Изучение белков в раковых клетках головы и шеи

ЦЕЛИ:

• Определите функцию и механизм LZAP в регуляции ОРЛ.
• Определите механизм и биологические последствия ингибирования LZAP NF-κB.
• Определите, обладает ли LZAP активностью супрессора опухоли, путем условного нацеливания на LZAP у мышей.

ПЛАН: Используя методы молекулярной лаборатории, в этом исследовании исследуются биохимические механизмы, с помощью которых LZAP активирует транскрипционную, опухолесупрессирующую активность (как р53-зависимую, так и р53-независимую) ARF и ингибирует транскрипционную онкогенную активность NF-kB. Также оценивается регуляция LZAP недавно выявленных активностей ARF, таких как задержка S-фазы и опосредованная ARF деградация B23. Опухолесупрессорную активность LZAP оценивают in vivo с использованием условного нокаутирующего вектора для нацеливания на LZAP у мышей и наблюдения за спонтанным и индуцированным образованием опухолей. Лабораторные анализы, используемые для определения конечных точек исследования, включают стандартную рекомбинантную ДНК, экспрессию и очистку рекомбинантного белка, клеточную культуру и трансфекцию, мечение клеток, репортерные анализы, проточную цитометрию, гибрид дрожжей-два, иммунопреципитацию, иммуноблотинг, иммунофлуоресценцию, анализ TUNEL, анализ ELISA, анализ Саузерн. блоттинг, экспрессия белков и генов.