Personlig precisionsdiagnostik och behandling av pankreascancer (PPDTPC)

Tumörceller frisätts från den primära tumören och/eller metastaser till blodet. Cirkulerande tumörceller (CTC), som en del av flytande biopsi, fungerar som en ny metod för att diagnostisera cancer. Många studier indikerade att CTC-tal hade en korrelation med utveckling av bröst-, kolon-, lung- eller prostatacancer. När enskilda celler eller kluster av cancerceller förvärvar förmåga att separera och förflytta sig bort från den primära tumören, migrera genom den omgivande vävnaden och komma in i lymfsystemet och/eller blodcirkulationen, blir det metastaserande draget hos den givna tumören uppenbart [1-3 ]. Tumörceller som flyr från sin primära mikromiljö behöver undvika anoikis och kan utmanas av värdens immunologiska försvar. Slutligen är CTC som ett frö som överförs till andra organ, vilket bidrar till metastaser och återfall. Dessa CTC kan berikas och detekteras via olika teknologier som drar fördel av deras fysiska och biologiska egenskaper. Denna studie samlade in CTC av iset-plattform som kontrollerar CTC (preoperativ\postoperativ\pre-treatment\under behandling) och observerade sambandet mellan CTC-antal och PC-utveckling [4].

Patient-derived xenograft (PDX) visades konsekvent bibehålla tumörmorfologi och genetisk fenotyp. Till skillnad från traditionella cellinjexenotransplantationsmodeller och genetiskt modifierade musmodeller ympades prover från pankreasadenokarcinom på immunbristande möss. Framför allt skulle PDX kunna behålla speciell funktionell genstruktur och biomarkörer i personligt fall, närmare de individuella kliniska biologiska egenskaperna och ge bättre prediktionseffekt för läkemedelsscreening och observation för behandlingseffektivitet.

Som vissa undersökningar upptäckte är det effektiva av att kontrastera läkemedelskänslighetstest med kliniskt läkemedelssvar >90 % [5]. Nu bygger vi PDX för PC, kontrollerar den genetiska informationen genom den andra genetiska sekvensen eller RNA-sekvensen. Om PDX har liknande genetisk information som den primära tumören kommer vi att göra ett läkemedelskänslighetstest. PC PDX-modell, där vi har visat att den tidiga PDX var morfologiskt lik den ursprungliga cancern och behöll både interpatient- och intrapatientheterogenitet av tumören, kunde ge referensmodell för personlig behandling av PC.

Framför allt är den mest uppenbara fördelen med PDX likheten med primärtumör, så vi kan kontrollera känsligheten för samma läkemedel. Men att bygga PDX kommer att ta cirka 3-4 månader (inklusive att bygga modellen och testet för läkemedelskänslighet). Som ett resultat behöver vi en klinisk precision terapeutisk plan som gäller de utvecklade pankreascancerpatienter. Xenograft från miniatyrpatienter (Mini-PDX), från Shanghai LIDE(lide) Biotech CO(company), utfördes med OncoVeeTM-Mini PDX-produkten från LIDE Biotech och följde instruktionerna från tillverkaren. Tumörprover skördades och tvättades med HBSS (Hanks balanserade saltlösning) för att avlägsna icke-tumörvävnad och nekrotisk tumörvävnad i biosäkerhetsskåp. Efter att tumörproverna skurits i små fragment, inkuberades de med kollagenaslösning vid 37°C under 1-2 timmar. Sedan samlade vi upp cellerna följt av att blodcellerna och fibroblastcellerna avlägsnades och cellsuspensionen överfördes till de HBSS-tvättade kapslarna. För subkutan (s.c.) implantation gjordes ett litet hudsnitt och kapseln infördes genom den subkutana vävnaden. I allmänhet fick varje mus 4 kapslar och läkemedelsadministrering utfördes under 7 dagar. Antitumöraktiviteten utvärderades genom CTG-analysen (cellviabilitet).

Kombinationen av bestrålade fibroblastmatarceller och Rho-kinashämmare, Y-27632, inducerade villkorligt ett obestämt proliferativt tillstånd i primära epitelceller från däggdjur. Dessa villkorligt omprogrammerade celler (CRC) var karyotypstabila och icke-tumörframkallande. Eftersom självförnyelse var en erkänd egenskap hos stamceller, undersökte vi om Y-27632 och matarceller inducerade en stamliknande fenotyp. Vi fann att CRCs delade egenskaper hos vuxna stamceller och uppvisade uppreglerat uttryck av α6- och β1-integriner, ΔNp63α, CD44 och telomeras omvänt transkriptas, såväl som minskad Notch-signalering och en ökad nivå av nukleärt β-catenin. Induktionen av CRC var snabb (förekommer inom 2 d) och resulterade från omprogrammering av hela cellpopulationen snarare än valet av en mindre subpopulation. CRCs överuttryckte inte transkriptionsfaktoruppsättningarna som är karakteristiska för embryonala eller inducerade pluripotenta stamceller (t.ex. Sox2, Oct4, Nanog eller Klf4). Induktionen av CRC var också reversibel, och avlägsnande av Y-27632 och matare gjorde det möjligt för cellerna att differentiera normalt. CRCs kallades på nyheterna mänskligt precisionsprotokoll. I precisionsstudien av pankreascancer kunde patienter med inoperabel eller utvecklad som förvärvade lite vävnad inte bygga PDX och förlorade chansen till PDX-behandling. Därför använde vi CRCs plattform för att odla tumörstamceller in vitro, när vi hade tillräckliga celler kunde vi göra Mini-PDX- eller PDX-läkemedelsanalys [6].

Sammanfattningsvis, eftersom olika stadier av PC-patienter inte kunde få precision anpassad i klinisk behandling för närvarande, förutspåddes denna studie av CTC\PDX\Mini-PDX\CRs\RNA-SEQ\NGS (Next generation sequencing)-plattformar ge precisionsdiagnos och behandling för olika stadier av PC-patienter. Under tiden kunde vi bygga tumörinformationsbiobank, som gav idealiska forskningsmaterial och plattformar för onkologisk grundforskning och translationell medicinforskning.