Sårläkning hos friska frivilliga

Bakgrund & motivering Huden spelar en avgörande roll i skyddet där den fungerar som en barriär från skador och patogener mellan den yttre och inre miljön. Sår äventyrar sin skyddande roll genom att störa funktionen och den normala strukturen hos huden och den underliggande mjukvävnaden. Som ett svar på skada sker sårläkning för att snabbt återställa defekten. Denna process involverar aktivering av bland annat keratinocyter, fibroblaster, endotelceller, makrofager och blodplättar och består av flera faser inklusive hemostas, inflammation, migration och cellproliferation, och mognad och ombyggnad. Ett förenklat schema över sårläkningens förlopp visas i figur 2. På grund av den breda involveringen av olika celltyper, extracellulär matris och många reaktiva molekyler producerar varje fas i sårläkning karakteristiska förändringar i vävnaden. En brist i någon del av processen kan leda till försenad sårläkning, onormal ärrbildning eller kroniska sår.

För att studera sårläkning hos friska frivilliga har en utmaningsmodell med hudpunchbiopsier beskrivits i litteraturen tidigare. Men karakteriseringen av denna modell utfördes inte heltäckande eftersom avancerad analys av biopsier utelämnades. Dessutom beskrev analyser utförda i tidigare studier endast delvis sårläkningsprocesser antingen genom otillräckliga tidpunkter för karakterisering eller knappa samtidiga utvärderingar av flera sårläkningsmodaliteter. Dessutom möjliggör nya icke-invasiva avbildningsmetoder inklusive termografi, 3D-fotografering, multispektral avbildning en mer omfattande profilering av sårmorfologin.

Det övergripande syftet med denna studie är att utveckla en standardiserad modell för att tillfälligt och lokalt inducera ett hudtrauma för att undersöka sårläkning och övervaka sårtillslutning. Denna kliniska modell kommer att möjliggöra framtida tillämpning som proof-of-pharmacology och proof-of-konceptstudier samt läkemedelsprofilering i tidiga läkemedelsutvecklingsprogram. Mer specifikt är syftet med försöket att utforska och karakterisera induktionen av väldefinierade hudtrauma och naturliga sårläkningsprocesser under loppet av de olika faserna med hjälp av ett batteri av dermatologiska bedömningar efter hudpunchbiopsier hos friska frivilliga. Vidare kommer säkerhet och tolerabilitet att bedömas.

Karaktärisering och övervakning av sårläkningseffekter efter hudpunchbiopsier kommer att utföras med hjälp av biofysikaliska, biokemiska, imaging, kliniska parametrar och ämnesrapporterade resultat.

Mål Primärt mål

• Att karakterisera och övervaka sårläkning efter ett standardiserat, inducerat hudtrauma Sekundära mål
• För att utvärdera säkerhet och tolerabilitet av biopsi-inducerat hudtrauma Design Detta är en observationsstudie med ett centrum och en arm. Behandlinger Biopsiställen kommer att behandlas genom sekundär läkningsavsikt med ett non-stick kompress följt av ingen behandling efter 48 timmar.

Undersökningsläkemedel Ej tillämpligt Jämförande läkemedel Inget jämförande läkemedel kommer att användas i denna studie. Studieperioder Studiens totala varaktighet kommer att vara cirka 14 veckor: 4 veckor för screening och 10 veckors observation. Försökspersoner kommer att besöka CHDR 14 gånger.

Ämnen / grupper Totalt 18 friska frivilliga planeras att registreras. Studien kommer att omfatta 1 kohort med en randomiserad upprepad biopsiinsamlingstid. Tre hudpunchbiopsier (3 mm) av nedre delen av ryggen kommer att tas från varje frivillig dag 0, med ett avstånd på cirka 3-5 cm emellan. Alla biopsiskador kommer att behandlas med ett kompress (Jelonet®, paraffingasväv + Tegaderm®) i 48 timmar, varefter gasväven tas bort. Härefter kommer biopsiskadorna att förbli obehandlade. Ett biopsiprov taget på dag 0 kommer att fungera som baslinjemätning för de upprepade proverna avseende histologi, immunhistokemi och RNA-sekvensering (RNA-seq) eller realtid omvänd transkription polymeraskedjereaktion (qRT-PCR) bedömningar.

Upprepade biopsier på samma plats som på dag 0 kommer att tas dag 7, 14 eller 21 (biopsiskada och dag randomiserad), och dag 28, 42 eller 56 (biopsiskada och dag randomiserad) för alla försökspersoner. Observationsbiopsi (biopsiskada randomiserad) kommer att fungera som primär biopsi och följs för alla mätningar. Alla upprepade biopsiskador kommer också att behandlas med ett kompress (Jelonet®, paraffingasväv + Tegaderm®) i 48 timmar, varefter gasväven tas bort och observation påbörjas.

Kohort: 1 observationsperiod (dag 2 - dag 70): 3 biopsier tagna dag 0

• 1 upprepad biopsi tagen dag 7, 14 eller 21 (randomiserad)
• 1 upprepad biopsi tagen dag 28, 42 eller 56 (randomiserad)
• 1 mål (primär) biopsi för observation utan återexcision Antal försökspersoner: 18

Inklusionskriterier

Kvalificerade ämnen måste uppfylla alla följande inklusionskriterier vid screening:

1. Friska försökspersoner, 18 till 30 år (inklusive). Hälsostatusen verifieras genom att det saknas bevis för någon kliniskt signifikant aktiv eller okontrollerad kronisk sjukdom efter en detaljerad medicinsk historia, en fullständig fysisk undersökning inklusive vitala tecken, blodprovstagning av hematologi, kemi och virologi, urinanalys, urinläkemedel och kotinintestning, och alkoholutandningstest. Vid osäkra eller tvivelaktiga resultat kan tester som utförts under screening upprepas före randomisering för att bekräfta valbarhet eller bedömas vara kliniskt irrelevanta för friska försökspersoner.
2. Body mass index (BMI) mellan 18 och 30 kg/m2, inklusive
3. Fitzpatrick Hudtyp I-II (kaukasisk typ).
4. Kvalificerad ländrygg för att utföra biopsier (ingen överdriven hårväxt, ingen lokal hudsjukdom)
5. Villig att ge skriftligt informerat samtycke och villig och kapabel att följa studieprotokollet.

