Precisão diagnóstica da biópsia óptica em tempo real (INSTASCOPE)

Diferenciar o tecido neoplásico do saudável é fundamental tanto para o diagnóstico precoce durante os exames endoscópicos quanto para a radicalidade das intervenções oncológicas. Atualmente, a histologia é o padrão ouro tanto para diagnóstico quanto para avaliação das margens de ressecção. No entanto, é demorado e só pode ser realizado no pós-operatório. Como tal, o desenvolvimento de um método ultrassensível para diagnóstico óptico em tempo real pode ter um impacto inovador neste cenário clínico. Recentemente, foi desenvolvida uma nova metodologia de diagnóstico baseada na evolução de sistemas ópticos não lineares que empregam um laser multifotônico, baseado na propagação complexa da luz em fibras ópticas multimodais (MMFs - Multimodal Fibers). E permite imagens multiplex de Espectroscopia Raman Anti-Stokes Coerente (CARS) para obter uma impressão digital molecular do tecido. A constituição molecular e as alterações estruturais dos tecidos podem ser detectadas através da análise quer das propriedades vibracionais quer da geração harmónica e da fluorescência endógena da matéria viva, permitindo obter um "diagnóstico óptico". A metodologia usa um laser multifotônico (sistema de laser sintonizável de femtosegundo), é livre de marcadores e seguro para tecidos biológicos e permite imagens de resolução extremamente alta. A metodologia diagnóstica já foi avaliada em culturas celulares bidimensionais. A ESD é uma técnica bem estabelecida para a ressecção endoscópica minimamente invasiva de lesões neoplásicas superficiais grandes e de formato irregular do trato gastrointestinal com altas taxas de ressecção em bloco e margem negativa. A técnica requer "margens seguras" de ressecção de cerca de 5 a 8 mm ao redor do tecido neoplásico. Como tal, este espécime de ressecção inclui tecido neoplásico e normal de "margens seguras".

Diante desse cenário, este estudo tem como objetivo avaliar a metodologia de imagem baseada em MMFs em tecidos normais e tumorais. Os investigadores planejam realizar um estudo piloto comparativo de diagnóstico prospectivo in vitro entre histologia padrão e biópsia óptica com MMFs. O estudo incluirá 27 amostras consecutivas de lesões colorretais ressecadas com dissecção endoscópica da submucosa (ESD). Cada lesão ressecada por ESD também será o grupo controle, uma vez que consiste em margens seguras circundantes (tecido saudável) e formação tumoral central (tecido tumoral). A demonstração do diagnóstico óptico in vitro com MMFs incluirá comparações de normal a normal e de tumor a tumor. O sistema de laser será colocado sobre um local preciso com a mucosa normal do espécime ressecado e as características da mucosa serão registradas. A mesma mucosa será então indicada para análise histológica. O procedimento será repetido no tecido tumoral com a mesma metodologia. O endpoint primário deste protocolo é a precisão diagnóstica da biópsia óptica com MMFs. Os resultados da biópsia óptica serão expressos como a diferença de sinal CARS entre tecidos saudáveis ​​e tumorais. O poder de discriminação entre tecidos saudáveis ​​e cancerígenos será determinado usando uma curva ROC (Receiver Operating Characteristic). A curva ROC será obtida determinando o número de classificações corretas e incorretas em função do valor do limiar para discriminar entre os dois grupos.