Personlig medicin för sjuklig fetma

ÄMNEN och PROV

Överviktiga patienter (n=2000) som presenterar sig för fetma, endokrina och medicinska kliniker vid Imperial College Healthcare NHS Trust kommer att rekryteras vid den första presentationen till tjänsten. Patienterna som kommer att inkluderas i denna studie är patienter med BMI >28 kg/m2 och i åldern 18-65.

Försökspersoner kommer att genomgå blod-, saliv-, urin- och avföringsprov. Patienterna kommer också att uppmanas att samtycka till muskel-, lever-, subkutan och visceral fettvävnad som samlas in vid operationstillfället. Om någon av patienterna måste genomgå en omoperation måste blodprov, muskel-, lever-, subkutan och visceral fettvävnad tas igen.

Provsamlingar från andra centra (t.ex. Göteborg) kan analyseras på liknande sätt vid sidan av de prover som anges här.

METODER

Utredarna kommer att använda metoder som representerar den senaste tekniken vid tidpunkten för analysen. Aktuella planer beskrivs nedan:

Nuvarande standardmetoder kommer att användas för att extrahera DNA från saliv eller blod och alla patienter kommer att screenas för monogen fetma och diabetes.

RNA kommer att extraheras från blod och vävnader för att utföra genomomfattande expressionsanalys.

DNA kommer att användas för att utföra genomomfattande målinriktad SNP-genotypning för identifiering av eQTLs och av genetiska variationer som påverkar resultaten av bariatrisk kirurgi.

DNA kommer att extraheras från blod och vävnader med standardmetoder för att utföra epigenetiska analyser.

Patienterna kommer att uppmanas att ta med ett urinprov tidigt på morgonen samt ett avföringsprov för senare metabonomiska/metagenomiska analyser.

Blodprover kommer också att användas för att mäta C-peptid, fasteglukos och insulin och andra biomarkörer när de blir tillgängliga. Försökspersonens vikt kommer att tas vid varje uppföljningsbesök. Ämnen kommer också att analyseras för en rad fenotyper som rör fetma och dess komorbiditet samt för psykologiska och relaterade resultat.

PROTOKOLL

Första kontaktpunkten (vid gruppinformationssession):

1. Verbal introduktion till studier
2. Deltagarinformationsblad (bilaga 2)
3. Behållare för urin- och avföringsprov kommer att lämnas till patienterna
4. 1 veckas uppföljande telefonkontakt för samtycke till att gå vidare till första studiebesöket

Besök 1: Screeningbesök (vid bedömning före operation (del av rutinbesök)):

1. Ytterligare förklaring av studier och bekräftelse av förståelse
2. Undertecknat samtyckesformulär (bilaga 3)
3. Släkthistoriska frågeformulär
4. Mätning av längd, vikt, huvudomkrets, fot- och handstorlek (stöds med fotografisk dokumentation)
5. Psykologiska frågeformulär (dessa fylls i av alla patienter före första studiebesöket vid första remiss till fetmatjänst för revisionsändamål. Samtycke kommer att begäras för att använda dessa under det första studiebesöket)
6. Blod eller saliv
7. Rutinmässigt blodprov för att mäta C-peptid, fasteglukos och insulin
8. Urin- och avföringsprov tidigt på morgonen

Besök 2 (under faktisk operation):

1. Blod-, muskel-, lever-, subkutan- och visceral fettvävnad

Besök 3 (2 dagar efter operationen):

1. Blod
2. Vikt

Besök 4 (10 dagar efter operationen):

1. Blod
2. Vikt
3. Urin

Besök 5 (6 månader efter operationen):

1. Blod
2. Vikt

3. Urin

   Besök 6 (12 månader efter operationen - en del av rutinmässigt uppföljningsbesök):

1 Blod 2 Vikt 3 Psykologiska frågeformulär

Besök 7 (18 månader efter operationen):

1. Urin- och avföringsprov tidigt på morgonen
2. Vikt

FRÅGOR

Före det första studiebesöket och 12 månader efter operationen kommer försökspersonerna att fylla i följande frågeformulär för att bedöma ätbeteende och personlighetsmått:

1. Eating Disorder Examination Questionnaire (EDEQ) - för att identifiera antalet hetsätningar per 28 dagar (Fairburn CG, Beglin S Int Jour. Eat Dis 16:363370, 1994) (bilaga 4).
2. Dutch Eating Behavior Questionnaire (DEBQ) för att mäta återhållsamhet, emotionell och yttre påverkan på ätbeteende (Wardle J Psychosom Res 31:1619, 1987) (Bilaga 5).

