Evaluering af antistoftests for COVID-19

Baggrund

Molekylær (RT-PCR) test er i øjeblikket guldstandarden for diagnose af COVID-19. De detekterer viralt RNA og er en god markør for aktuel infektion og infektivitet. Disse tests er dog dyre og mangelfulde. I fremskredne tilfælde af COVID-19 er viruskoncentrationen i de øvre luftveje ofte lav, da infektionen har spredt sig til lungerne og viralt RNA nogle gange ikke kan påvises ved RT-PCR ved brug af nasal swaps. Antistoftests påviser humane antistoffer mod virale proteiner i blodet eller andre kropsvæsker. De kan være nyttige til at diagnosticere aktuelle infektioner (lidt mindre følsomme end RT-PCR-tests), og de forbliver positive, efter at personer er kommet sig over infektionen. Antistoftest forventes således at være nyttige til diagnosticering af aktuelle infektioner, til at verificere nylige infektioner hos personer, der ikke blev testet med RT-PCR, da de var syge, og til at dokumentere mulig immunitet over for virussen. Antistoftest kan være særligt værdifulde til brug i lav- og mellemindkomstlande, der mangler ressourcer til udbredt molekylær testning for SARS-CoV-2-infektion.

Forventet testfølsomhed og specificitet. Producentdata for adskillige antistoftest hævder, at mere end 90 % af personer med COVID-19 (kliniske symptomer og positive molekylære test) har positive antistoftestresultater for IgM og/eller IgG. De hævder også specificitet i intervallet 93-95 % for prøver fra personer, der ikke har været udsat for SARS-CoV-2.

Tilgængelighed af antistoftests. I de seneste måneder er mange antistoftest blevet udviklet og markedsført. Foundation for Innovative New Diagnostics (FIND, tæt knyttet til Verdenssundhedsorganisationen (WHO) og støttet af et stort tilskud fra den britiske regering) i Genève, Schweiz rapporterede, at de havde identificeret mere end 70 sådanne test, og de udvalgte 27 tests for yderligere evaluering. Af disse har kun én test produceret i USA (produceret af Cellex) modtaget en nødbrugstilladelse (EUA) fra det amerikanske FDA, og ingen test har formel FDA-godkendelse. Antistoftests bruger forskellige diagnostiske platforme, men de fleste tests bruger SARS-CoV-2 S1-proteinet, og nogle få tests bruger også SARS-CoV-2 N-proteinet. Få undersøgelser, der uafhængigt evaluerede ydeevnen af ​​disse hurtige antistoftests, er til dato blevet offentliggjort i peer-reviewede tidsskrifter. Derfor er der behov for flere data for at evaluere følsomheden, specificiteten og værdien af ​​disse tests.

Metoder

Weil Lab-forskningsgruppen ved Washington University School of Medicine (WUSM) har stor erfaring med at udvikle og evaluere diagnostiske tests i hurtig format for infektionssygdomme. Gruppen har særlig interesse i infektionssygdomsdiagnostik, der kan bruges i lav- og mellemindkomstlande og er vant til at arbejde under udfordrende forhold efter sygdomsudbrud. I dette projekt vil hurtigformat antistoftest for SARS-CoV-2 blive evalueret, og antistoftestresultater vil blive sammenlignet med resultater af RT-PCR og metadata (alder, køn, kliniske symptomer, tid efter eksponering, når kendt).

Patientprøver. Afidentificerede serum- eller plasmaprøver vil blive testet fra patienter, der er blevet indlagt og testet positive for COVID-19. Kontrolprøver fra vores serumbank (afidentificerede prøver fra raske mennesker og prøver fra personer med parasitære sygdomme) vil også blive testet. Antallet af serum- eller plasmaprøver, der skal testes, vil stå åbent, men dette vil til dels afhænge af antallet af tilgængelige prøver og tilgængeligheden af ​​testkit. Det forventes, at ca. 500 prøver vil blive testet indledningsvis, men flere kan blive testet, hvis det er nødvendigt for at nå undersøgelsens mål. Testene og forskningen er kun til forskning, og vi vil ikke rapportere testresultater fra individuelle patientprøver til klinikere for at understøtte patientpleje.

