Medicina personalizada para obesidade mórbida

ASSUNTOS E AMOSTRAS

Pacientes obesos (n = 2.000) que se apresentam às clínicas de obesidade, endócrinas e médicas do Imperial College Healthcare NHS Trust serão recrutados na apresentação inicial ao serviço. Os pacientes que serão incluídos neste estudo são pacientes com IMC >28 kg/m2 e idade entre 18-65 anos.

Os indivíduos serão submetidos a coleta de sangue, saliva, urina e fezes. Os pacientes também serão solicitados a consentir com a coleta de tecido adiposo muscular, hepático, subcutâneo e visceral no momento da cirurgia. Se algum dos pacientes tiver que passar por uma reoperação, uma amostra de sangue, músculo, fígado, tecido adiposo subcutâneo e visceral precisarão ser coletados novamente.

Coleções de amostras de outros centros (por exemplo, Gotemburgo) podem ser analisadas de maneira semelhante às amostras especificadas aqui.

MÉTODOS

Os investigadores usarão métodos representativos do estado da arte no momento da análise. Os planos atuais são descritos abaixo:

Métodos atuais padrão serão usados ​​para extrair DNA da saliva ou sangue e todos os pacientes serão rastreados para obesidade monogênica e diabetes.

O RNA será extraído do sangue e tecidos para realizar a análise de expressão do genoma.

O DNA será usado para realizar a genotipagem de SNP direcionada em todo o genoma para a identificação de eQTLs e de variações genéticas que influenciam os resultados da cirurgia bariátrica.

O DNA será extraído de sangue e tecidos usando métodos padrão para realizar análises epigenéticas.

Os pacientes serão solicitados a trazer uma amostra de urina matinal, bem como uma amostra de fezes para análises metabonômicas/metagenômicas posteriores.

Amostras de sangue também serão usadas para medir o peptídeo C, glicose e insulina em jejum e outros biomarcadores assim que estiverem disponíveis. O peso do sujeito será medido em cada uma das visitas de acompanhamento. Os indivíduos também serão analisados ​​para uma variedade de fenótipos relacionados à obesidade e sua comorbidade, bem como para resultados psicológicos e relacionados.

PROTOCOLO

Primeiro ponto de contato (na sessão de informações do grupo):

1. Introdução verbal ao estudo
2. Folha de informações do participante (Apêndice 2)
3. Recipientes para amostras de urina e fezes serão entregues aos pacientes
4. 1 semana de contato telefônico de acompanhamento para consentimento para prosseguir para a primeira visita do estudo

Visita 1: Visita de triagem (na avaliação pré-cirúrgica (parte da visita de rotina)):

1. Mais explicações sobre o estudo e confirmação do entendimento
2. Formulário de consentimento assinado (Apêndice 3)
3. Questionários de história familiar
4. Medição de altura, peso, circunferência da cabeça, tamanho do pé e da mão (apoiado com documentação fotográfica)
5. Questionários psicológicos (estes são preenchidos por todos os pacientes antes da primeira visita do estudo após o encaminhamento inicial ao serviço de obesidade para fins de auditoria. O consentimento será solicitado para usá-los durante a primeira visita do estudo)
6. Sangue ou saliva
7. Exame de sangue de rotina para medir peptídeo C, glicose em jejum e insulina
8. Amostra de urina e fezes de manhã cedo

Visita 2 (durante a cirurgia real):

1. Tecido adiposo sanguíneo, muscular, hepático, subcutâneo e visceral

Visita 3 (2 dias após a cirurgia):

1. Sangue
2. Peso

Visita 4 (10 dias após a cirurgia):

1. Sangue
2. Peso
3. Urina

Visita 5 (6 meses após a cirurgia):

1. Sangue
2. Peso

3. Urina

   Consulta 6 (12 meses após a cirurgia - parte da consulta de acompanhamento de rotina):

1 Sangue 2 Peso 3 Questionários psicológicos

Visita 7 (18 meses após a cirurgia):

1. Amostra de urina e fezes de manhã cedo
2. Peso

QUESTIONÁRIOS

Antes da 1ª visita do estudo e 12 meses após a cirurgia, os participantes preencherão os seguintes questionários para avaliar o comportamento alimentar e as medidas de personalidade:

1. Questionário de Exame de Transtorno Alimentar (EDEQ) - para identificar o número de compulsões por 28 dias (Fairburn CG, Beglin S Int Jour. Eat Dis 16:363370, 1994) (Apêndice 4).
2. Questionário Holandês de Comportamento Alimentar (DEBQ) para medir contenção, influências emocionais e externas no comportamento alimentar (Wardle J Psychosom Res 31:1619, 1987) (Apêndice 5).

