Cilostazol og dets virkninger på genoptagelse af meiose i den menneskelige ovarie

Kombinerede p-piller (COC'er) er den mest almindeligt anvendte hormonelle præventionsform i USA, hvor mindst 87 % af kvinder i den fødedygtige alder rapporterer brug af p-piller på et tidspunkt i deres liv (9). På trods af deres hyppige brug er de seks og tolv måneders seponeringsrater for p-piller henholdsvis 31 og 47 % (17), med almindelige årsager til seponering tilskrives bivirkninger som unormal blødning, hovedpine og vægtøgning.

Derudover er p-piller kontraindiceret i visse grupper af kvinder som beskrevet af The Centers for Disease Control Medical Eligibility Criteria (11). I betragtning af den høje forekomst af p-pillebrugere, som almindeligvis ophører med at bruge sekundært til bivirkninger, eller som ikke er berettiget til brug som følge af underliggende helbredstilstande, er udviklingen af ​​nye orale ikke-hormonelle metoder, der er lige så effektive til forebyggelse af graviditet, berettiget.

Potentialet for udvikling af ikke-hormonel prævention har været til stede i den videnskabelige litteratur siden 1980'erne, hvor de kritiske komponenter i gametogenesen af ​​pattedyrets oocyt blev klassificeret. Bornslaeger og kolleger opdagede, at høje koncentrationer af intracellulær cAMP, en vigtig anden budbringer for mange biologiske processer, hæmmede genoptagelse af meiose I i museoocytter (3). Senere undersøgelser viste, at phosphodiesterase 3-hæmmere, der er i stand til at forhindre nedbrydning af cAMP, var i stand til at forhindre genoptagelse af meiose i museoocytter dyrket in vitro (6).

Siden 1980'erne har yderligere undersøgelser undersøgt phosphodiesterasehæmmere og deres rolle i forebyggelsen af ​​oocytmodning. Tsafriri og kolleger viste, at phosphodiesterasehæmmere var i stand til at udøve deres virkning selektivt via typespecifikke isoformer. Denne undersøgelse afslørede, at granulosaceller udøver virkninger via type 4 phosphodiesterasehæmmere, og oocytter reagerer på signaler via type 3 phosphodiesterasehæmmere, således at oocytmodning blev forhindret i nærvær af PDE3-hæmmere, men ægløsningen var upåvirket (15). Senest har Jensen og kolleger undersøgt både in vitro og in vivo effekter af en phosphodiesterase 3-hæmmer ORG 9935 på oocytmodning hos rhesusaber. I disse dyreforsøg viste det sig, at in vitro var ORG 9935 i en koncentration på 1,0 umol/l i stand til fuldstændig at hæmme oocytmodning (7).

In vivo-modeller viste en lignende reduktion i oocytmodning, med den mest dramatiske reduktion hos aber behandlet med et udvidet dosisregimen af ​​ORG 9935 (200 mg/kg/d) før ægløsning (8). Derudover blev graviditetsrater hos makakaber behandlet med ORG 9935 undersøgt og sammenlignet med kontroller. Samlet set var der ikke et statistisk signifikant fald i graviditetsrater hos de makakaber behandlet med PDE3-hæmmer; der så dog ud til at være tegn på et dosisrespons, da intet dyr blev gravide, som havde serum ORG 9935 niveauer over 300nM/L (9). På trods af en klar dosisrespons anerkender forfatterne af denne undersøgelse, at PDE3-Is har systemiske virkninger, som også er dosisbegrænsende. Ved højere doser blev der observeret bivirkninger såsom takykardi og hypotension.

Phosphodiesterase 3-hæmmere er desuden blevet undersøgt in vitro for at vurdere oocytmodning hos mennesker. Humane oocytter dyrket i nærvær af ORG 9935 (1um) i 24 timer viste en statistisk signifikant reduktion i nedbrydning af germinal vesikel (en tidlig markør for oocytmodning) sammenlignet med kontroloocytter (12). Der eksisterer imidlertid ingen humane in vivo-modeller, der vurderer oocytmodning efter behandling med en phosphodiesterase 3-hæmmer.

