Peru-15 疫苗与麻疹疫苗一起用于印度和孟加拉国健康婴儿的安全性和免疫原性

霍乱是世界范围内一个重要的公共卫生问题，在大多数发展中国家仍然流行，同时在卫生设施存在问题的地区引发疫情。 2005 年，向世界卫生组织（WHO）报告了 131 943 例霍乱病例和 2272 例死亡，更多国家报告了霍乱疫情。 总体而言，与 2004 年相比，报告的病例数增加了 30%。 当年霍乱病死率为1.72%；然而，最近在西非爆发的疾病导致病死率高达 12% [1, 2]。 人们认为这些数字被低估了，据估计每年有多达 120 000 人死于霍乱 [3]。 除了这种高死亡率外，霍乱爆发还会造成经济和社会混乱。

印度西孟加拉邦和邻国孟加拉国被许多人视为“霍乱之乡”。 在印度，向 WHO [1] 报告了 4695 例霍乱病例，西孟加拉邦、马哈拉施特拉邦、安德拉邦、泰米尔纳德邦、卡纳塔克邦和德里等邦长期以来一直报告疫情 [4]。 尽管没有来自孟加拉国的全国性数据，但在孟加拉国 4 个不同地理区域进行的 4 年监测表明，即使在 10 年未报告暴发的地区，霍乱也广泛分布 [5]。 这两个国家的霍乱影响所有年龄组，最年轻的年龄组受影响最大。 在加尔各答，与年龄较大的人相比，<5 岁的儿童患霍乱的风险高 30% [6]，而在孟加拉国，在为期 4 年的监测中，5670 名霍乱感染患者中有 53% 是 5 岁以下的儿童[5]. 对加尔各答 3 年霍乱前瞻性监测的进一步分析表明，2 岁以下婴儿的霍乱发病率为每 1000 人年 4.20 人，而研究人群的总体发病率为每 1000 人年 1.41 人（档案数据）。

提供安全的水和食物、建立适当的卫生设施以及实施个人和社区卫生构成了应对霍乱的主要公共卫生干预措施。 这些措施近期内无法在大多数霍乱流行地区全面实施。 一种安全、有效且负担得起的疫苗将成为预防和控制霍乱的有用工具。

在过去十年中，新一代口服霍乱疫苗的开发取得了相当大的进展。 这些已经在一些国家获得许可，现在正在考虑用于更广泛的公共卫生应用。 世界卫生组织最近建议在某些流行和流行情况下考虑使用新一代霍乱疫苗，但表示需要示范项目来提供有关使用这些疫苗的成本、可行性和影响的更多信息 [7]。

口服霍乱灭活疫苗 (Dukoral™) 早已在国际上上市，但其 2 剂接种计划、缓冲剂的使用以及疫苗的成本阻碍了其在公共卫生环境中的使用。 一种活的口服疫苗 CVD-103 HgR (Orochol™)，虽然获得了国际许可，但目前在市场上还没有。 该疫苗仅适用于 6 岁以上的儿童和成人。 尽管在北美志愿者的挑战研究中具有免疫原性和功效 [8]，但在印度尼西亚流行区对该疫苗的现场试验中，在观察期间未检测到保护功效 [9]。

需要一种改进的霍乱疫苗，它更耐热，可用于流行国家的年轻人群。 这种新一代口服霍乱疫苗必须以单剂量方案给药，具有热稳定性，提供高等级的长期保护，并且可以通过大规模免疫运动或通过扩大免疫计划（EPI）给予 2 岁以下儿童). 在 IVI 的最贫困疾病计划 (DOMI) 中，Peru-15 被确定为所有候选疫苗中最有希望的。 它是一种活的口服霍乱减毒疫苗，源自霍乱弧菌 O1 El Tor Inaba 菌株，该菌株于 1991 年首次在秘鲁分离出来 [10]。 这具有以单次剂量给药并具有与当前大流行毒株相同的生物型（生物型 El tor）的优势，这与作为经典生物型的 CVD-103 HgR 不同。 Peru-15 已通过多种基因修饰和缺失减弱。 通过删除 ctx A 和 rtxA 基因，它已无法编码霍乱毒素亚基 A 和 RTX 毒素，使其不产毒，通过将霍乱毒素 B 基因插入 recA 基因，它使菌株成为可能产生霍乱毒素 B。这种插入使 recA 基因失活，这与 attRS1 序列的删除一起，降低了菌株整合外源 DNA 的能力，使其成为非重组菌株。 最后，由于没有潜在的炎症鞭毛，它已经变得不能运动 [10, 11]。 此外，还在北美志愿者中进行了 I 期和 II 期研究，发现它是安全且具有免疫原性的 [11-12]。 此外，从志愿者的粪便中分离出的疫苗株保留了其非运动特性。 在一项针对北美志愿者的挑战研究中，Peru-15 对中度和重度腹泻提供 100% 的保护，对任何腹泻提供 93% 的保护 [13]。

