年轻希腊男性骨量的遗传和生活方式决定因素

材料与方法

科目

在这项横断面研究中，301 名年龄在 16-35 岁之间的希腊健康青年在希腊武装部队的等级考试中被选中。 接受过皮质类固醇、抗惊厥药或抗凝剂治疗或患有性腺功能减退症、肾脏、肝脏、甲状腺和胃肠道疾病或糖尿病的男性被排除在研究之外。

经医院伦理委员会批准并获得知情同意。 测量身高和体重的受试者穿着运动服，赤脚站在固定的测距仪和标准的临床天平上。 身高以厘米为单位记录，体重以公斤为单位。 定期监测测距仪和秤的准确度和精确度。 体重指数 (BMI) 计算为体重/身高 2 。

膳食评估

当前的饮食因素（钙、蛋白质、酒精、咖啡和茶的摄入量）使用在 MEDOS 研究中验证的食物频率问卷进行评估，并通过访谈完成。 考虑到牛奶、酸奶和奶酪的摄入量，估计了钙的摄入量。 通过考虑每周的肉类和鱼类消费量来估计蛋白质摄入量。 茶和咖啡的消费也被考虑在内。

使用问卷调查非节食因素

身体被量化为每周体育活动的小时数（定义为参加有组织的运动至少 12 个月）。 吸烟行为被编码为“是”（每天吸烟）或“否”，以及前 3 个月在国外有暴露的日光暴露情况。 固定的持续时间也被编码为“少于”或“超过 1 个月”（大多数是由于高能量创伤引起的骨折）。

基因分析

使用 DNA 提取试剂盒（Puregene DNA 分离试剂盒，Gentra Systems Inc.，Munich，Germany）从外周血白细胞中提取基因组 DNA。 CTR 和 VDR 基因中的多态性通过聚合酶链反应 (PCR) 确定，如前所述，使用 Taq DNA 聚合酶（Takara，东京，日本）和热循环仪（PCR Primus 96 plus-MWG AG BIOTECH）。 根据制造商的说明，用 AluI（英国新英格兰生物实验室）消化 4μl 的 CTR-PCR 产物，用 BsmI（英国新英格兰生物实验室）消化 2μl 的 VDR-PCR 产物。 AluI 限制性消化产生 120/108-bp (TT)、228/120/108-bp (TC) 和 228-bp (CC) 的 DNA 片段，BsmI 限制性消化产生 1200/650-bp (bb) 的 DNA 片段， 1850/1200/650-bp (Bb) 和 1850-bp (BB)，使用分别用溴化乙锭染色的 3% 和 1% 琼脂糖凝胶进行可视化。

骨密度测量

桡骨远端 BMC (dBMC)、远端 BMD (dBMD) 和超远端 BMD (udBMD) 通过单一 X 射线吸收测定法（Osteometer DTX-100，丹麦）测量。 此外，还评估了相应的几何区域，例如桡骨区域 (RadAr)、尺骨区域 (UlnAr) 和超远端区域 (udAr)。 BMD表示为克/平方厘米； BMC 以克表示，面积以 cm2 表示。我们实验室 BMD 和 BMC 测量的体内精度为 1-5%。

统计分析

确定所有变量的描述性统计。 所有变量都使用平均值 (mean) 和标准偏差 (SD) 充分表示。

使用双样本学生检验或 Welch 检验（在 SD 不相等的情况下）和没有重复测量的单向方差分析模型（使用 Tukey 检验分析成对多重比较）进行单变量分析。 协方差分析 (ANCOVA) 使用骨骼值（BMC、BMD、面积）作为因变量，VDR 和 CTR 多态性作为因子，年龄、体重和身高作为协变量。 此外，使用多元逐步回归分析来确定 BMD 的重要预测因子。 所有测试都是双面的； P<0, 05 定义为显着。 所有数据分析均使用社会科学统计软件包（版本 10.0）软件（SPSS Inc.，Chicago，IL）进行。