Henkilökohtainen lääke sairaalloiseen liikalihavuuteen

AIHEET ja NÄYTTEET

Liikalihavia potilaita (n = 2000), jotka esittelevät Imperial College Healthcare NHS Trustin lihavuus-, endokriiniset ja lääketieteelliset klinikat, rekrytoidaan palvelulle ensimmäisessä esittelyssä. Tähän tutkimukseen osallistuvat potilaat, joiden BMI on >28 kg/m2 ja iältään 18–65.

Koehenkilöiltä otetaan veri-, sylki-, virtsa- ja ulostenäytteet. Potilailta pyydetään myös suostumus leikkauksen aikana kerättyyn lihas-, maksa-, ihonalaisen ja viskeraalisen rasvakudoksen käsittelyyn. Jos jollekin potilaista on tehtävä uusi leikkaus, verinäyte, lihas-, maksa-, ihonalainen ja viskeraalinen rasvakudos on otettava uudelleen.

Näytekokoelmia muista keskuksista (esim. Göteborgista) voidaan analysoida samalla tavalla tässä määriteltyjen näytteiden rinnalla.

MENETELMÄT

Tutkijat käyttävät menetelmiä, jotka edustavat analyysin ajantasaista tekniikkaa. Nykyiset suunnitelmat on kuvattu alla:

Nykyisin standardimenetelmin käytetään DNA:n erottamista syljestä tai verestä ja kaikki potilaat seulotaan monogeenisen liikalihavuuden ja diabeteksen varalta.

RNA uutetaan verestä ja kudoksista genominlaajuisen ekspressioanalyysin suorittamiseksi.

DNA:ta käytetään genomin laajuiseen kohdennettuun SNP-genotyypitykseen eQTL-solujen ja bariatrisen leikkauksen tuloksiin vaikuttavien geneettisten muunnelmien tunnistamiseksi.

DNA uutetaan verestä ja kudoksista käyttämällä standardimenetelmiä epigeneettisten analyysien suorittamiseksi.

Potilaita pyydetään tuomaan varhain aamulla virtsanäyte sekä ulostenäyte myöhempää metabonomista/metagenomista analyysiä varten.

Verinäytteitä käytetään myös C-peptidin, paastoglukoosin ja insuliinin sekä muiden biomarkkerien mittaamiseen, kun niitä tulee saataville. Koehenkilön paino mitataan jokaisella seurantakäynnillä. Koehenkilöistä analysoidaan myös erilaisia ​​liikalihavuuteen ja sen rinnakkaissairauksiin liittyviä fenotyyppejä sekä psykologisia ja siihen liittyviä tuloksia.

PROTOKOLLA

Ensimmäinen yhteyshenkilö (ryhmätiedotustilaisuudessa):

1. Sanallinen johdatus opiskeluun
2. Osallistujatietolomake (Liite 2)
3. Potilaille luovutetaan säiliöt virtsa- ja ulostenäytteitä varten
4. 1 viikon seurantapuhelinyhteys suostumuksen saamiseksi ensimmäiselle opintovierailulle

Käynti 1: Seulontakäynti (leikkausta edeltävässä arvioinnissa (osa rutiinikäyntiä)):

1. Lisäselitys tutkimuksesta ja ymmärtämisen vahvistus
2. Allekirjoitettu suostumuslomake (Liite 3)
3. Sukuhistoriakyselyt
4. Pituuden, painon, pään ympärysmitan, jalan ja käden koon mittaus (tuettu valokuvadokumentaatiolla)
5. Psykologiset kyselylomakkeet (kaikki potilaat täyttävät nämä ennen ensimmäistä tutkimuskäyntiä lähetteen jälkeen lihavuuspalveluun tarkastusta varten. Näiden käyttöön pyydetään lupa ensimmäisen opintokäynnin aikana)
6. Veri tai sylki
7. Rutiiniverikoe C-peptidin, paastoglukoosin ja insuliinin mittaamiseksi
8. Varhain aamulla virtsa- ja ulostenäyte

Käynti 2 (varsinaisen leikkauksen aikana):

1. Veri-, lihas-, maksa-, ihonalainen ja viskeraalinen rasvakudos

Vierailu 3 (2 päivää leikkauksen jälkeen):

1. Veri
2. Paino

Vierailu 4 (10 päivää leikkauksen jälkeen):

1. Veri
2. Paino
3. Virtsa

Vierailu 5 (6 kuukautta leikkauksen jälkeen):

1. Veri
2. Paino

3. Virtsa

   Vierailu 6 (12 kuukautta leikkauksen jälkeen - osa rutiininomaista seurantakäyntiä):

1 Veri 2 Paino 3 Psykologiset kyselyt

Vierailu 7 (18 kuukautta leikkauksen jälkeen):

1. Varhain aamulla virtsa- ja ulostenäyte
2. Paino

KYSELYLOMAKEJA

Ennen ensimmäistä opintokäyntiä ja 12 kuukautta leikkauksen jälkeen koehenkilöt täyttävät seuraavat kyselyt arvioidakseen syömiskäyttäytymistä ja persoonallisuusmittauksia:

1. Eating Disorder Examination Questionnaire (EDEQ) - tunnistaa humalahakujen lukumäärän 28 päivän aikana (Fairburn CG, Beglin S Int Jour. Eat Dis 16:363370, 1994) (Liite 4).
2. Dutch Eating Behavior Questionnaire (DEBQ), jolla mitataan hillitystä, emotionaalisia ja ulkoisia vaikutuksia syömiskäyttäytymiseen (Wardle J Psychosom Res 31:1619, 1987) (Liite 5).

