De genetiska och livsstilsbestämmande faktorerna för benmassa hos unga grekiska män

Material och metoder

Ämnen

I denna tvärsnittsstudie valdes 301 friska grekiska unga män i åldern 16-35 ut under examensprov för den grekiska försvarsmakten. Män som behandlades med kortikosteroider, antikonvulsiva eller antikoagulantia eller som led av hypogonadism, njure, lever, sköldkörtel- och gastrointestinala sjukdomar eller diabetes mellitus exkluderades från studien.

Godkännande av sjukhusets etiska kommitté och informerat samtycke erhölls. Längd och kroppsvikt mättes med försökspersonerna i sportkläder, stående barfota på en fast stadiometer och på en vanlig klinisk balans. Längden registrerades i centimeter och vikten i kilogram. Stadiometern och skalan övervakades rutinmässigt för noggrannhet och precision. Body mass index (BMI) beräknades som vikt/längd 2 .

Kostutvärdering

Aktuella kostfaktorer (kalcium, proteiner, alkohol, kaffe och teintag) utvärderades med hjälp av ett frågeformulär för matfrekvens som validerats i MEDOS-studien och kompletterades med en intervju. Kalciumintaget uppskattades med tanke på konsumtion av mjölk, yoghurt och ost. Proteinintaget uppskattades genom att ta hänsyn till konsumtionen av kött och fisk per vecka. Te- och kaffekonsumtion togs också i beaktande.

Nondieter-faktorer undersöktes med hjälp av ett frågeformulär

Fysiskt kvantifierades som timmar av idrottsaktiviteter per vecka (definierat som deltagande i organiserad idrott i minst 12 månader). Rökningsbeteende kodades som "ja" (daglig rökning) eller "nej", och exponering för solljus när det förekom exponering på platser utomlands under de senaste 3 månaderna. Varaktigheten av immobiliseringar kodades också som "mindre" eller "mer än 1 månad" (de flesta på grund av frakturer orsakade av högenergitrauma).

Genetiska analyser

Genomiskt DNA extraherades från perifera blodleukocyter med ett DNA-extraktionskit (Puregene DNA-isoleringskit, Gentra Systems Inc., München, Tyskland). Polymorfismer i CTR- och VDR-generna bestämdes genom polymeraskedjereaktion (PCR) som tidigare beskrivits med användning av Taq DNA-polymeras (Takara, Tokyo, Japan) och termisk cykler (PCR Primus 96 plus-MWG AG BIOTECH). 4 μl CTR-PCR-produkt digererades med AluI (New England Biolabs, Storbritannien) och 2 μl VDR-PCR-produkt digererades med BsmI (New England Biolabs, Storbritannien) enligt tillverkarens instruktioner. Alul restriktionsdigerering gav DNA-fragment på 120/108-bp (TT), 228/120/108-bp (TC) och 228-bp (CC) och BsmI-restriktionsdigerering gav DNA-fragment på 1200/650-bp (bb), 1850/1200/650-bp (Bb) och 1850-bp (BB), vilka visualiserades med användning av en 3% respektive 1% agarosgel färgad med etidiumbromid.

BMD-mätningar

Distal BMC (dBMC), distal BMD (dBMD) och ultradistal BMD (udBMD) vid radien mättes med enkelröntgenabsorptiometri (Osteometer DTX-100, Danmark). Dessutom gjordes bedömningar av motsvarande geometriska områden, såsom radiell area (RadAr), ulnar area (UlnAr) och ultradistal area (udAr). BMD uttrycks som gram/cm2; BMC uttrycks i gram och area som cm2. In vivo-precisionen för BMD- och BMC-mätningarna i vårt laboratorium var 1-5%.

Statistisk analys

Beskrivande statistik fastställdes för alla variabler. Alla variabler är tillräckligt representerade med hjälp av medelvärde (medelvärde) och standardavvikelse (SD).

Univariat analys utfördes med hjälp av studenttestet med två prov eller Welch-testet (i fall av ojämlika SD) och modellen för envägsvariansanalys utan upprepade mätningar (parvisa flera jämförelser analyserades med Tukey-testet). Analys av kovarians (ANCOVA) använde benvärdena (BMC, BMD, Area) som beroende variabler, VDR- och CTR-polymorfismerna som faktorer och ålder, vikt och längd som kovariater. Dessutom användes multipel stegvis regressionsanalys för att bestämma signifikanta prediktorer för BMD. Alla tester är tvåsidiga; P<0,05 definierades som signifikant. All dataanalys utfördes med hjälp av programvaran Statistical Package for Social Sciences (version 10.0) (SPSS Inc., Chicago, IL).