Diagnóstico y tratamiento de precisión personalizado del cáncer de páncreas (PPDTPC)

Las células tumorales se liberan desde el tumor primario y/o los sitios metastásicos a la sangre. Las células tumorales circulantes (CTC), como parte de la biopsia líquida, actúan como un nuevo método para diagnosticar el cáncer. Muchos estudios indicaron que los recuentos de CTC tenían una correlación con el desarrollo de cáncer de mama, colon, pulmón o próstata. Cuando las células individuales o los grupos de células cancerosas adquieren la capacidad de separarse y alejarse del tumor primario, migrar a través del tejido circundante e ingresar al sistema linfático y/o circulación sanguínea, el rasgo metastásico del tumor dado se vuelve evidente [1-3 ]. Las células tumorales que escapan de su microambiente primario necesitan evitar el anoikis y pueden ser desafiadas por la defensa inmunológica del huésped. Finalmente, la CTC es como una semilla que se transfiere a otros órganos, contribuyendo a la metástasis y la recurrencia. Estos CTC podrían enriquecerse y detectarse mediante diferentes tecnologías que aprovechan sus propiedades físicas y biológicas. Este estudio recopiló CTC mediante la plataforma iset que verifica CTC (preoperatorio\postoperatorio\pretratamiento\durante el tratamiento) y observó la asociación entre los recuentos de CTC y el desarrollo de PC [4].

Se demostró que el xenoinjerto derivado del paciente (PDX) retuvo de manera constante la morfología tumoral y el fenotipo genético. A diferencia del modelo de xenotrasplante de línea celular tradicional y el modelo de ratón modificado genéticamente, las muestras de adenocarcinoma pancreático se injertaron en ratones inmunodeficientes. Sobre todo, PDX podría mantener la estructura genética funcional especial y los biomarcadores en el caso personal, más cerca de las características biológicas clínicas individuales y proporcionar un mejor efecto de predicción para la detección de drogas y la observación de la eficacia del tratamiento.

Como descubrieron algunos investigadores, la eficacia de contrastar la prueba de sensibilidad al fármaco con la respuesta clínica al fármaco es >90 % [5]. Ahora, construimos el PDX de PC, verificando la información genética por la segunda secuencia genética o secuencia de ARN. Si PDX tiene información genética similar a la del tumor primario, haremos una prueba de sensibilidad al fármaco. El modelo PC PDX, mediante el cual hemos demostrado que el PDX temprano era morfológicamente similar al cáncer original y conservaba la heterogeneidad del tumor entre pacientes e intrapacientes, podría proporcionar un modelo de referencia para el tratamiento personalizado de PC.

Sobre todo, la ventaja más evidente de PDX es la similitud con el tumor primario, por lo que pudimos comprobar la sensibilidad del mismo fármaco. Pero construir PDX tomará alrededor de 3 a 4 meses (incluyendo la construcción del modelo y la prueba de sensibilidad a las drogas). Como resultado, necesitamos un plan terapéutico de precisión clínica que se aplique a los pacientes con cáncer de páncreas desarrollados. El xenoinjerto derivado del paciente en miniatura (Mini-PDX), de Shanghai LIDE(lide) Biotech CO(company), se llevó a cabo con el producto OncoVeeTM-Mini PDX de LIDE Biotech y siguió las instrucciones del fabricante. Las muestras tumorales se recogieron y se lavaron con HBSS (solución salina equilibrada de Hank) para eliminar el tejido no tumoral y el tejido tumoral necrótico en una cabina de bioseguridad. Después de cortar las muestras de tumor en pequeños fragmentos, se incubaron con una solución de colagenasa a 37 ℃ durante 1-2 horas. Luego recolectamos las células y luego eliminamos las células sanguíneas y las células de fibroblastos y la suspensión celular se transfirió a las cápsulas lavadas con HBSS. Para la implantación subcutánea (s.c.), se hizo una pequeña incisión en la piel y se insertó la cápsula a través del tejido subcutáneo. Generalmente, cada ratón recibió 4 cápsulas y la administración del fármaco se llevó a cabo durante 7 días. La actividad antitumoral se evaluó mediante el ensayo CTG (viabilidad celular).

La combinación de células alimentadoras de fibroblastos irradiados y el inhibidor de la quinasa Rho, Y-27632, indujo condicionalmente un estado proliferativo indefinido en células epiteliales primarias de mamíferos. Estas células reprogramadas condicionalmente (CRC) eran cariotipo estables y no tumorigénicas. Debido a que la autorrenovación era una propiedad reconocida de las células madre, investigamos si Y-27632 y las células alimentadoras inducían un fenotipo similar al de un tallo. Descubrimos que los CRC compartían características de las células madre adultas y exhibían una expresión regulada al alza de las integrinas α6 y β1, ΔNp63α, CD44 y la transcriptasa inversa de la telomerasa, así como una disminución de la señalización de Notch y un aumento del nivel de β-catenina nuclear. La inducción de CRC fue rápida (ocurre dentro de 2 d) y resultó de la reprogramación de toda la población celular en lugar de la selección de una subpoblación menor. Los CRC no sobreexpresaron los conjuntos de factores de transcripción característicos de las células madre pluripotentes embrionarias o inducidas (p. ej., Sox2, Oct4, Nanog o Klf4). La inducción de CRC también fue reversible, y la eliminación de Y-27632 y los alimentadores permitió que las células se diferenciaran normalmente. CRCs fue llamado en el protocolo de precisión humana de noticias. En el estudio de precisión del cáncer de páncreas, los pacientes inoperables o desarrollados que adquirieron poco tejido no pudieron generar PDX y perdieron la posibilidad de recibir tratamiento con PDX. Por lo tanto, utilizamos la plataforma de CRC para cultivar células madre tumorales in vitro; cuando teníamos las células adecuadas, podíamos realizar un ensayo de fármacos Mini-PDX o PDX[6].

En resumen, dado que las diferentes etapas de los pacientes con CP no pueden adquirir una precisión personalizada en el tratamiento clínico en la actualidad, se predijo que este estudio realizado por las plataformas CTC\PDX\Mini-PDX\CRs\RNA-SEQ\NGS (Next generation sequencing) proporcionaría un diagnóstico de precisión y tratamiento para los diferentes estadios de los pacientes con CP. Mientras tanto, pudimos construir un biobanco de información tumoral, que proporcionó materiales de investigación y plataformas ideales para la investigación básica en oncología y la investigación en medicina traslacional.