Personalisierte Präzisionsdiagnose und Behandlung von Bauchspeicheldrüsenkrebs (PPDTPC)

Tumorzellen werden aus dem Primärtumor und/oder den metastatischen Stellen ins Blut freigesetzt. Zirkulierende Tumorzellen (CTC) werden als Teil der Flüssigbiopsie als neue Methode zur Diagnose von Krebs eingesetzt. Viele Studien zeigten, dass die CTC-Zahlen mit der Entwicklung von Brust-, Dickdarm-, Lungen- oder Prostatakrebs korrelieren. Wenn einzelne Zellen oder Cluster von Krebszellen die Fähigkeit erwerben, sich vom Primärtumor zu trennen und zu entfernen, durch das umgebende Gewebe zu wandern und in das Lymphsystem und/oder den Blutkreislauf einzudringen, wird das metastasierende Merkmal des jeweiligen Tumors offensichtlich [1-3 ]. Tumorzellen, die aus ihrer primären Mikroumgebung entkommen, müssen Anoikis vermeiden und könnten durch die immunologische Abwehr des Wirts herausgefordert werden. Schließlich ist CTC wie ein Samen, der auf andere Organe übertragen wird und zur Metastasierung und Rezidiv beiträgt. Diese CTC könnten über verschiedene Technologien angereichert und nachgewiesen werden, die sich ihre physikalischen und biologischen Eigenschaften zunutze machen. Diese Studie sammelte CTC durch die iset-Plattform, die CTC (präoperativ\postoperativ\vor der Behandlung\während der Behandlung) überprüft und den Zusammenhang zwischen CTC-Zahlen und PC-Entwicklung beobachtete [4].

Es wurde gezeigt, dass von Patienten stammendes Xenotransplantat (PDX) die Tumormorphologie und den genetischen Phänotyp konsistent beibehielt. Anders als bei herkömmlichen Zelllinien-Xenotransplantationsmodellen und gentechnisch veränderten Mausmodellen wurden Pankreas-Adenokarzinom-Proben in immundefiziente Mäuse transplantiert. Vor allem könnte PDX die spezielle funktionelle Genstruktur und Biomarker im persönlichen Fall näher an den individuellen klinisch-biologischen Merkmalen halten und einen besseren Vorhersageeffekt für das Arzneimittelscreening und die Beobachtung der Behandlungseffizienz bieten.

Wie einige Forscher herausfanden, beträgt die Wirksamkeit des Kontrastierens von Arzneimittelempfindlichkeitstests mit klinischem Arzneimittelansprechen > 90 % [5]. Jetzt bauen wir die PDX von PC und überprüfen die genetische Information durch die zweite genetische Sequenz oder RNA-Sequenz. Wenn PDX ähnliche genetische Informationen wie der Primärtumor hat, führen wir einen Arzneimittelsensitivitätstest durch. Das PC-PDX-Modell, mit dem wir gezeigt haben, dass das frühe PDX dem ursprünglichen Krebs morphologisch ähnlich war und sowohl die Interpatienten- als auch die Intrapatienten-Heterogenität des Tumors beibehielt, könnte ein Referenzmodell für die personalisierte Behandlung von PC liefern.