该疫苗在孟加拉国达卡的霍乱流行区进行了 I 期和 II 期研究，分为三个年龄组：18 至 45 岁的成年人、2 至 5 岁的儿童和 9 至 23 个月的婴儿 [14、15]。 在这些研究中，2 x108 CFU 剂量的疫苗被证明是安全的，并且能够在所有年龄组中引发杀弧菌反应。 75% 的成年人、84% 的 2-5 岁儿童和 70% 的 9-23 个月婴儿的杀弧菌滴度比基线增加了 4 倍。 接种疫苗的 20 名成人中只有 1 名，接种疫苗的 140 名儿童中只有 8 名在接种后长达 4 天时排出了疫苗毒株。 对分离出的菌株的分析表明，这些菌株在粪便中传代后的表型和基因型特性保持不变。

迄今为止，该疫苗已在 400 多名志愿者身上进行了测试。 对 23 名志愿者进行测试的新鲜收获的产品和对 381 名志愿者进行测试的冷冻冻干制剂均显示在所有年龄组中都是安全和免疫原性的。 最常报告的不良事件是胃肠道症状（腹泻、恶心、腹部绞痛、胀气、食欲下降）和头痛，在对照研究中，接受 Peru-15 和安慰剂的受试者报告的不良事件发生频率相似。 健康成年旅行者的最佳剂量是单次口服剂量 1 x 108 CFU。 孟加拉国的研究进一步证实，108 剂量对霍乱流行区居民中的所有年龄组（包括婴儿）都是安全和具有免疫原性的。

Peru-15 的制造商 Avant Immunotherapeutics Inc. 正在重新配制具有海藻糖长期稳定能力的疫苗，以使 Peru-15 在高温（即 2-8ºC）下更耐热。 如果这种重新配制被证明与以前的版本一样安全并且至少具有免疫原性，那么这将使疫苗储存更容易，并且更容易在非洲、难民环境和南亚流行国家的现场条件下部署。

国际疫苗研究所 (IVI) 通过霍乱疫苗倡议 (CHOVI) 与秘鲁 15 疫苗制造商 Avant Immunotherapeutics Inc. 谈判达成一项协议，允许在 2 个霍乱流行的霍乱地区对这种重新配制的疫苗进行临床试验国家 - 印度和孟加拉国。 通过获得 WHO 的全球使用建议，这最终将获得许可并促进该疫苗的国际使用。 这种单剂量疫苗可以很容易地在流行国家使用，并在可能爆发的时候部署。 此外，这种疫苗可能会用于霍乱风险最高的婴儿和幼儿，可能被纳入流行地区的扩大免疫规划。

在霍乱流行地区，先前的疫苗配方已被证明对包括婴儿在内的所有年龄组都是安全的和具有免疫原性的 [12-15]，并且可有效预防健康成年志愿者的霍乱腹泻 [13]。 鉴于此，目前剂量高达 109 的当前制剂将直接在婴儿中进行测试。需要确认有关海藻糖重新配制的 Peru-15 疫苗在婴儿中的安全性和免疫原性的数据，以便铺平道路可能在婴儿和儿童风险最大的霍乱流行地区使用这种疫苗。 此外，如果这种疫苗将在 EPI 的背景下与麻疹疫苗一起使用，那么确定这两种减毒活疫苗之间是否存在免疫干扰将很重要。