4. Three Factor Eating Questionnaire (TFEQ) - mittaamaan hillitystä, hillittömyyttä ja näläntunnetta (Stunkard & Messick. J Psychosom Res 29:7183, 1985) (Liite 6).

8. Barratt Impulsiivisuusasteikko impulsiivisuuden mittaamiseksi, joka on yhdistetty ylensyömiseen (Patton JM et ai. J Clin Psych 51: 76874, 1995; Yeomans MR et ai. Ruokahalu. 50:46976, 2008) (Liite 7).

9. PANAS - kyselylomake, joka mittaa positiivista ja negatiivista vaikutusta (Watson, Clark & ​​Tellegen. J Pers Soc Psych 54(6): 10631070, 1988) (Liite 8).

10. Fagerstrom Test for Nikotine Dependence - kyselylomake, joka arvioi tämänhetkistä tupakointikäyttäytymistä (Heatherton et al. British Journal of Addiction 86: 1119-1127, 1991) (Liite 9).

11. Painon vaikutus elämänlaatuun Questionnaire (IWQOLLite) - kyselylomake, joka mittaa subjektiivisen elämänlaadun muutosta bariatrisen leikkauksen jälkeen (Kolotkin et al. Obesity Research 9: 102111, 2001) (Liite 10).

12. SF-36 - arvioida yksittäisten potilaiden terveyttä, arvioida hoidon kustannustehokkuutta ja seurata ja vertailla sairaustaakkaa (McHorney ja Ware, 1995) (Liite 11).

13. Sairaalan ahdistuneisuus- ja masennusasteikko - psykiatrisen häiriön tai masennuksen tunnistamiseen (Spinhoven et al., 1997) (Liite 12).

14. AUDIT huume- ja alkoholikysely (haitallisen ja haitallisen juomisen varhaisten merkkien havaitsemiseksi ja lievän riippuvuuden tunnistamiseksi (Saunders et al., 1993) (Liite 13).

SYLKENÄYTTEENOTTO

Sylkinäytteet kerätään Oragene DNA -pulloilla. Sylkinäytteen otto tapahtuu valmistajan ohjeiden mukaisesti. Potilas ei saa syödä, juoda, polttaa tai pureskella kumia 30 minuuttiin ennen sylkinäytteen antamista. Potilaan tulee sylkeä säiliöön, kunnes nestemäisen syljen (ei kuplien) määrä saavuttaa vähintään valmistajan ohjeiden mukaisen tason. Henkilökunnan jäsen asettaa säiliön tasaiselle pinnalle, ruuvaa korkin säiliön päälle ja hänen on varmistettava, että korkki on suljettu tiukasti. Säiliötä on sekoitettava varovasti vähintään 10 sekuntia ja säilytettävä huoneenlämmössä.

VERINÄYTTEENOTTO

Opintokäynnillä 1-7 otetaan laskimoverinäytteet. Jokaiselta osallistujalta otetaan enintään 100 ml verta koko tutkimuksen aikana (enintään 15 ml kullakin käynnillä). DNA:n, RNA:n ja seerumin saamiseksi verestä käytetään standardimenetelmiä. Plasman glukoosin, insuliinin ja C-peptidin tasot mitataan immunomäärityksellä.

VIRTSAN JA ULOSTEEN NÄYTTEENOTTO

Potilaat keräävät virtsaa ja ulosteita metabolomista analyysiä varten 10 ml:n ja 20 ml:n Sterilin-säiliöihin. ulostenäytteet kerätään steriileihin astioihin, jotka sisältävät 10 ml fosfaattipuskuroitua suolaliuosta (PBS) (sisältää litrassa 8 g NaCl:a, 0,2 g KCl:a, 1,44 g Na2HPO4:a ja 0,24 g KH2PO4:a [pH 7,2]) ja säilytetty kotipakastimissa, kunnes ne tuotiin laboratorioon, jossa näytteet säilytettiin -80°C:ssa jatkokäsittelyyn asti.

KUDOSNÄYTTEEN OTTO LEIKKAUKSEN AIKANA

Kaikki biopsiat otetaan saksilla ja/tai Harmonic-veitsellä (ultraäänilaite dissektioon). Lihaskudos otetaan vatsan seinämästä troachar-kohdasta. Maksakudos otetaan maksan vasemman lohkon reunasta neulabiopsian avulla. Ihonalainen rasvakudos voidaan ottaa troacharin viillosta (noin 2 g) ja viskeraalinen rasvakudos voidaan ottaa suuresta omentumista mahalaukun suuremman kaarevuuden kohdalta. Tämä tehdään leikkauksen yhteydessä ja uudelleen kaikille potilaille, jotka tarvitsevat uusintaleikkauksen. Kudosten varastoimiseen sekä DNA:n ja RNA:n stabilointiin ja puhdistamiseen kudoksista tutkimuksessamme käytetään standardimenetelmiä.