健康志愿者的伤口愈合

背景和基本原理 皮肤在保护方面起着至关重要的作用，它充当外部和内部环境之间免受损害和病原体侵害的屏障。 伤口会破坏皮肤和下层软组织的功能和正常结构，从而损害其保护作用。 作为对损伤的反应，伤口会愈合以快速恢复缺陷。 该过程涉及角质形成细胞、成纤维细胞、内皮细胞、巨噬细胞和血小板等的激活，并由多个阶段组成，包括止血、炎症、迁移和细胞增殖以及成熟和重塑。 图 2 描绘了伤口愈合过程的简化示意图。由于各种细胞类型、细胞外基质和许多反应性分子的广泛参与，伤口愈合的每个阶段都会在组织内产生特征性变化。 该过程中任何环节的缺陷都可能导致伤口愈合延迟、异常疤痕形成或慢性伤口。

为了研究健康志愿者的伤口愈合，先前的文献中描述了一种具有皮肤打孔活检的挑战模型。 然而，由于省略了对活组织检查的高级分析，因此并未全面对该模型进行表征。 此外，在之前的研究中进行的分析仅部分描述了伤口愈合过程，要么是由于表征时间点不足，要么是缺乏对多种伤口愈合方式的同时评估。 此外，包括热成像、3D 摄影、多光谱成像在内的新型非侵入性成像方法能够对伤口形态进行更全面的分析。

本研究的总体目标是开发一种标准化模型，以暂时和局部诱发皮肤创伤，以研究伤口愈合和监测伤口闭合情况。 该临床模型将在未来作为药理学验证和概念验证研究以及早期药物开发计划中的药物分析应用。 更具体地说，该试验的目的是在对健康志愿者进行皮肤打孔活组织检查后，使用一系列皮肤病学评估，探索和描述在不同阶段过程中明确定义的皮肤创伤和自然伤口愈合过程的诱导。 此外，还将评估安全性和耐受性。

将通过生物物理、生物化学、成像、临床参数和受试者报告的结果来表征和监测皮肤穿刺活检后的伤口愈合效果。

目标 主要目标

• 描述和监测标准化诱发皮肤外伤后的伤口愈合 次要目标
• 评估活检引起的皮肤创伤的安全性和耐受性 设计 这是一项观察性、单中心、单组研究。 治疗活检部位将使用不粘纱布敷料通过二次愈合意图进行治疗，然后在 48 小时后不进行治疗。

研究药物 不适用 比较药物 本研究中将不使用比较药物。 研究周期 研究的总持续时间约为 14 周：4 周用于筛选，10 周用于观察。 受试者将访问 CHDR 14 次。

受试者/组 计划招募健康志愿者共18名。 该研究将涉及 1 个随机重复活检收集时间的队列。 在第 0 天从每个志愿者身上取下背部的三个皮肤钻孔活组织检查（3 毫米），其间的距离约为 3-5 厘米。 所有活检病变将用纱布敷料（Jelonet®、石蜡纱布 + Tegaderm®）处理 48 小时，然后去除纱布。 此后，活检病变将保持未处理状态。 在第 0 天采集的一个活检样本将作为重复样本的基线测量，这些样本涉及组织学、免疫组织化学和 RNA 测序（RNA-seq）或实时逆转录聚合酶链反应（qRT-PCR）评估。

在第 7 天、第 14 天或第 21 天（随机化活检病变和天数）和第 28 天、42 天或第 56 天（随机化活检病变和天数）对所有受试者进行与第 0 天相同位置的重复活检。 观察活检（活检病灶随机化）将作为主要活检，并随后进行所有测量。 所有重复的活检病变也将用纱布敷料（Jelonet®，石蜡纱布 + Tegaderm®）处理 48 小时，然后移除纱布并开始观察。

队列：1 观察期（第 2 天 - 第 70 天）：第 0 天进行的 3 次活检

• 在第 7、14 或 21 天进行 1 次重复活检（随机）
• 在第 28、42 或 56 天进行 1 次重复活检（随机）
• 1 次目标（主要）活检，用于观察，无需再次切除 受试者人数：18

