Precisione personalizzata diagnosi e trattamento del cancro al pancreas (PPDTPC)

Le cellule tumorali vengono rilasciate dal tumore primario e/o dai siti metastatici nel sangue. Le cellule tumorali circolanti (CTC), come parte della biopsia liquida, rappresentano un nuovo metodo per diagnosticare il cancro. Molti studi hanno indicato che i conteggi CTC avevano una correlazione con lo sviluppo del cancro al seno, al colon, ai polmoni o alla prostata. Quando singole cellule o gruppi di cellule tumorali acquisiscono la capacità di separarsi e allontanarsi dal tumore primario, migrare attraverso il tessuto circostante ed entrare nel sistema linfatico e/o nella circolazione sanguigna, il tratto metastatico del tumore diventa evidente [1-3 ]. Le cellule tumorali che sfuggono al loro microambiente primario devono evitare l'anoikis e potrebbero essere sfidate dalla difesa immunologica dell'ospite. Infine, CTC è come un seme che si trasferisce ad altri organi, contribuendo alla metastasi e alla recidiva. Queste CTC potrebbero essere arricchite e rilevate tramite diverse tecnologie che sfruttano le loro proprietà fisiche e biologiche. Questo studio ha raccolto le CTC dalla piattaforma iset che controlla le CTC (pre-operatorio\postoperatorio\pre-trattamento\durante il trattamento) e ha osservato l'associazione tra conteggio delle CTC e sviluppo del PC [4].

È stato dimostrato che lo xenotrapianto derivato dal paziente (PDX) mantiene costantemente la morfologia del tumore e il fenotipo genetico. Diversamente dal tradizionale modello di xenotrapianto della linea cellulare e dal modello murino geneticamente modificato, i campioni di adenocarcinoma pancreatico sono stati innestati in topi immunodeficienti. Soprattutto, PDX potrebbe mantenere una struttura genica funzionale speciale e biomarcatori nel caso personale, più vicini alle caratteristiche biologiche cliniche individuali e fornire un migliore effetto di previsione per lo screening dei farmaci e l'osservazione dell'efficienza del trattamento.

Come hanno scoperto alcune ricerche, l'efficacia del contrasto del test di sensibilità al farmaco con la risposta clinica al farmaco è> 90% [5]. Ora, costruiamo il PDX del PC, controllando le informazioni genetiche dalla seconda sequenza genetica o sequenza di RNA. Se PDX ha informazioni genetiche simili al tumore primario, eseguiremo un test di sensibilità ai farmaci. Il modello PC PDX, in base al quale abbiamo dimostrato che il PDX iniziale era morfologicamente simile al cancro originale e manteneva l'eterogeneità sia inter-paziente che intra-paziente del tumore, potrebbe fornire un modello di riferimento per il trattamento personalizzato del PC.

Soprattutto, il vantaggio più evidente del PDX è la somiglianza con il tumore primario, quindi abbiamo potuto verificare la sensibilità dello stesso farmaco. Ma la costruzione di PDX richiederà circa 3-4 mesi (compresa la costruzione del modello e il test di sensibilità ai farmaci). Di conseguenza, abbiamo bisogno di un piano terapeutico di precisione clinica che si applichi ai malati di cancro al pancreas sviluppati. Lo xenotrapianto derivato da pazienti in miniatura (Mini-PDX), di Shanghai LIDE(lide) Biotech CO(company), è stato eseguito con il prodotto OncoVeeTM-Mini PDX di LIDE Biotech e ha seguito le istruzioni del produttore. I campioni di tumore sono stati raccolti e lavati con HBSS (soluzione salina bilanciata di Hank) per rimuovere il tessuto non tumorale e il tessuto tumorale necrotico nell'armadio di biosicurezza. Dopo che i campioni tumorali sono stati tagliati in piccoli frammenti, sono stati incubati con una soluzione di collagenasi a 37°C per 1-2 ore. Quindi abbiamo raccolto le cellule seguite dalla rimozione delle cellule del sangue e dei fibroblasti e la sospensione cellulare è stata trasferita nelle capsule lavate con HBSS. Per l'impianto sottocutaneo (s.c.), è stata praticata una piccola incisione cutanea e la capsula è stata inserita attraverso il tessuto sottocutaneo. In generale, ogni topo ha ricevuto 4 capsule e la somministrazione del farmaco è stata effettuata per 7 giorni. L'attività antitumorale è stata valutata attraverso il saggio CTG (cell viability).

La combinazione di cellule alimentatrici di fibroblasti irradiate e inibitore della chinasi Rho, Y-27632, ha indotto condizionalmente uno stato proliferativo indefinito nelle cellule epiteliali dei mammiferi primari. Queste cellule condizionalmente riprogrammate (CRC) erano stabili al cariotipo e non tumorigeniche. Poiché l'auto-rinnovamento era una proprietà riconosciuta delle cellule staminali, abbiamo studiato se Y-27632 e le cellule di alimentazione inducessero un fenotipo simile a uno staminale. Abbiamo scoperto che i CRC condividevano le caratteristiche delle cellule staminali adulte e mostravano un'espressione sovraregolata di integrine α6 e β1, ΔNp63α, CD44 e trascrittasi inversa della telomerasi, nonché una ridotta segnalazione di Notch e un aumento del livello di β-catenina nucleare. L'induzione dei CRC è stata rapida (si verifica entro 2 giorni) ed è il risultato della riprogrammazione dell'intera popolazione cellulare piuttosto che della selezione di una sottopopolazione minore. I CRC non hanno sovraespresso i set di fattori di trascrizione caratteristici delle cellule staminali pluripotenti embrionali o indotte (ad esempio, Sox2, Oct4, Nanog o Klf4). Anche l'induzione dei CRC è stata reversibile e la rimozione di Y-27632 e degli alimentatori ha consentito alle cellule di differenziarsi normalmente. CRC è stato chiamato sul protocollo di precisione umana di notizie. Nello studio sulla precisione del cancro al pancreas, i pazienti inoperabili o sviluppati che hanno acquisito un piccolo tessuto non hanno potuto costruire PDX e hanno perso la possibilità di un trattamento con PDX. Quindi, abbiamo utilizzato la piattaforma CRC per coltivare cellule staminali tumorali in vitro, quando disponendo di cellule adeguate, potremmo eseguire il test del farmaco Mini-PDX o PDX [6].

In sintesi, poiché attualmente i diversi stadi dei pazienti con PC non possono acquisire precisione personalizzata nel trattamento clinico, questo studio condotto dalle piattaforme CTC\PDX\Mini-PDX\CRs\RNA-SEQ\NGS (Sequenziamento di nuova generazione) è stato previsto per fornire diagnosi di precisione e trattamento per diversi stadi di pazienti con PC. Nel frattempo, potremmo costruire una biobanca di informazioni sui tumori, che fornisca materiali e piattaforme di ricerca ideali per la ricerca di base in oncologia e la ricerca sulla medicina traslazionale.