Gepersonaliseerde geneeskunde voor morbide obesitas

ONDERWERPEN en MONSTERS

Zwaarlijvige patiënten (n=2000) die zich presenteren aan zwaarlijvigheid, endocriene en medische klinieken van Imperial College Healthcare NHS Trust zullen worden aangeworven bij de eerste presentatie aan de dienst. De patiënten die voor deze studie zullen worden geïncludeerd, zijn patiënten met een BMI >28 kg/m2 en tussen de 18 en 65 jaar oud.

Proefpersonen zullen bloed-, speeksel-, urine- en ontlastingsmonsters ondergaan. Patiënten zullen ook worden gevraagd om toestemming te geven voor spier-, lever-, onderhuids en visceraal vetweefsel dat tijdens de operatie is verzameld. Als een van de patiënten een heroperatie moet ondergaan, moeten opnieuw bloedmonsters, spier-, lever-, onderhuid- en visceraal vetweefsel worden afgenomen.

Verzamelingen van monsters uit andere centra (bijv. Göteborg) kunnen op een vergelijkbare manier worden geanalyseerd naast de hier vermelde monsters.

METHODEN

De onderzoekers zullen methoden gebruiken die de stand van de techniek vertegenwoordigen op het moment van de analyse. De huidige plannen worden hieronder beschreven:

De huidige standaardmethoden zullen worden gebruikt om DNA uit speeksel of bloed te halen en alle patiënten zullen worden gescreend op monogene obesitas en diabetes.

RNA zal worden geëxtraheerd uit bloed en weefsels om genoombrede expressieanalyse uit te voeren.

DNA zal worden gebruikt voor het uitvoeren van genoombrede gerichte SNP-genotypering voor de identificatie van eQTL's en van genetische variaties die de uitkomsten van bariatrische chirurgie beïnvloeden.

DNA zal worden geëxtraheerd uit bloed en weefsels met behulp van standaardmethoden om epigenetische analyses uit te voeren.

Patiënten zullen worden gevraagd om een ​​ochtendurinemonster en een fecesmonster mee te nemen voor latere metabonomische/metagenomische analyses.

Bloedmonsters zullen ook worden gebruikt voor het meten van C-peptide, nuchtere glucose en insuline en andere biomarkers zodra deze beschikbaar komen. Het gewicht van de proefpersoon zal bij elk van de vervolgbezoeken worden gemeten. Onderwerpen zullen ook worden geanalyseerd op een reeks fenotypes die te maken hebben met obesitas en de comorbiditeit ervan, evenals op psychologische en gerelateerde uitkomsten.

PROTOCOL

Eerste aanspreekpunt (bij infosessie groep):

1. Mondelinge kennismaking met studeren
2. Informatieblad deelnemers (bijlage 2)
3. Containers voor urine- en ontlastingsmonsters worden aan patiënten verstrekt
4. 1 week telefonisch vervolgcontact voor toestemming om door te gaan naar het eerste studiebezoek

Bezoek 1: Screeningsbezoek (bij pre-operatieve beoordeling (onderdeel van routinebezoek)):

1. Nadere uitleg studie en bevestiging van begrip
2. Ondertekend toestemmingsformulier (bijlage 3)
3. Vragenlijsten over familiegeschiedenis
4. Meting van lengte, gewicht, hoofdomtrek, voet- en handomvang (ondersteund met fotografische documentatie)
5. Psychologische vragenlijsten (deze worden ingevuld door alle patiënten voorafgaand aan het eerste studiebezoek bij de eerste verwijzing naar de obesitasdienst voor auditdoeleinden. Er zal toestemming worden gevraagd om deze te gebruiken tijdens het eerste studiebezoek)
6. Bloed of speeksel
7. Routinematige bloedtest om C-peptide, nuchtere glucose en insuline te meten
8. Urine- en ontlastingsmonster in de vroege ochtend

Bezoek 2 (tijdens daadwerkelijke operatie):

1. Bloed, spier-, lever-, onderhuid- en visceraal vetweefsel

Bezoek 3 (2 dagen na de operatie):

1. Bloed
2. Gewicht

Bezoek 4 (10 dagen na de operatie):

1. Bloed
2. Gewicht
3. Urine

Bezoek 5 (6 maanden na de operatie):

1. Bloed
2. Gewicht

3. Urine

   Bezoek 6 (12 maanden na de operatie - onderdeel van routinematig vervolgbezoek):

1 Bloed 2 Gewicht 3 Psychologische vragenlijsten

Bezoek 7 (18 maanden na operatie):

1. Urine- en ontlastingsmonster in de vroege ochtend
2. Gewicht

VRAGENLIJSTEN

Vóór het eerste studiebezoek en 12 maanden na de operatie zullen proefpersonen de volgende vragenlijsten invullen om eetgedrag en persoonlijkheidsmetingen te beoordelen:

1. Eetstoornis Onderzoeksvragenlijst (EDEQ) - om het aantal eetbuien per 28 dagen te identificeren (Fairburn CG, Beglin S Int Jour. Eat Dis 16:363370, 1994) (Bijlage 4).
2. Nederlandse vragenlijst over eetgedrag (DEBQ) om terughoudendheid, emotionele en externe invloeden op eetgedrag te meten (Wardle J Psychosom Res 31:1619, 1987) (bijlage 5).