4. Questionário de três fatores de alimentação (TFEQ) - para medir contenção, desinibição e fome (Stunkard & Messick. J Psychosom Res 29:7183, 1985) (Apêndice 6).

8. Escala de Impulsividade de Barratt para medir a impulsividade que tem sido associada a comer demais (Patton JM et al J Clin Psych 51: 76874, 1995; Yeomans MR et al. Apetite. 50:46976, 2008) (Apêndice 7).

9. PANAS - questionário que mede o afeto positivo e negativo (Watson, Clark & ​​Tellegen. J Pers Soc Psych 54(6): 10631070, 1988) (Apêndice 8).

10. Teste de Fagerstrom para Dependência de Nicotina - um questionário que avalia o comportamento atual de fumar (Heatherton et al. British Journal of Addiction 86: 1119-1127, 1991) (Apêndice 9).

11. Questionário de impacto do peso na qualidade de vida (IWQOLLite) - um questionário que mede a mudança na qualidade de vida subjetiva após a cirurgia bariátrica (Kolotkin et al. Obesity Research 9: 102111, 2001) (Apêndice 10).

12. SF-36 - avaliar a saúde de pacientes individuais, avaliar o custo-efetividade de um tratamento e monitorar e comparar a carga de doenças (McHorney e Ware, 1995) (Apêndice 11).

13. Escala Hospitalar de Ansiedade e Depressão - para identificar transtorno psiquiátrico ou depressão (Spinhoven et al., 1997) (Anexo 12).

14. Questionário AUDIT sobre drogas e álcool (para detectar os primeiros sinais de consumo perigoso e prejudicial e identificar dependência leve (Saunders et al., 1993) (Apêndice 13).

AMOSTRA DE SALIVA

Amostras de saliva serão coletadas usando frascos de DNA Oragene. A aquisição da amostra de saliva é feita de acordo com as instruções do fabricante. O paciente não deve comer, beber, fumar ou mascar chiclete por 30 minutos antes de dar a amostra de saliva. O paciente deve cuspir no recipiente até que a quantidade de saliva líquida (não bolhas) atinja pelo menos o nível indicado nas instruções do fabricante. O funcionário coloca o recipiente em uma superfície plana, rosqueia a tampa no recipiente e precisa se certificar de que a tampa esteja bem fechada. O recipiente deve ser misturado suavemente durante pelo menos 10 segundos e mantido à temperatura ambiente.

AMOSTRA DE SANGUE

Na visita de estudo 1-7, serão coletadas amostras de sangue venoso. Não serão retirados mais de 100 ml de sangue de cada participante durante todo o estudo (não mais de 15 ml em cada visita). Métodos padrão serão usados ​​para obter DNA, RNA e soro do sangue. Os níveis plasmáticos de glicose, insulina e peptídeo C serão medidos por imunoensaio.

AMOSTRA DE URINA E FEZES

Urina e fezes serão coletadas para análise metabolômica em recipientes Sterilin de 10ml e 20ml pelos pacientes. amostras de fezes serão coletadas em recipientes estéreis contendo 10 mL de solução salina tamponada com fosfato (PBS) (contendo, por litro, 8 g de NaCl, 0,2 g de KCl, 1,44 g de Na2HPO4 e 0,24 g de KH2PO4 [pH 7,2]) e armazenados em freezers domésticos até serem levados ao laboratório, onde as amostras foram armazenadas a -80°C até processamento posterior.

AMOSTRA DE TECIDO DURANTE A CIRURGIA

Todas as biópsias serão feitas com tesoura e/ou bisturi Harmônico (instrumento de ultrassom para dissecção). O tecido muscular será retirado da parede abdominal em um local troachar. O tecido hepático será retirado da borda do lobo hepático esquerdo por meio de biópsia por agulha. O tecido adiposo subcutâneo pode ser retirado de uma incisão para um troachar (cerca de 2 g) e o tecido adiposo visceral pode ser retirado do omento maior na curvatura maior do estômago. Isso será feito no momento da cirurgia e novamente em qualquer paciente que necessite de reoperação. Métodos padrão serão usados ​​para armazenar os tecidos e para estabilizar e purificar DNA e RNA dos tecidos para o propósito de nosso estudo.