Bemærk: Der vil ikke blive gennemført frivillig tilmelding til denne undersøgelse; al test skal udføres anonymt.

Antistoftestsæt. Markedsførte kommercielle eller prototype-antistofdetektionskit vil blive anskaffet ved donation eller køb. Tests, der skal evalueres, skal fastlægges, men dette vil afhænge af tilgængelighed og omkostninger. Fokus vil være på hurtig-format, point-of-care antistof testkit, der detekterer både IgM og IgG antistoffer mod rekombinante virale proteiner. Målet er at teste mindst fem (5) forskellige sæt inklusive mindst to (2), der er fremstillet i USA.

Testprocedurer. Producenters indlægssedler eller protokoller for testydelse vil blive fulgt. Disse varierer på tværs af forskellige testplatforme. Personer, der udfører testene, vil ikke kende PCR-resultater eller andre metadata forbundet med de menneskelige prøver, når de udfører testene. Tests vil blive læst af to uafhængige læsere og optaget. En tredje læser vil være den afgørende stemme for sager med uoverensstemmelser.

Test data. Antistoftestresultater (IgM og IgG) for hvert forskelligt testkit vil blive indtastet i en testresultatformular med deltagerens unikke identifikationsnummer (UI). Resultater vil senere blive flettet ind i en database, der indeholder brugergrænsefladen og metadata såsom alder, køn, feber, hoste, dato, hvor prøven blev indsamlet, dato for symptomdebut, eksponeringshistorie (rejse, husstand, arbejde). Acceptabiliteten af ​​testydeevnen vil blive bedømt i henhold til en arbejdsmålproduktprofil (TPP), som er vedhæftet i slutningen af ​​denne protokol.

Primært mål

1. At vurdere følsomheden og specificiteten af ​​tests for antistof mod SARS-CoV-2, den virus, der forårsager COVID-19 sygdom. Separate kriterier vil blive brugt til at definere følsomhed for akutte og rekonvalescente prøver.

1. Følsomhed for diagnose af akutte tilfælde vil blive defineret som % positivitet i prøver fra symptomatiske tilfælde med positive RT-PCR-resultater. .
2. Følsomhed for påvisning af antistof i rekonvalescentprøver udtrykt som % vil være antallet af positive antistoftests divideret med antallet af testede prøver fra personer med dokumenterede tidligere infektioner (ved RT-PCR), som nu er mindst 2 uger efter at have løst symptomer og pt. RT-PCR negativ.
3. Sensitivitet vil også blive defineret som % overensstemmelse med resultater fra en referenceantistoftest, så snart en er identificeret.
4. Specificitet vil blive defineret som % af negative kontrolprøver (indsamlet før 1/1/2020), der har negative antistoftestresultater.

Sekundære mål

1. At bestemme sammenhænge mellem tiden efter infektion eller indtræden af ​​symptomer på COVID-19 og tilstedeværelsen af ​​antistoffer mod virussen som bestemt af antistoftestsæt.
2. For at bestemme varigheden af ​​antistofresponser efter infektion.
3. At sammenligne baggrundsreaktivitet (falske positive rater) for sera fra USA vs. sera fra udviklingslande i områder, hvor kroniske parasitinfektioner og indtagelse af bushmeat er almindelige, eller hvor mennesker lever i tæt forhold til dyreliv, der kan være et reservoir for zoonotiske vira.
4. For at vurdere testpræstationskarakteristika (brugervenlighed).

Fordele til deltagerne. Ingen

Fordele for samfundet. Antistoftest kan være nyttige til diagnosticering af infektion og til dokumentation af tidligere infektion. Uafhængige testvalideringsundersøgelser er kritisk vigtige. Det skyldes, at testresultater fra virksomheder kan være partiske. Derudover rapporterer virksomheder ofte ikke om brugervenligheden ved hurtig diagnostik. Antistoftest kan være særligt værdifulde til brug i lav- og mellemindkomstlande, der mangler ressourcer til udbredt molekylær testning for SARS-CoV-2-infektion.