Der offensichtlichste Vorteil von PDX ist vor allem die Ähnlichkeit zum Primärtumor, sodass wir die Empfindlichkeit desselben Medikaments überprüfen konnten. Aber das Erstellen von PDX wird etwa 3-4 Monate dauern (einschließlich des Erstellens des Modells und des Arzneimittelempfindlichkeitstests). Infolgedessen benötigen wir einen klinischen Präzisionstherapieplan, der für die entwickelten Bauchspeicheldrüsenkrebspatienten gilt. Miniature Patient Derived Xenograft (Mini-PDX) von Shanghai LIDE(lide) Biotech CO(company) wurde mit dem OncoVeeTM-Mini PDX-Produkt von LIDE Biotech durchgeführt und folgte den Anweisungen des Herstellers. Tumorproben wurden geerntet und mit HBSS (ausgeglichene Salzlösung von Hank) gewaschen, um Nicht-Tumorgewebe und nekrotisches Tumorgewebe in der Biosicherheitskammer zu entfernen. Nachdem die Tumorproben in kleine Fragmente geschnitten wurden, wurden sie mit Kollagenaselösung bei 37 ° C für 1-2 Stunden inkubiert. Dann sammelten wir die Zellen, gefolgt von der Entfernung der Blutzellen und Fibroblastenzellen, und die Zellsuspension wurde in die mit HBSS gewaschenen Kapseln überführt. Für die subkutane (s.c.) Implantation wurde ein kleiner Hautschnitt vorgenommen und die Kapsel durch das subkutane Gewebe eingeführt. Im Allgemeinen erhielt jede Maus 4 Kapseln und die Arzneimittelverabreichung wurde 7 Tage lang durchgeführt. Die Anti-Tumor-Aktivität wurde durch den CTG-Test (Zelllebensfähigkeit) bewertet.

Die Kombination von bestrahlten Fibroblasten-Feeder-Zellen und Rho-Kinase-Inhibitor, Y-27632, induzierte bedingt einen unbestimmten proliferativen Zustand in primären Säuger-Epithelzellen. Diese bedingt reprogrammierten Zellen (CRCs) waren karyotypstabil und nicht tumorigen. Da die Selbsterneuerung eine anerkannte Eigenschaft von Stammzellen war, untersuchten wir, ob Y-27632 und Feeder-Zellen einen stammähnlichen Phänotyp induzierten. Wir fanden heraus, dass CRCs Eigenschaften von adulten Stammzellen teilten und eine hochregulierte Expression von α6- und β1-Integrinen, ΔNp63α, CD44 und Telomerase-Reverse-Transkriptase sowie eine verringerte Notch-Signalübertragung und einen erhöhten Gehalt an nukleärem β-Catenin aufwiesen. Die Induktion von CRCs erfolgte schnell (tritt innerhalb von 2 Tagen auf) und resultierte eher aus der Umprogrammierung der gesamten Zellpopulation als aus der Selektion einer kleineren Subpopulation. CRCs überexprimierten die für embryonale oder induzierte pluripotente Stammzellen (z. B. Sox2, Oct4, Nanog oder Klf4) charakteristischen Transkriptionsfaktorsätze nicht. Die Induktion von CRCs war ebenfalls reversibel, und die Entfernung von Y-27632 und Feedern erlaubte den Zellen, sich normal zu differenzieren. CRCs wurde nach dem Nachrichtenprotokoll für menschliche Präzision aufgerufen. In der Präzisionsstudie zu Bauchspeicheldrüsenkrebs konnten Patienten mit inoperablem oder entwickeltem Gewebe, die ein wenig Gewebe erworben hatten, kein PDX aufbauen und verloren die Chance auf eine PDX-Behandlung. Daher haben wir die CRCs-Plattform verwendet, um Tumorstammzellen in vitro zu züchten. Wenn wir ausreichende Zellen hatten, konnten wir einen Mini-PDX- oder PDX-Arzneimitteltest durchführen[6].

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass diese Studie von CTC\PDX\Mini-PDX\CRs\RNA-SEQ\NGS (Sequenzierung der nächsten Generation)-Plattformen, da verschiedene Stadien von PC-Patienten derzeit keine personalisierte Präzision in der klinischen Behandlung erlangen konnten, eine Präzisionsdiagnose ermöglichen sollte und Behandlung für verschiedene Stadien von PC-Patienten. In der Zwischenzeit konnten wir eine Tumorinformations-Biobank aufbauen, die ideale Forschungsmaterialien und Plattformen für die onkologische Grundlagenforschung und die translationale Medizinforschung bereitstellte.