4. Three Factor Eating Questionnaire (TFEQ) - för att mäta återhållsamhet, disinhibition och hunger (Stunkard & Messick. J Psychosom Res 29:7183, 1985) (bilaga 6).

8. Barratt Impulsiveness Skala för att mäta impulsivitet som har kopplats till överätande (Patton JM et al J Clin Psych 51: 76874, 1995; Yeomans MR et al. Aptit. 50:46976, 2008) (bilaga 7).

9. PANAS - frågeformulär som mäter positiv och negativ påverkan (Watson, Clark & ​​Tellegen. J Pers Soc Psych 54(6): 10631070, 1988) (bilaga 8).

10. Fagerströms test för nikotinberoende - ett frågeformulär som bedömer nuvarande rökbeteende (Heatherton et al. British Journal of Addiction 86: 1119-1127, 1991) (bilaga 9).

11. Impact of Weight on Quality of Life Questionnaire (IWQOLLite) - ett frågeformulär som mäter förändringen i subjektiv livskvalitet efter bariatrisk kirurgi (Kolotkin et al. Obesity Research 9: 102111, 2001) (Bilaga 10).

12. SF-36 - för att bedöma enskilda patienters hälsa, för att utvärdera kostnadseffektiviteten av en behandling och för att övervaka och jämföra sjukdomsbördan (McHorney and Ware, 1995) (Bilaga 11).

13. Hospital Anxiety and Depression Scale - för att identifiera psykiatrisk störning eller depression (Spinhoven et al., 1997) (Bilaga 12).

14. REVISERA narkotika- och alkoholenkät (för att fånga upp de tidiga tecknen på farligt och skadligt drickande och identifiera milt beroende (Saunders et al., 1993) (Bilaga 13).

SALIVAPROVTAGNING

Salivprover kommer att samlas in med hjälp av Oragene DNA-flaskor. Förvärvet av salivprovet görs i enlighet med tillverkarens instruktioner. Patienten ska inte äta, dricka, röka eller tugga tuggummi under 30 minuter innan salivprovet ges. Patienten måste spotta i behållaren tills mängden flytande saliv (inte bubblor) når åtminstone den nivå som visas i tillverkarens instruktioner. Personalen sätter behållaren på en plan yta, skruvar på locket på behållaren och måste se till att locket är ordentligt stängt. Behållaren måste blandas försiktigt i minst 10 sekunder och förvaras i rumstemperatur.

BLODPROVTAGNING

Vid studiebesök 1-7 tas venösa blodprover. Högst 100 ml blod kommer att tas från varje deltagare under hela studien (högst 15 ml vid varje besök). Standardmetoder kommer att användas för att erhålla DNA, RNA och serum från blod. Plasmanivåer av glukos, insulin och C-peptid kommer att mätas genom immunanalys.

PROVTAGNING AV URIN OCH AVFÖRING

Urin och avföring kommer att samlas in för metabolomisk analys i 10 ml och 20 ml Sterilin-behållare av patienter. avföringsprov kommer att samlas i sterila behållare innehållande 10 ml fosfatbuffrad saltlösning (PBS) (innehållande, per liter, 8 g NaCl, 0,2 g KCl, 1,44 g Na2HPO4 och 0,24 g KH2PO4 [pH 7,2]) och förvaras i hemfrysar tills de fördes till laboratoriet där proverna förvarades vid -80°C tills vidare bearbetning.

VÄVNADSPROVTAGNING UNDER OPERATION

Alla biopsier kommer att tas med sax och/eller harmonisk skalpell (ultraljudsinstrument för dissektion). Muskelvävnad kommer att tas från bukväggen vid en troacharplats. Levervävnad kommer att tas från kanten av den vänstra leverloben via nålbiopsi. Subkutan fettvävnad kan tas från ett snitt för en troachar (cirka 2 g) och visceral fettvävnad kan tas från det stora omentum vid den större krökningen av magen. Detta kommer att göras vid tidpunkten för operationen och igen hos alla patienter som behöver omopereras. Standardmetoder kommer att användas för att lagra vävnaderna och för att stabilisera och rena DNA och RNA från vävnaderna för syftet med vår studie.