西洛他唑及其对人类卵巢减数分裂恢复的影响

复方口服避孕药 (COC) 是美国最常用的避孕激素形式，至少 87% 的育龄妇女报告在其生命中的某个阶段使用过口服避孕药 (9)。 尽管经常使用，但口服避孕药的 6 个月和 12 个月停药率分别为 31% 和 47% (17)，停药的常见原因是异常出血、头痛和体重增加等副作用。

此外，正如美国疾病控制中心医疗资格标准 (11) 所述，COC 在某些女性群体中是禁忌的。 鉴于口服避孕药使用者普遍因副作用而停止使用或因潜在健康状况不符合使用条件，因此有必要开发在预防怀孕方面同样有效的新型口服非激素方法。

自 1980 年代以来，科学文献中就出现了开发非激素避孕药的潜力，当时对哺乳动物卵母细胞配子发生的关键成分进行了分类。 Bornslaeger 及其同事发现，高浓度的细胞内 cAMP（许多生物过程的重要第二信使）会抑制小鼠卵母细胞中减数分裂 I 的恢复 (3)。 后来的研究表明，能够防止 cAMP 分解的磷酸二酯酶 3 抑制剂能够防止体外培养的小鼠卵母细胞恢复减数分裂 (6)。

自 1980 年代以来，更多的研究检查了磷酸二酯酶抑制剂及其在预防卵母细胞成熟中的作用。 Tsafriri 及其同事表明，磷酸二酯酶抑制剂能够通过特定类型的亚型选择性地发挥其作用。 这项研究表明，颗粒细胞通过 4 型磷酸二酯酶抑制剂发挥作用，卵母细胞通过 3 型磷酸二酯酶抑制剂对信号作出反应，因此在 PDE3 抑制剂存在的情况下卵母细胞成熟被阻止，但排卵不受影响 (15)。 最近，Jensen 及其同事检查了磷酸二酯酶 3 抑制剂 ORG 9935 对恒河猴卵母细胞成熟的体外和体内影响。 在这些动物研究中，发现在体外，浓度为 1.0umol/l 的 ORG 9935 能够完全抑制卵母细胞成熟 (7)。

体内模型显示卵母细胞成熟有类似的减少，在排卵前用延长剂量的 ORG 9935 (200mg/kg/d) 治疗的猴子中减少最显着 (8)。 此外，还研究了用 ORG 9935 处理的猕猴的妊娠率，并与对照组进行了比较。 总的来说，用 PDE3 抑制剂治疗的猕猴的怀孕率没有显着下降；然而，似乎确实存在剂量反应的证据，因为没有动物在血清 ORG 9935 水平高于 300nM/L 的情况下怀孕 (9)。 尽管存在明确的剂量反应，但本研究的作者承认 PDE3-Is 具有全身效应，同时也是剂量限制性的。 在较高剂量下，观察到心动过速和低血压等不良反应。

另外还对磷酸二酯酶 3 抑制剂进行了体外研究，以评估人类卵母细胞的成熟度。 与对照卵母细胞相比，在存在 ORG 9935 (1um) 的情况下培养 24 小时的人卵母细胞表明，生发泡破裂（卵母细胞成熟的早期标志物）在统计学上显着减少 (12)。 然而，目前还没有评估磷酸二酯酶 3 抑制剂治疗后卵母细胞成熟的人体模型。

西洛他唑是 FDA 批准的用于治疗间歇性跛行的药物，是一种 IIIa 类磷酸二酯酶抑制剂。 它对人体的全身作用包括血管舒张、血小板聚集减少、甘油三酯水平降低和 HDL 胆固醇水平升高 (4)。 人体临床试验未涉及生育率和妊娠率；然而，制造商的产品标签报告说，对大鼠的生育能力没有影响。 然而，最近进行了两项动物体内研究，检查用西洛他唑治疗的小鼠的妊娠率 (1,10)。 在这两项研究中，用西洛他唑治疗的小鼠在随访中表现出完全不育；然而，一旦停药，所有在用西洛他唑治疗期间无法怀孕的小鼠随后都能够怀孕，产仔数正常。 值得一提的是，在 Albarzanchi 的研究中，小鼠连续三天口服剂量为 7.5 或 15 mg PO 的西洛他唑 (1)。 在 Li 在中国进行的研究中，最大剂量更高 (300mg/kg) (10)。 两项研究的妊娠结局相同。

这些研究证明了避孕方法的两个重要方面：有效性和可逆性。 此外，发表了西洛他唑对小鼠生育能力影响的研究人员发表了一篇摘要，证明了对猪的类似影响 (2)。 当在排卵前给予人体剂量为 100 毫克 bid 的西洛他唑时，没有发生怀孕的记录。 停止研究药物后，所有猪都能怀孕。

鉴于磷酸二酯酶抑制剂在体内和体外模型中成功预防动物模型中的卵母细胞成熟和妊娠，我们进一步研究这种潜在的非激素口服避孕方法是合理的。 鉴于需要进行许多 FDA 临床试验，新的避孕方法需要数十年的时间才能开发出来。 然而，由于西洛他唑是 FDA 批准的具有可接受的副作用的药物，我们认为使用在猕猴中验证的体内技术完成该药物在人体中的初步研究是合适的，猕猴是一种具有相同排卵期的模型作为女性的事件，以确定其作为非激素口服避孕药的可能用途。

该研究的主要目的是确定与卵巢卵泡刺激后配对的历史对照相比，服用西洛他唑的女性是否表现出卵母细胞成熟受损。 出于我们研究的目的，卵母细胞成熟将使用前期 I、中期 I 和中期 II 的卵母细胞成熟阶段进行评估。 因此，我们将评估在受控卵巢刺激过程中从卵泡中吸出的卵母细胞的百分比，这些卵母细胞的进展超过了生发泡阶段（例如 GVBD）在那些接受西洛他唑的女性中，并将其与从先前接受过卵泡刺激但未服用研究药物的相同女性获得的卵母细胞的成熟度进行比较。

我们建议，与卵巢卵泡刺激后配对的历史对照相比，接受 FDA 批准剂量的 100mg PO BID 西洛他唑治疗的女性将表现出卵母细胞成熟受损。