肠道原生动物和蠕虫在溃疡性结肠炎病程中的作用

前瞻性队列和随机、双盲、安慰剂对照研究将在乌兹别克斯坦共和国公共卫生部共和国第一临床医院的流行病学、微生物学和传染病研究所和结肠直肠科进行。

参与者 UC 的诊断将根据溃疡性结肠炎范围和严重程度的蒙特利尔分类（Silverberg MS 等人，2006 年），使用标准的临床、内窥镜、影像学和病理学标准来确认。 UC 类别包括直肠炎、左侧结肠炎和广泛性结肠炎或全结肠炎。 疾病的活动将通过 Mayo Clinic 评分来衡量，该评分由 4 个项目组成：排便频率、直肠出血、可屈性直肠乙状结肠镜检查结果和患者的功能评估（D'Haens G 等人，2007 年）。 疾病持续时间将从症状第一次出现开始以年为单位进行测量。

在共和国第一临床医院结肠直肠科住院的 UC 患者将在手术前接受检查并接受药物治疗。 其他队列组：第 1 组将包括在服用硝唑尼特（单一疗法）前后检查的感染人型双歧杆菌的 UC 患者，第二组将包括服用硝唑尼特和美沙拉秦（联合疗法）前后感染人型双歧杆菌的 UC 患者治疗）和第三个 - UC 患者在服用美沙拉嗪（单一疗法）之前和之后感染了人型双歧杆菌。

对照组将包括没有任何胃肠道不适的塔什干地区居民，他们将向诊所申请进行计划的体检。 建议的人口年龄为 17 至 90 岁

排除标准诊断为克罗恩氏病的患者将被排除在分析之外。 其他排除标准包括中毒性巨结肠、腹腔脓肿、有症状的结肠狭窄、造口、结肠切除术史、感染性并发症风险增加（例如由于近期化脓性感染、粪便微生物分析中检测到肠道病原体、活动性或潜伏性结核病、免疫缺陷、乙型或丙型肝炎或最近的活疫苗接种）、有临床意义的实验室异常、怀孕或哺乳、不稳定或不受控制的内科疾病、大手术的预期要求、结肠发育不良或腺瘤以及恶性肿瘤。

对于除上述之外的其他人群，以下患者将被排除在外：曾接受过手术、曾经使用过免疫抑制剂或生物药物、感染过肠道致病菌，包括艰难梭菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属、弯曲杆菌属、耶尔森氏菌属和分枝杆菌属的个体.

寄生虫学方法收集粪便样本。 在治疗前 2 天（所有参与者）和在硝唑尼特单药治疗、硝唑尼特联合美沙拉嗪和美沙拉嗪单药治疗的第 2 周以及第 6 和治疗开始后的第 12 周。 粪便样本 (1-2g.) 将收集在单独的容器中，用 5 毫升 Turdiev 的防腐剂提供原虫包囊和蠕虫卵的保存和染色一年。 Turdiev氏防腐剂包括：0.2%亚硝酸钠水溶液80毫升、甲醛10毫升、甘油2毫升、卢戈氏液8毫升、蒸馏水250毫升。

粪便样本 (1-2g.) 用于检测 C. parvum (Cryptosporidium parvum) 的样品将在寄生虫学检查前不少于 1 小时收集在单独的空容器中。

显微镜。 寄生虫学诊断将使用福尔马林-乙酸乙酯浓缩技术 [Truant AL, Elliott SH] 和碘染色涂片 [King M.] 通过三重粪便镜检查进行。 对于准备染色，将使用 Lugol 溶液。 原生动物的强度将通过在应用福尔马林 - 乙酸乙酯浓缩技术之前拍摄的碘染色涂片中视野（目镜 x10，物镜 x40）中的原生动物数量来估计，原生动物的数量将至少以 10视野。 视野中有1-2个、3-4个和5-6个微生物分别被认为是低强度、平均强度和高强度的感染。 为了检测细小念珠菌，将使用改良的 Ziehl-Neelsen 方法 [Henricksen SA, Pohlenz JF] 对制剂进行染色。 染色的涂片将用 ×100 油浸镜头扫描，以确定是否存在 C. parvum。

微生物学方法 微生物学方法将用于检测病原菌，包括艰难梭菌、沙门氏菌属、志贺氏菌属、弯曲杆菌属、耶尔森氏菌属和分枝杆菌，仅来自治疗前感染了人型双歧杆菌的 UC 患者。 如果检测到肠道致病菌，参与者将被排除在进一步调查之外。

收集粪便样本。 粪便样本将在治疗前从感染了人型双歧杆菌的 UC 患者收集到无菌、广口、螺旋盖容器中，并立即转移到实验室，最好在 2 小时内转移。 样本将被处理用于显微镜检查、厌氧和需氧培养以及 ELISA（仅适用于艰难梭菌）。

将提供 UC 患者和人群的程序寄生虫学检查。 感染 B. hominis 的其他 UC 患者将以双盲方式分为 3 个队列，接受以下治疗之一：(1) 感染 B. hominis 的 UC 患者将接受硝唑尼特治疗，1.0 g/天（两粒）连续 14 天口服两次； (2) 感染 B. hominis 的 UC 患者将服用硝唑尼特 1.0 克/天（一粒药丸 - 500 毫克）口服两次，美沙拉嗪 1.5 克/天（一粒药丸 - 500 毫克）每天口服三次连续14天； (3)UC感染的人型双歧杆菌患者将接受美沙拉嗪≥3g/天(一粒-500mg)口服治疗，连续14天，每天3次。 除药物外，三组患者均坚持饮食。 随访的目的是监测对药物的依从性并记录对治疗的反应、不良事件和症状的复发。

其他检测到的致病原虫和蠕虫按标准剂量的抗寄生虫药物治疗。

随访 研究分两个阶段进行。 在第一阶段，将提供治疗前 UC 患者和人群的寄生虫学检查。 在 UC 患者研究的第二阶段，将应用具有抗囊胚活性的人型双歧杆菌药物并监测治疗效果。 寄生虫学、微生物学、临床和内窥镜检查将在治疗前以及第 2、6 和 12 周进行。 每次访问时，将计算 Mayo Clinic 评分并确定人型双歧杆菌的强度/消除。

结果测量 治疗的结果测量是：人型双歧杆菌感染强度的根除/降低以及 UC 患者在第 2、6 和 12 周的临床反应将定义为 Mayo Clinic 评分的降低。