zależą od wyjściowego poziomu witaminy D w surowicy
  • Zmiany stężeń w surowicy przypuszczalnych regulatorów i dalszych sygnałów osteokalcyny, czynnika wzrostu fibroblas 23 (FGF23), osteopontyny, RANKL, osteoprotegeryny (OPG), alfa Klotho, sklerostyny ​​i IGF-1.
  • Czasowe zmiany poziomu białek wiążących w surowicy. różnice dla białka wiążącego witaminę D, albuminy i globuliny wiążącej hormony płciowe.

ANALIZA I INTERWENCJA

Hormony reprodukcyjne i czynniki wzrostu będą analizowane w dziale. GR, Rigshospitalet. Inne analizy surowicy będą analizowane na Wydziale biochemii klinicznej szpitala Holbæk i Aarhus Kommune

ETYKA I SKUTKI NIEPOŻĄDANE Przed zaproszeniem do badania wszyscy pacjenci będą mieli ukończone badanie. Zostaną poinformowani o potencjalnych skutkach ubocznych i będą mogli opuścić badanie w dowolnym momencie bez żadnych konsekwencji. Wszyscy uczestnicy zostaną poinformowani i otrzymają poradę zgodnie z ich statusem VD 3 tygodnie po operacji. Badanie to nie stwarza dodatkowego ryzyka dla pacjentów, z wyjątkiem 5 okołooperacyjnych próbek krwi (każda po 8 ml łącznie 40 ml na pacjenta), ponieważ wszystko inne jest zgodne ze standardową praktyką kliniczną.

PUBLIKACJA WYNIKÓW Wszystkie wyniki, pozytywne lub negatywne, zostaną przesłane do recenzowanych czasopism naukowych. Dane będą sukcesywnie pozyskiwane i przekazywane do bazy statystycznej.