Hormônios sexuais e prevenção da aterosclerose em mulheres na perimenopausa (SHAPE2)

A disfunção endotelial, com redução da dilatação dependente do endotélio vascular (EDD), é um preditor significativo de eventos cardiovasculares (CV). A EDD reduzida é caracterizada pela perda da produção de óxido nítrico (NO). O EDD diminui com o envelhecimento nas mulheres em um ritmo mais lento em comparação com os homens, mas diminui rapidamente após a menopausa e alcança rapidamente os homens, sugerindo um efeito benéfico do estrogênio (E2). Nossa pesquisa investigou os mecanismos subjacentes à proteção endotelial de E2, incluindo como as flutuações hormonais durante os primeiros anos da pós-menopausa contribuem para a disfunção endotelial e como essas alterações hormonais podem interagir com o envelhecimento. Usando um modelo experimental bem descrito (infusão sistêmica de ácido ascórbico; AA) para reduzir agudamente as espécies reativas de oxigênio (ROS), nossos achados preliminares implicam o estresse oxidativo como um mecanismo subjacente que explica o comprometimento da EDD durante a transição da menopausa. Especificamente, encontramos melhora da EDD em resposta ao AA em mulheres na perimenopausa tardia e pós-menopausa, mas não em mulheres na pré ou perimenopausa precoce. Esses dados indicam que o E2 pode proteger a vasculatura da lesão dos radicais livres durante os anos pré e perimenopausa. Em apoio a esse conceito, demonstramos que o AA pode reverter a diminuição da EDD que ocorre no cenário de deficiência de E2 de curto prazo (3 dias de antagonista do hormônio liberador de gonadotrofina; GnRHant) em mulheres na pré e na perimenopausa precoce.

A tetrahidrobiopterina (BH4) é um cofator crítico na produção de NO pela sintase endotelial do óxido nítrico (eNOS) e, diante de níveis deficientes, o desacoplamento da eNOS resulta na produção de ERO em vez de NO. Se o aumento de ROS e o comprometimento de EDD que ocorrem durante os períodos peri e pós-menopausa precoce estão associados à redução de BH4 vascular é atualmente desconhecido. No entanto, nossa descoberta de que o AA não pode melhorar a EDD reduzida encontrada em mulheres na perimenopausa precoce ou restaurar a EDD em mulheres na peri e pós-menopausa aos níveis da pré-menopausa, indica que outras fontes de ROS ou causas de baixo NO estão envolvidas na EDD prejudicada em todos os estágios da transição da menopausa e envelhecimento em mulheres. Estudos in vitro demonstram que a coadministração de BH4 e AA impede completamente o desacoplamento da eNOS e diminui a produção de NO em células endoteliais tratadas com um doador de peroxinitrito (ONOO-), em comparação com a administração de qualquer um deles isoladamente. O objetivo global desta renovação é acompanhar nossos achados anteriores e determinar o papel do BH4 como mediador da disfunção endotelial [ao longo dos estágios da transição da menopausa e envelhecimento em mulheres. Este objetivo global será abordado por 3 objetivos específicos (SA). Usando um desenho transversal, o SA1 irá medir EDD em mulheres saudáveis ​​na pré, peri e pós-menopausa: 1) sob condições basais; e 2) após um aumento agudo de BH4. O SA2 expandirá as comparações transversais por meio da supressão ovariana (GnRhant) de curto prazo (10 dias) em mulheres na pré e no início da perimenopausa para isolar os efeitos independentes da idade do E2. O SA3 examinará se a coadministração de BH4 e AA restaura totalmente o EDD juvenil em mulheres na peri e pós-menopausa.

SA1: Determinar o possível envolvimento mecanicista da deficiência de BH4 no declínio da função endotelial durante o período peri e pós-menopausa precoce e sua possível relação com o estresse oxidativo. Isso será avaliado comparando EDD da artéria braquial e marcadores plasmáticos e de células endoteliais de estresse oxidativo e NO (ver métodos para detalhes) em mulheres saudáveis ​​na pré, peri e pós-menopausa: 1) sob condições basais; e 2) em resposta à suplementação oral aguda de BH4 (vs PL).

Hipótese 1 (H1): a) A EDD aumentará em resposta ao BH4 em mulheres na peri, peri e pós-menopausa precoces, mas não em mulheres na pré-menopausa. b) O aumento do EDD em resposta ao BH4 estará associado à diminuição dos marcadores plasmáticos de estresse oxidativo. c) O EDD reduzido em mulheres na peri e pós-menopausa estará associado a marcadores de células endoteliais mais baixos de NO e maior estresse oxidativo.

SA2: Determinar se a diminuição da EDD em resposta à supressão ovariana aguda em mulheres na pré e perimenopausa está relacionada à biodisponibilidade reduzida de BH4 e marcadores elevados de estresse oxidativo. Isso será avaliado comparando EDD e marcadores plasmáticos de estresse oxidativo após suplementação oral aguda de BH4 (ou PL) após supressão ovariana aguda com (GnRHant+E2) ou sem (GnRHant+PL) E2 add-back. Além disso, a expressão de proteínas de células endoteliais de marcadores de biossíntese de BH4 e estresse oxidativo será medida antes e depois do paradigma de supressão/add-back.

H2: a) A diminuição esperada da EDD e aumento dos marcadores de estresse oxidativo plasmático após a supressão ovariana aguda será mitigada nos grupos tratados com BH4 oral (GnRHant+PL+BH4); haverá pouco ou nenhum efeito da adição de BH4 ao grupo add-back E2. b) A supressão ovariana sozinha reduzirá os marcadores de proteína endotelial da biossíntese de BH4 e aumentará os marcadores de estresse oxidativo. Essas alterações não serão observadas após a supressão ovariana com adição de E2 e BH4 oral. Esses conjuntos de experimentos fornecerão evidências de que a diminuição relacionada ao estresse oxidativo em EDD em resposta à supressão de E2 está, em parte, relacionada à diminuição da biodisponibilidade de BH4.

SA3: Determinar se a coadministração de BH4 com AA restaurará completamente a EDD em mulheres na peri e pós-menopausa e em mulheres na perimenopausa precoce após supressão ovariana.

H3: A coadministração de BH4 com AA restaurará a EDD aos níveis da pré-menopausa a) em mulheres na peri e pós-menopausa, e b) na perimenopausa precoce após supressão ovariana aguda.