Avaliação de testes de anticorpos para COVID-19

Fundo

Os testes moleculares (RT-PCR) são atualmente o padrão-ouro para o diagnóstico de COVID-19. Eles detectam o RNA viral e são um bom marcador para infecção atual e infectividade. No entanto, esses testes são caros e escassos. Em casos avançados de COVID-19, a concentração do vírus no trato respiratório superior geralmente é baixa, pois a infecção se espalhou para os pulmões e o RNA viral às vezes é indetectável por RT-PCR usando trocas nasais. Os testes de anticorpos detectam anticorpos humanos para proteínas virais no sangue ou outros fluidos corporais. Eles podem ser úteis para diagnosticar infecções atuais (ligeiramente menos sensíveis que os testes RT-PCR) e permanecem positivos depois que as pessoas se recuperam da infecção. Assim, espera-se que os testes de anticorpos sejam úteis para o diagnóstico de infecções atuais, para verificar infecções recentes em pessoas que não foram testadas por RT-PCR quando estavam doentes e para documentar possível imunidade ao vírus. Os testes de anticorpos podem ser especialmente valiosos para uso em países de baixa e média renda que carecem de recursos para testes moleculares generalizados para infecção por SARS-CoV-2.

Sensibilidade e especificidade antecipadas do teste. Os dados do fabricante para vários testes de anticorpos afirmam que mais de 90% das pessoas com COVID-19 (sintomas clínicos e testes moleculares positivos) apresentam resultados positivos nos testes de anticorpos para IgM e/ou IgG. Eles também reivindicam especificidade na faixa de 93-95% para amostras de pessoas que não foram expostas ao SARS-CoV-2.

Disponibilidade de testes de anticorpos. Nos últimos meses, muitos testes de anticorpos foram desenvolvidos e comercializados. A Fundação para Novos Diagnósticos Inovadores (FIND, estreitamente ligada à Organização Mundial da Saúde (OMS) e apoiada por uma grande doação do governo do Reino Unido) em Genebra, na Suíça, informou que identificou mais de 70 desses testes e selecionou 27 testes para avaliação adicional. Destes, apenas um teste produzido nos EUA (produzido pela Cellex) recebeu uma autorização de uso emergencial (EUA) do FDA dos EUA, e nenhum teste tem aprovação formal do FDA. Os testes de anticorpos usam diferentes plataformas de diagnóstico, mas a maioria dos testes usa a proteína SARS-CoV-2 S1 e alguns testes também usam a proteína SARS-CoV-2 N. Poucos estudos que avaliaram independentemente o desempenho desses testes rápidos de anticorpos foram publicados até o momento em periódicos revisados ​​por pares. Portanto, mais dados são necessários para avaliar a sensibilidade, especificidade e valor desses testes.

Métodos

O grupo de pesquisa Weil Lab da Escola de Medicina da Universidade de Washington (WUSM) tem ampla experiência no desenvolvimento e avaliação de testes de diagnóstico rápido para doenças infecciosas. O grupo tem interesse especial em diagnósticos de doenças infecciosas que podem ser usados ​​em países de baixa e média renda e estão acostumados a trabalhar em condições desafiadoras após surtos de doenças. Neste projeto, serão avaliados testes de anticorpos de formato rápido para SARS-CoV-2 e os resultados dos testes de anticorpos serão comparados com resultados de RT-PCR e metadados (idade, sexo, sintomas clínicos, tempo após a exposição quando conhecidos).

Amostras de pacientes. Amostras de soro ou plasma não identificadas serão testadas em pacientes hospitalizados e com teste positivo para COVID-19. Amostras de controle de nosso banco de soro (amostras não identificadas de humanos saudáveis ​​e amostras de pessoas com doenças parasitárias) também serão testadas. O número de amostras de soro ou plasma a serem testadas será deixado em aberto, mas isso dependerá em parte do número de amostras disponíveis e da disponibilidade de kits de teste. Prevê-se que aproximadamente 500 amostras serão testadas inicialmente, mas mais podem ser testadas se isso for necessário para atingir os objetivos do estudo. Os testes e pesquisas são apenas para pesquisa e não relataremos os resultados dos testes de amostras individuais de pacientes aos médicos para apoiar o atendimento ao paciente.

