Evaluering av antistofftester for COVID-19

Bakgrunn

Molekylære (RT-PCR) tester er for tiden gullstandarden for diagnose av COVID-19. De oppdager viralt RNA og er en god markør for nåværende infeksjon og smitteevne. Disse testene er imidlertid dyre og mangelvare. I avanserte COVID-19-tilfeller er viruskonsentrasjonen i de øvre luftveiene ofte lav, da infeksjonen har spredt seg til lungene og viralt RNA noen ganger ikke kan påvises ved RT-PCR ved bruk av nesebytter. Antistofftester oppdager menneskelige antistoffer mot virale proteiner i blodet eller andre kroppsvæsker. De kan være nyttige for å diagnostisere nåværende infeksjoner (litt mindre følsomme enn RT-PCR-tester), og de forblir positive etter at personer har kommet seg etter infeksjonen. Antistofftester forventes derfor å være nyttige for diagnostisering av aktuelle infeksjoner, for å verifisere nylige infeksjoner hos personer som ikke ble testet med RT-PCR når de var syke, og for å dokumentere mulig immunitet mot viruset. Antistofftester kan være spesielt verdifulle for bruk i lav- og mellominntektsland som mangler ressurser for utbredt molekylær testing for SARS-CoV-2-infeksjon.

Forventet testsensitivitet og spesifisitet. Produsentdata for flere antistofftester hevder at mer enn 90 % av personer med COVID-19 (kliniske symptomer og positive molekylære tester) har positive antistofftestresultater for IgM og/eller IgG. De hevder også spesifisitet i området 93-95 % for prøver fra personer som ikke har vært eksponert for SARS-CoV-2.

Tilgjengelighet av antistofftester. De siste månedene har mange antistofftester blitt utviklet og markedsført. Foundation for Innovative New Diagnostics (FIND, nært knyttet til Verdens helseorganisasjon (WHO) og støttet av et stort tilskudd fra Storbritannias regjering) i Genève Sveits rapporterte at de hadde identifisert mer enn 70 slike tester, og de nominerte 27 tester for videre evaluering. Av disse har kun én test produsert i USA (produsert av Cellex) mottatt en nødbruksautorisasjon (EUA) fra US FDA, og ingen test har formell FDA-godkjenning. Antistofftester bruker forskjellige diagnostiske plattformer, men de fleste tester bruker SARS-CoV-2 S1-proteinet, og noen få tester bruker også SARS-CoV-2 N-proteinet. Få studier som uavhengig evaluerte ytelsen til disse raske antistofftestene har blitt publisert til dags dato i fagfellevurderte tidsskrifter. Derfor er det nødvendig med mer data for å evaluere sensitiviteten, spesifisiteten og verdien av disse testene.

Metoder

Weil Lab-forskningsgruppen ved Washington University School of Medicine (WUSM) har lang erfaring med å utvikle og evaluere diagnostiske tester i hurtigformat for infeksjonssykdommer. Gruppen har spesiell interesse for infeksjonssykdomsdiagnostikk som kan brukes i lav- og mellominntektsland og er vant til å jobbe under utfordrende forhold etter sykdomsutbrudd. I dette prosjektet vil hurtigformat antistofftester for SARS-CoV-2 bli evaluert og antistofftestresultater vil bli sammenlignet med resultater av RT-PCR og metadata (alder, kjønn, kliniske symptomer, tid etter eksponering når kjent).

Pasientprøver. Avidentifiserte serum- eller plasmaprøver vil bli testet fra pasienter som har vært innlagt på sykehus og testet positivt for COVID-19. Kontrollprøver fra vår serumbank (avidentifiserte prøver fra friske mennesker og prøver fra personer med parasittsykdommer) vil også bli testet. Antall serum- eller plasmaprøver som skal testes vil stå åpent, men dette vil delvis avhenge av antall tilgjengelige prøver og tilgjengeligheten av testsett. Det forventes at ca. 500 prøver vil bli testet innledningsvis, men flere kan bli testet hvis det er nødvendig for å nå studiemålene. Testene og forskningen er kun for forskning, og vi vil ikke rapportere testresultater fra individuelle pasientprøver til klinikere for å støtte pasientbehandling.