纳入标准

符合条件的受试者必须在筛选时满足以下所有纳入标准：

1. 健康受试者，年龄18至30岁（含）。 通过详细病史、完整的身体检查（包括生命体征、血液学、化学和病毒学的血液采样、尿液分析、尿液药物和可替宁测试）后没有任何临床显着活动性或不受控制的慢性疾病的证据来验证健康状况，和酒精呼吸测试。 在不确定或有问题的结果的情况下，筛选期间进行的测试可能会在随机化之前重复进行，以确认资格或判断为与健康受试者临床无关。
2. 体重指数 (BMI) 在 18 到 30 kg/m2 之间，包括在内
3. Fitzpatrick I-II 型皮肤（高加索人型）。
4. 符合条件的下背部进行活组织检查（无毛发过度生长，无局部皮肤病）
5. 愿意提供书面知情同意书，愿意并能够遵守研究方案。

排除标准

符合条件的受试者在筛选时必须不符合以下排除标准：

1. 病理性疤痕形成史（瘢痕疙瘩、增生性疤痕）
2. 任何形式的下背部身体改变都会阻碍未改变皮肤的活检收集（例如 纹身、穿孔、植入物）
3. 任何与免疫系统受损有关的疾病，包括自身免疫性疾病、艾滋病毒和移植患者。
4. 在入组前 30 天内或计划在研究过程中使用的免疫抑制或免疫调节药物的要求，包括糖皮质激素、非甾体抗炎药 (NSAID) 和化疗药物。
5. 有任何当前和/或复发的病理、临床显着相关皮肤状况。
6. 在研究开始后 30 天内使用局部药物（处方药或非处方药 (OTC)）。 局部治疗区。
7. 怀孕、妊娠试验呈阳性、打算怀孕或正在哺乳。
8. 当前吸烟者和/或其他含尼古丁产品（例如贴片）的经常使用者。
9. 每周平均饮酒超过 14 个单位
10. 入组后 3 周内或计划在研究过程中因日光浴、过度日晒或日光浴而晒黑
11. 筛选前 3 个月内或每年 4 次以上参与研究性药物或器械研究。
12. 筛查前三个月内失血或献血超过 500 毫升。
13. 研究者认为可能危及受试者的安全或依从性或可能妨碍受试者成功完成临床试验的任何（医学）状况。

合并用药 在研究开始前 21 天内或少于 5 个半衰期（以较长者为准）以及研究过程中，不允许使用处方药或非处方药（不包括复合维生素）。 在局部疼痛的情况下，扑热息痛（最多 4 克/天）除外。 止痛药的使用将由研究者单独决定。 只有在讨论并明确记录理由的情况下，才会出现其他例外情况。

端点

• 活检生物标志物：

  • 组织学与苏木精和伊红 (HE) 染色
  • 具有伤口愈合相关生物标志物的免疫组织化学（例如 CD31、I 型胶原蛋白、III 型胶原蛋白、aSMA、纤连蛋白）
  • RNA-seq 或 qRT-PCR 用于伤口愈合相关的生物标志物（例如 VEGFα、TGFβ1、TGFβ2、TGFβ3、PDGF、CTGF、TNF、IL-1B、IL-4、GM-CSF、IL-6、IL-10、MMP1、MMP3、OSM、LOX）
• 用于伤口愈合相关生物标志物的局部皮肤生物标志物（例如 VEGF-A、TNFα、IL-8、TLSP、MMP-3、IL-4) 通过透皮分析贴片 (TAP)
• 临床影像学（例如 2D 和 3D 摄影、热成像、激光散斑对比成像 (LSCI)、经表皮失水 (TEWL)、比色法）
• 临床评估（红斑分级量表、红-黄-黑 (RYB) 伤口评估量表、患者和观察者疤痕评估量表 (POSAS)）
• 皮肤微生物组（健康和活检病变）耐受性/安全性终点
• 不良事件 (AE)
• 局部耐受性（红斑分级量表、RYB 伤口评估量表、POSAS、NRS 瘙痒和疼痛） 所有上述药效学和安全性测量将在研究期间根据访问和评估时间表进行多次。

样本量证明 将调查 18 名健康志愿者的总队列规模。 这是有道理的，因为主要目标是探索和监测伤口愈合模型。 鉴于研究的探索性特征，未进行正式的功效计算。

统计方法 数据列表和平均值将用于药效学和安全措施。

鉴于该研究的探索性特征，将主要使用描述性统计分析药效学终点。 将按时间总结所有药效学终点（均值、中值、最小值和最大值的均值和标准差），并且还将以图形方式呈现为随时间变化的均值，标准差作为误差条。 标称结果、对数转换结果和基线结果的变化都将用于所有数据摘要。 所有分类药效学终点将按频率进行总结。