4. Three Factor Eating Questionnaire (TFEQ) - om terughoudendheid, ontremming en honger te meten (Stunkard & Messick. J Psychosom Res 29:7183, 1985) (Bijlage 6).

8. Barratt Impulsiveness Scale om impulsiviteit te meten die in verband is gebracht met overeten (Patton JM et al J Clin Psych 51: 76874, 1995; Yeomans MR et al. Trek. 50:46976, 2008) (Bijlage 7).

9. PANAS - vragenlijst die positief en negatief affect meet (Watson, Clark & ​​Tellegen. J Pers Soc Psych 54(6): 10631070, 1988) (Bijlage 8).

10. Fagerstrom-test voor nicotineafhankelijkheid - een vragenlijst die het huidige rookgedrag beoordeelt (Heatherton et al. British Journal of Addiction 86: 1119-1127, 1991) (Bijlage 9).

11. Impact van gewicht op kwaliteit van leven vragenlijst (IWQOLLite) - een vragenlijst die de verandering in subjectieve kwaliteit van leven meet na bariatrische chirurgie (Kolotkin et al. Obesity Research 9: 102111, 2001) (Bijlage 10).

12. SF-36 - om de gezondheid van individuele patiënten te beoordelen, om de kosteneffectiviteit van een behandeling te evalueren en om de ziektelast te monitoren en te vergelijken (McHorney en Ware, 1995) (bijlage 11).

13. Ziekenhuisangst- en depressieschaal - om psychiatrische stoornis of depressie te identificeren (Spinhoven et al., 1997) (bijlage 12).

14. AUDIT-vragenlijst over drugs en alcohol (om de eerste tekenen van gevaarlijk en schadelijk alcoholgebruik op te sporen en milde afhankelijkheid te identificeren (Saunders et al., 1993) (bijlage 13).

SPEELBEMONSTERING

Speekselmonsters worden verzameld met behulp van Oragene DNA-flesjes. De afname van het speekselmonster gebeurt volgens de instructies van de fabrikant. De patiënt mag gedurende 30 minuten niet eten, drinken, roken of kauwgom kauwen voordat het speekselmonster wordt toegediend. De patiënt moet in de container spugen totdat de hoeveelheid vloeibaar speeksel (geen bellen) ten minste het niveau bereikt dat wordt weergegeven in de instructies van de fabrikant. De medewerker zet de container op een vlakke ondergrond, schroeft de dop op de container en zorgt ervoor dat de dop goed gesloten is. De container moet minimaal 10 seconden voorzichtig worden gemengd en op kamertemperatuur worden gehouden.

BLOEDAFNAME

Bij studiebezoek 1-7 wordt veneus bloed afgenomen. Tijdens het hele onderzoek wordt bij elke deelnemer niet meer dan 100 ml bloed afgenomen (niet meer dan 15 ml per bezoek). Er zullen standaardmethoden worden gebruikt om DNA, RNA en serum uit bloed te verkrijgen. Plasmaspiegels van glucose, insuline en C-peptide zullen worden gemeten door middel van een immunoassay.

BEMONSTERING VAN URINE EN FAECES

Urine en feces worden door patiënten verzameld voor metabolomische analyse in 10 ml en 20 ml Sterilin-containers. fecesmonsters worden verzameld in steriele containers met 10 ml fosfaatgebufferde zoutoplossing (PBS) (met per liter 8 g NaCl, 0,2 g KCl, 1,44 g Na2HPO4 en 0,24 g KH2PO4 [pH 7,2]) en bewaard in thuisvriezers totdat ze naar het laboratorium werden gebracht waar monsters werden bewaard bij -80°C tot verdere verwerking.

WEEFSELBEMONSTERING TIJDENS CHIRURGIE

Alle biopsieën worden genomen met een schaar en/of Harmonisch scalpel (echografie-instrument voor dissectie). Spierweefsel zal uit de buikwand worden gehaald op een troacharplaats. Leverweefsel wordt via naaldbiopsie uit de rand van de linker leverkwab genomen. Onderhuids vetweefsel kan worden weggenomen uit een incisie voor een troachar (ongeveer 2 g) en visceraal vetweefsel kan worden weggenomen uit het omentum major ter hoogte van de grotere kromming van de maag. Dit wordt gedaan op het moment van de operatie en opnieuw bij patiënten die opnieuw geopereerd moeten worden. Standaardmethoden zullen worden gebruikt om de weefsels op te slaan en om DNA en RNA uit de weefsels te stabiliseren en te zuiveren voor ons onderzoek.