Merk: Ingen frivillig påmelding til denne studien vil bli utført; all testing skal utføres anonymt.

Antistoff testsett. Markedsførte kommersielle eller prototype antistoffdeteksjonssett vil bli skaffet ved donasjon eller kjøp. Tester som skal evalueres skal fastsettes, men dette vil avhenge av tilgjengelighet og kostnad. Fokuset vil være på hurtig-format, point-of-care antistoff testsett som oppdager både IgM og IgG antistoffer mot rekombinante virale proteiner. Målet er å teste minst fem (5) forskjellige sett inkludert minst to (2) som er produsert i USA.

Testprosedyrer. Produsentenes pakningsvedlegg eller protokoller for testytelse vil bli fulgt. Disse varierer på ulike testplattformer. Personer som utfører testene vil ikke kjenne til PCR-resultater eller andre metadata knyttet til de menneskelige prøvene når de utfører testene. Tester vil bli lest av to uavhengige lesere og tatt opp. En tredje leser vil være den avgjørende stemme for saker med uoverensstemmelser.

Testdata. Antistofftestresultater (IgM og IgG) for hvert forskjellige testsett vil bli lagt inn i et testresultatskjema med deltakerens unike identifikasjonsnummer (UI). Resultatene vil senere bli slått sammen til en database som inneholder brukergrensesnittet og metadata som alder, kjønn, feber, hoste, dato prøven ble samlet inn, dato for symptomdebut, eksponeringshistorie (reise, husholdning, arbeid). Akseptabilitet av testytelse vil bli bedømt i henhold til en arbeidsmålproduktprofil (TPP) vedlagt på slutten av denne protokollen.

Hovedmål

1. For å vurdere sensitiviteten og spesifisiteten til tester for antistoff mot SARS-CoV-2, viruset som forårsaker COVID-19-sykdommen. Separate kriterier vil bli brukt for å definere sensitivitet for akutte og rekonvalesensprøver.

1. Sensitivitet for diagnostisering av akutte tilfeller vil være definert som % positivitet i prøver fra symptomatiske tilfeller med positive RT-PCR-resultater. .
2. Sensitivitet for å påvise antistoff i rekonvalesensprøver uttrykt som % vil være antall positive antistofftester delt på antall prøver testet fra personer med dokumenterte tidligere infeksjoner (ved RT-PCR) som nå er minst 2 uker etter symptomoppløsning og pt. RT-PCR negativ.
3. Sensitivitet vil også bli definert som % samsvar med resultater fra en referanseantistofftest så snart en er identifisert.
4. Spesifisitet vil bli definert som prosentandelen av negative kontrollprøver (samlet før 1/1/2020) som har negative antistofftestresultater.

Sekundære mål

1. For å bestemme sammenhenger mellom tiden etter infeksjon eller utbruddet av symptomer på COVID-19 og tilstedeværelsen av antistoffer mot viruset som bestemt av antistofftestsett.
2. For å bestemme varigheten av antistoffresponser etter infeksjon.
3. For å sammenligne bakgrunnsreaktivitet (falske positive rater) for sera fra USA vs. sera fra utviklingsland i områder hvor kroniske parasittiske infeksjoner og forbruk av bushmeat er vanlig eller hvor mennesker lever i nært forhold til dyreliv som kan være et reservoar for zoonotiske virus.
4. For å vurdere testytelsesegenskaper (brukervennlighet).

Fordeler til deltakerne. Ingen

Fordeler for samfunnet. Antistofftester kan være nyttige for diagnostisering av infeksjon og for dokumentasjon av tidligere infeksjon. Uavhengige testvalideringsstudier er kritisk viktige. Det er fordi testresultater fra selskaper kan være partiske. I tillegg rapporterer bedrifter ofte ikke om brukervennligheten til rask diagnostikk. Antistofftester kan være spesielt verdifulle for bruk i lav- og mellominntektsland som mangler ressurser for utbredt molekylær testing for SARS-CoV-2-infeksjon.