病态肥胖的个性化医疗

主题和样本

肥胖患者 (n=2000) 在帝国理工学院医疗保健 NHS 信托的肥胖、内分泌和医疗诊所就诊时，将在初次就诊时被招募。 纳入本研究的患者是 BMI >28 kg/m2 且年龄在 18-65 岁之间的患者。

受试者将接受血液、唾液、尿液和粪便取样。 还将要求患者同意手术时收集的肌肉、肝脏、皮下和内脏脂肪组织。 如果任何患者必须进行再次手术，则需要再次采集血液样本、肌肉、肝脏、皮下和内脏脂肪组织。

来自其他中心（例如哥德堡）的样本集合可以与此处指定的样本一起以类似的方式进行分析。

方法

研究人员将使用代表分析时最先进的方法。 目前的计划概述如下：

目前的标准方法将用于从唾液或血液中提取 DNA，所有患者都将接受单基因肥胖和糖尿病筛查。

将从血液和组织中提取 RNA 以进行全基因组表达分析。

DNA 将用于执行全基因组靶向 SNP 基因分型，以鉴定 eQTL 和影响减肥手术结果的遗传变异。

将使用标准方法从血液和组织中提取 DNA 以进行表观遗传分析。

患者将被要求携带清晨尿液样本和粪便样本，用于以后的代谢组学/宏基因组学分析。

血液样本也将用于测量 C 肽、空腹血糖和胰岛素以及其他可用的生物标志物。 每次随访时都会测量受试者的体重。 还将分析受试者的一系列与肥胖及其合并症有关的表型以及心理和相关结果。

协议

第一联系人（在小组信息会议上）：

1. 口头介绍学习
2. 参与者信息表（附录 2）
3. 盛尿液和粪便样本的容器将交给患者
4. 1 周的后续电话联系以同意继续进行第一次研究访问

第 1 次访视：筛查访视（术前评估（常规访视的一部分））：

1. 研究的进一步解释和理解的确认
2. 签署同意书（附录 3）
3. 家族史问卷
4. 测量身高、体重、头围、脚和手的尺寸（有照片文件支持）
5. 心理问卷（所有患者在初次转诊至肥胖服务机构进行审计之前，在第一次研究访问之前完成。 在第一次研究访问期间将征得同意使用这些）
6. 血液或唾液
7. 血常规检测 C 肽、空腹血糖和胰岛素
8. 清晨尿液和粪便样本

访问 2（在实际手术期间）：

1. 血液、肌肉、肝脏、皮下和内脏脂肪组织

访问 3（手术后 2 天）：

1. 血
2. 重量

访问 4（术后 10 天）：

1. 血
2. 重量
3. 尿

第 5 次就诊（术后 6 个月）：

1. 血
2. 重量

3. 尿

   第 6 次就诊（术后 12 个月 - 例行随访的一部分）：

1 血液 2 体重 3 心理问卷

访问 7​​（术后 18 个月）：

1. 清晨尿液和粪便样本
2. 重量

问卷调查

在第一次研究访问之前和手术后 12 个月，受试者将完成以下问卷以评估饮食行为和性格测量：

1. 饮食失调检查问卷 (EDEQ) - 确定每 28 天的暴饮暴食次数（Fairburn CG，Beglin S Int Jour。 Eat Dis 16:363370, 1994)（附录 4）。
2. 荷兰饮食行为问卷 (DEBQ) 用于测量克制、情绪和外部对饮食行为的影响（Wardle J Psychosom Res 31:1619, 1987）（附录 5）。

4. 三因素饮食问卷 (TFEQ) - 衡量克制、去抑制和饥饿 (Stunkard & Messick。 J Psychosom Res 29:7183, 1985)（附录 6）。

8. Barratt 冲动量表，用于测量与暴饮暴食有关的冲动（Patton JM 等人，J Clin Psych 51：76874，1995；Yeomans MR 等人。 食欲。 50:46976, 2008)（附录 7）。

9. PANAS——测量积极和消极影响的问卷（Watson、Clark & Tellegen。 J Pers Soc Psych 54(6): 10631070, 1988)（附录 8）。

10. Fagerstrom 尼古丁依赖测试 - 评估当前吸烟行为的问卷（Heatherton 等人。 英国成瘾杂志 86: 1119-1127, 1991)（附录 9）。

11. 体重对生活质量的影响问卷（IWQOLLite）——测量减肥手术后主观生活质量变化的问卷（Kolotkin 等人。 肥胖研究 9：102111，2001)（附录 10）。

12. SF-36 - 评估个体患者的健康状况、评估治疗的成本效益以及监测和比较疾病负担（McHorney 和 Ware，1995 年）（附录 11）。

13. 医院焦虑和抑郁量表——用于识别精神障碍或抑郁症（Spinhoven 等人，1997 年）（附录 12）。

14. AUDIT 药物和酒精调查问卷（用于发现危险和有害饮酒的早期迹象并确定轻度依赖（Saunders 等人，1993 年）（附录 13）。

唾液取样

将使用 Oragene DNA 小瓶收集唾液样本。 唾液样本的采集是根据制造商的说明进行的。 在提供唾液样本之前，患者 30 分钟内不得进食、饮水、吸烟或嚼口香糖。 患者必须向容器中吐口水，直到液体唾液（不是气泡）的量至少达到制造商说明中所示的水平。 工作人员将容器放在平坦的表面上，将盖子拧到容器上，并需要确保盖子盖紧。 容器必须轻轻混合至少 10 秒钟，并保持在室温下。

采血

在研究访视 1-7 时，将采集静脉血样。 在整个研究过程中，每位参与者的血液将不超过 100 毫升（每次访问不超过 15 毫升）。 将使用标准方法从血液中获取 DNA、RNA 和血清。 将通过免疫测定法测量葡萄糖、胰岛素和C-肽的血浆水平。

尿液和粪便取样

患者将收集尿液和粪便在 10 毫升和 20 毫升 Sterilin 容器中进行代谢组学分析。 粪便样本将收集在装有 10 mL 磷酸盐缓冲盐水 (PBS)（每升含有 8 g NaCl、0.2 g KCl、1.44 g Na2HPO4 和 0.24 g KH2PO4 [pH 7.2]）的无菌容器中，以及储存在家庭冰箱中，直到被带到实验室，样品在 -80°C 下储存，直到进一步处理。

手术期间的组织取样

所有活组织检查都将用剪刀和/或 Harmonic 手术刀（用于解剖的超声仪器）进行。 肌肉组织将从腹壁的套管针部位取出。 肝组织将通过穿刺活检从左肝叶边缘取出。 皮下脂肪组织可取自套管针切口（约2g），内脏脂肪组织可取自胃大弯处的大网膜。 这将在手术时进行，并在任何需要再次手术的患者中再次进行。 为了我们的研究目的，将使用标准方法来储存组织并从组织中稳定和纯化 DNA 和 RNA。