Cilostazol, et FDA godkendt lægemiddel til behandling af claudicatio intermittens, er en klasse IIIa phosphodiesterasehæmmer. Dets systemiske virkninger hos mennesker omfatter vasodilatation, fald i blodpladeaggregation, reduktion i triglyceridniveauer og stigning i HDL-kolesterolniveauer (4). Humane kliniske forsøg omhandlede ikke fertilitets- og graviditetsrater; producentens produktmærkning rapporterer dog, at der ikke forekom fertilitetseffekter hos rotter. Senest blev der dog udført to in vivo dyreforsøg, der undersøgte graviditetsrater hos mus behandlet med Cilostazol (1,10). I begge disse undersøgelser blev mus behandlet med Cilostazol vist at være fuldstændig infertile ved opfølgning; Men når lægemidlet blev afbrudt, kunne alle mus, der ikke var i stand til at blive gravide under behandling med cilostazol, efterfølgende have graviditeter med normal kuldstørrelse. Det er vigtigt at nævne, at i undersøgelsen af ​​Albarzanchi fik mus PO cilostazol i en dosis på 7,5 eller 15 mg PO i tre dage (1). I undersøgelsen af ​​Li udført i Kina var den maksimale dosis højere (300 mg/kg) (10). Graviditetsresultaterne for begge undersøgelser var de samme.

Disse undersøgelser viser to vigtige aspekter af en præventionsmetode: effektivitet og reversibilitet. Derudover offentliggjorde efterforskerne, der offentliggjorde Cilostazols fertilitetseffekter hos mus, et abstrakt, der demonstrerede en lignende effekt hos svin (2). Når en human dosis på 100 mg Cilostazol to gange blev givet før ægløsning, forekom ingen dokumenterede graviditeter. Efter ophør med undersøgelseslægemidlet var alle svin i stand til at blive gravide.

I betragtning af succesen med phosphodiesterase-hæmmere i både in vivo og in vitro-modeller til forebyggelse af oocytmodning og graviditet i dyremodeller, er det rimeligt, at vi yderligere undersøger denne potentielle ikke-hormonelle orale præventionsmetode. I betragtning af de mange kliniske forsøg fra FDA, der skal udføres, tager det årtier at udvikle nye præventionsmetoder. Men da Cilostazol er et godkendt FDA-lægemiddel med en acceptabel bivirkningsprofil, mener vi, at det er hensigtsmæssigt at gennemføre indledende undersøgelser af dette lægemiddel hos mennesker ved hjælp af en in vivo-teknik valideret i makakaber, en model med samme timing af peri-ovulatorisk begivenheder som kvinder, for at fastslå dets mulige anvendelse som et ikke-hormonelt oralt præventionsmiddel.

Det primære formål med forskningsstudiet er at afgøre, om kvinder, der tager Cilostazol, viser svækkelse af oocytmodning sammenlignet med parrede historiske kontroller efter ovariefollikelstimulering. Til formålet med vores undersøgelse vil oocytmodning blive vurderet ved hjælp af oocytmodningsstadierne af profase I, metafase I og metafase II. Således vil vi vurdere procentdelen af ​​oocytter, der aspireres fra follikler under kontrolleret ovariestimulering, der udvikler sig ud over germinal vesikelstadiet (f. GVBD) hos de kvinder, der får cilostazol, og sammenligne dette med modningen af ​​oocytter opnået fra de samme kvinder, som tidligere har gennemgået ovariefollikelstimulering, mens de ikke var i undersøgelsesmedicin.

Vi foreslår, at kvinder, der gennemgår behandling med den FDA-godkendte dosis på 100 mg PO BID af Cilostazol, vil udvise en svækkelse af oocytmodningen sammenlignet med parrede historiske kontroller efter ovariefollikelstimulering.