I determinanti genetici e dello stile di vita della massa ossea dei giovani maschi greci

Materiale e metodi

Soggetti

In questo studio trasversale, 301 giovani greci sani, di età compresa tra 16 e 35 anni, sono stati selezionati durante gli esami di laurea per le forze armate greche. Sono stati esclusi dallo studio gli uomini trattati con corticosteroidi, anticonvulsivanti o anticoagulanti o che soffrivano di ipogonadismo, malattie renali, epatiche, tiroidee e gastrointestinali o diabete mellito.

Sono stati ottenuti l'approvazione del comitato etico dell'ospedale e il consenso informato. L'altezza e il peso corporeo sono stati misurati con i soggetti in abbigliamento sportivo, in piedi a piedi nudi su uno stadiometro fisso e su una bilancia clinica standard. L'altezza è stata registrata in centimetri e il peso in chilogrammi. Lo stadiometro e la scala sono stati regolarmente monitorati per accuratezza e precisione. L'indice di massa corporea (BMI) è stato calcolato come peso/altezza 2 .

Valutazione dietetica

Gli attuali fattori dietetici (calcio, proteine, alcol, assunzione di caffè e tè) sono stati valutati utilizzando un questionario sulla frequenza alimentare convalidato nello studio MEDOS e completato con un'intervista. L'assunzione di calcio è stata stimata considerando il consumo di latte, yogurt e formaggio. L'assunzione di proteine ​​è stata stimata tenendo conto del consumo settimanale di carne e pesce. È stato preso in considerazione anche il consumo di tè e caffè.

I fattori non a dieta sono stati studiati utilizzando un questionario

Il fisico è stato quantificato come ore di attività sportiva a settimana (definite come partecipazione a sport organizzato per almeno 12 mesi). Il comportamento al fumo è stato codificato come "sì" (fumo quotidiano) o "no" e l'esposizione alla luce solare quando c'era esposizione in luoghi all'estero durante i 3 mesi precedenti. Anche la durata delle immobilizzazioni è stata codificata come "minore" o "superiore a 1 mese" (nella maggior parte, a causa di fratture causate da traumi ad alta energia).

Analisi genetiche

Il DNA genomico è stato estratto dai leucociti del sangue periferico con un kit di estrazione del DNA (kit di isolamento del DNA Puregene, Gentra Systems Inc., Monaco, Germania). I polimorfismi nei geni CTR e VDR sono stati determinati mediante reazione a catena della polimerasi (PCR) come precedentemente descritto utilizzando Taq DNA polimerasi (Takara, Tokyo, Giappone) e termociclatore (PCR Primus 96 plus-MWG AG BIOTECH). 4μl di prodotto CTR-PCR sono stati digeriti con AluI (New England Biolabs, UK) e 2 μl di prodotto VDR-PCR sono stati digeriti con BsmI (New England Biolabs, UK) secondo le istruzioni del produttore. Il digest di restrizione AluI ha prodotto frammenti di DNA di 120/108-bp (TT), 228/120/108-bp (TC) e 228-bp (CC) e il digest di restrizione BsmI ha prodotto frammenti di DNA di 1200/650-bp (bb), 1850/1200/650-bp (Bb) e 1850-bp (BB), che sono stati visualizzati utilizzando un gel di agarosio al 3% e all'1%, rispettivamente colorato con bromuro di etidio.

Misurazioni della densità minerale ossea

BMC distale (dBMC), BMD distale (dBMD) e BMD ultradistale (udBMD) al radio sono stati misurati mediante assorbimetria a raggi X singoli (Osteometer DTX-100, Danimarca). Inoltre, sono state valutate le aree geometriche corrispondenti, come l'area radiale (RadAr), l'area ulnare (UlnAr) e l'area ultradistale (udAr). La BMD è espressa in grammi/cm2; La BMC è espressa in grammi e l'Area in cm2 La precisione in vivo per le misurazioni di BMD e BMC nel nostro laboratorio è stata dell'1-5%.

Analisi statistica

Le statistiche descrittive sono state determinate per tutte le variabili. Tutte le variabili sono sufficientemente rappresentate utilizzando il valore medio (media) e la deviazione standard (SD).

L'analisi univariata è stata eseguita utilizzando il test di Student a due campioni o il test di Welch (in caso di SD disuguali) e il modello di analisi della varianza unidirezionale senza misurazioni ripetute (confronti multipli a coppie sono stati analizzati utilizzando il test di Tukey). L'analisi della covarianza (ANCOVA) ha utilizzato i valori ossei (BMC, BMD, Area) come variabili dipendenti, i polimorfismi VDR e CTR come fattori e l'età, il peso e l'altezza come covariate. Inoltre, è stata utilizzata l'analisi di regressione graduale multipla per determinare predittori significativi di BMD. Tutti i test sono bilaterali; P<0, 05 è stato definito significativo. Tutta l'analisi dei dati è stata eseguita utilizzando il software Statistical Package for Social Sciences (versione 10.0) (SPSS Inc., Chicago, IL).