Exklusions kriterier

Kvalificerade försökspersoner får inte uppfylla något av följande uteslutningskriterier vid screening:

1. Historik av patologisk ärrbildning (keloid, hypertrofiska ärr)
2. Varje form av kroppsmodifiering av nedre delen av ryggen hindrar biopsiinsamling av oförändrad hud (t.ex. tatueringar, piercingar, implantat)
3. Alla sjukdomar som är förknippade med nedsatt immunsystem, inklusive autoimmuna sjukdomar, HIV och transplantationspatienter.
4. Krav på immunsuppressiv eller immunmodulerande medicin, inklusive glukokortikoider, icke-steroida antiinflammatoriska läkemedel (NSAID) och kemoterapeutiska läkemedel inom 30 dagar före inskrivning eller planerad att användas under studiens gång.
5. Har något aktuellt och/eller återkommande patologiskt, kliniskt signifikant relevant hudtillstånd.
6. Användning av aktuell medicinering (receptbelagd eller receptfri (OTC)) inom 30 dagar efter studiens början. lokalt behandlingsområde.
7. Gravid, ett positivt graviditetstest, avser att bli gravid eller ammar.
8. Aktuell rökare och/eller regelbunden användare av andra nikotinhaltiga produkter (t.ex. plåster).
9. Genomsnittlig konsumtion av mer än 14 enheter alkohol per vecka
10. Solning på grund av solbad, överdriven solexponering eller ett solarium inom 3 veckor efter anmälan eller planerat att göra det under studiens gång
11. Deltagande i en läkemedels- eller enhetsstudie inom 3 månader före screening eller mer än 4 gånger per år.
12. Förlust eller donation av blod över 500 ml inom tre månader före screening.
13. Varje (medicinskt) tillstånd som, enligt utredarens åsikt, potentiellt skulle äventyra patientens säkerhet eller överensstämmelse eller kan hindra försökspersonerna från att framgångsrikt slutföra den kliniska prövningen.

Samtidig medicinering Inga receptbelagda läkemedel eller receptfria läkemedel (exklusive multivitaminer) kommer att tillåtas inom 21 dagar före studiens början, eller mindre än 5 halveringstider (beroende på vilket som är längre), och under studiens gång. Undantag är paracetamol (upp till 4 g/dag) vid lokal smärta. Användning av smärtstillande läkemedel kommer att bestämmas av utredaren individuellt. Övriga undantag görs endast om motiveringen är diskuterad och tydligt dokumenterad.

Slutpunkter

• Biopsibiomarkörer:

  • Histologi med hematoxylin och eosin (HE) färgning
  • Immunhistokemi med sårläkningsrelaterade biomarkörer (t.ex. CD31, kollagen I, kollagen III, aSMA, fibronektin)
  • RNA-seq eller qRT-PCR för sårläkningsrelaterade biomarkörer (t.ex. VEGFα, TGFβ1, TGFβ2, TGFβ3, PDGF, CTGF, TNF, IL-1B, IL-4, GM-CSF, IL-6, IL-10, MMP1, MMP3, OSM, LOX)
• Lokala hudbiomarkörer för sårläkningsrelaterade biomarkörer (t.ex. VEGF-A, TNFα, IL-8, TLSP, MMP-3, IL-4) genom transdermal analysplåster (TAP)
• Klinisk avbildning (t.ex. 2D- och 3D-fotografering, termografi, laserfläckkontrastavbildning (LSCI), transepidermal vattenförlust (TEWL), kolorimetri)
• Klinisk utvärdering (erythema graderingsskala, Red-Yellow-Black (RYB) sårbedömningsskala, Patient and Observer Scar Assessment Scale (POSAS))
• Hudmikrobiom (friska och biopsiskador) Tolerabilitet/säkerhetseffekter
• Biverkningar (AE)
• Lokal tolerans (erytemgraderingsskala, RYB sårbedömningsskala, POSAS, NRS pruritus och smärta) Alla ovan nämnda farmakodynamiska och säkerhetsmätningar kommer att utföras flera gånger under studien enligt besöks- och bedömningsschemat.

Provstorlek Motivering En total kohortstorlek på 18 friska frivilliga kommer att undersökas. Detta är motiverat eftersom det primära målet är att utforska och övervaka sårläkningsmodellen. Ingen formell effektberäkning utfördes med tanke på studiens utforskande karaktär.

Statistisk metod Datalistor och medelvärden kommer att presenteras för farmakodynamik och säkerhetsåtgärder.

Med tanke på studiens explorativa karaktär kommer farmakodynamiska effektmått i första hand att analyseras med hjälp av beskrivande statistik. Alla farmakodynamiska effektmått kommer att sammanfattas (medelvärde och standardavvikelse för medelvärdena, medianvärdena, lägsta och maximivärden) efter tid och kommer också att presenteras grafiskt som medelvärde över tid, med standardavvikelse som felstaplar. Både nominella resultat och log-transformerade resultat och förändringar från baslinjeresultat kommer att användas i alla datasammanfattningar. Alla kategoriska farmakodynamiska effektmått kommer att sammanfattas efter frekvenser.