Nota: Nenhuma inscrição voluntária neste estudo será realizada; todos os testes devem ser conduzidos anonimamente.

Kits de teste de anticorpos. Os kits de detecção de anticorpos comerciais ou protótipos comercializados serão obtidos por doação ou compra. Os testes a serem avaliados devem ser determinados, mas isso dependerá da disponibilidade e do custo. O foco será em kits de teste de anticorpo de ponto de atendimento de formato rápido que detectam anticorpos IgM e IgG para proteínas virais recombinantes. O objetivo é testar pelo menos cinco (5) kits diferentes, incluindo pelo menos dois (2) fabricados nos EUA.

Procedimentos de teste. As bulas ou protocolos dos fabricantes para realização do teste serão seguidos. Eles variam em diferentes plataformas de teste. As pessoas que realizam os testes não conhecerão os resultados da PCR ou outros metadados associados às amostras humanas quando realizarem os testes. Os testes serão lidos por dois leitores independentes e gravados. Um terceiro leitor será o voto decisivo para casos com leituras discordantes.

Dados de teste. Os resultados do teste de anticorpos (IgM e IgG) para cada kit de teste diferente serão inseridos em um formulário de resultado de teste com o número identificador exclusivo (UI) do participante. Os resultados serão posteriormente mesclados em um banco de dados que contém a interface do usuário e metadados, como idade, sexo, febre, tosse, data em que a amostra foi coletada, data de início dos sintomas, histórico de exposição (viagem, casa, trabalho). A aceitabilidade do desempenho do teste será julgada de acordo com um perfil de produto alvo de trabalho (TPP) anexado ao final deste protocolo.

Objetivo primário

1. Avaliar a sensibilidade e especificidade dos testes de anticorpos para SARS-CoV-2, o vírus que causa a doença COVID-19. Critérios separados serão usados ​​para definir a sensibilidade para amostras agudas e convalescentes.

1. A sensibilidade para diagnóstico de casos agudos será definida como % de positividade em amostras de casos sintomáticos com resultados positivos de RT-PCR. .
2. A sensibilidade para detecção de anticorpos em amostras convalescentes expressa em % será o número de testes de anticorpos positivos dividido pelo número de amostras testadas de pessoas com infecções passadas documentadas (por RT-PCR) que já passaram pelo menos 2 semanas da resolução dos sintomas e atualmente RT-PCR negativo.
3. A sensibilidade também será definida como % de concordância com os resultados de um teste de anticorpo de referência assim que um for identificado.
4. A especificidade será definida como a % de amostras de controle negativo (coletadas antes de 01/01/2020) que apresentam resultados de teste de anticorpos negativos.

Objetivos Secundários

1. Determinar as relações entre o tempo após a infecção ou início dos sintomas de COVID-19 e a presença de anticorpos contra o vírus, conforme determinado pelos kits de teste de anticorpos.
2. Para determinar a duração das respostas de anticorpos após a infecção.
3. Para comparar a reatividade de base (taxas de falsos positivos) para soros dos EUA versus soros de países em desenvolvimento em áreas onde infecções parasitárias crônicas e consumo de carne de caça são comuns ou onde as pessoas vivem em estreita relação com a vida selvagem que pode ser um reservatório de vírus zoonóticos.
4. Para avaliar as características de desempenho do teste (facilidade de uso).

Benefícios aos participantes. Nenhum

Benefícios para a sociedade. Testes de anticorpos podem ser úteis para diagnóstico de infecção e para documentação de infecção passada. Estudos independentes de validação de testes são extremamente importantes. Isso ocorre porque os resultados dos testes das empresas podem ser tendenciosos. Além disso, as empresas geralmente não informam sobre a facilidade de uso de diagnósticos rápidos. Os testes de anticorpos podem ser especialmente valiosos para uso em países de baixa e média renda que carecem de recursos para testes moleculares generalizados para infecção por SARS-CoV-2.