Étude des protéines dans les cellules cancéreuses de la tête et du cou

OBJECTIFS:

• Définir la fonction et le mécanisme de LZAP dans la régulation de l'ARF.
• Déterminer le mécanisme et les conséquences biologiques de l'inhibition LZAP de NF-κB.
• Déterminer si LZAP a une activité suppresseur de tumeur par ciblage conditionnel de LZAP chez la souris.

APERÇU : À l'aide de techniques de laboratoire moléculaire, cette étude examine les mécanismes biochimiques par lesquels LZAP active l'activité transcriptionnelle suppressive des tumeurs (à la fois p53-dépendante et indépendante de p53) de l'ARF et inhibe l'activité transcriptionnelle tumorigène du NF-kB. La régulation LZAP des activités ARF nouvellement identifiées, telles que le retard de la phase S et la dégradation du B23 médiée par l'ARF, est également évaluée. L'activité suppressive de tumeur de LZAP est évaluée in vivo à l'aide d'un vecteur knock-out conditionnel pour cibler LZAP chez la souris et pour observer la formation spontanée et induite de tumeurs. Les analyses de laboratoire utilisées pour déterminer les paramètres de l'étude comprennent l'ADN recombinant standard, l'expression et la purification des protéines recombinantes, la culture et la transfection cellulaires, le marquage cellulaire, les tests de rapporteur, la cytométrie en flux, l'hybride levure-deux, l'immunoprécipitation, l'immunotransfert, l'immunofluorescence, le test TUNEL, le test ELISA, Southern buvardage et expression de protéines et de gènes.