Cilostazol och dess effekter på återupptagande av meios i den mänskliga äggstocken

Kombinerade p-piller (COC) är den mest använda hormonella formen av preventivmedel i USA, med minst 87 % av kvinnorna i reproduktiv ålder som rapporterar p-piller någon gång i livet (9). Trots den frekventa användningen är frekvensen av avbrott i sex och tolv månader för p-piller 31 respektive 47 % (17), med vanliga orsaker till att behandlingen avbryts tillskrivas biverkningar av onormal blödning, huvudvärk och viktökning.

P-piller är dessutom kontraindicerade i vissa grupper av kvinnor enligt beskrivningen av The Centers for Disease Control Medical Eligibility Criteria (11). Med tanke på den höga förekomsten av orala preventivmedelsanvändare som vanligtvis avbryter användningen sekundärt till biverkningar eller som inte är kvalificerade för användning på grund av underliggande hälsotillstånd, är utvecklingen av nya orala icke-hormonella metoder som är lika effektiva för att förebygga graviditet motiverad.

Potentialen för utveckling av icke-hormonell preventivmedel har funnits i den vetenskapliga litteraturen sedan 1980-talet, då de kritiska komponenterna i gametogenesen av däggdjursäggcellerna klassificerades. Bornslaeger och kollegor upptäckte att höga koncentrationer av intracellulär cAMP, en viktig andra budbärare för många biologiska processer, hämmade återupptagandet av meios I i musoocyter (3). Senare studier visade att fosfodiesteras 3-hämmare, som kan förhindra nedbrytning av cAMP, kunde förhindra återupptagande av meios i musoocyter odlade in vitro (6).

Sedan 1980-talet har ytterligare studier undersökt fosfodiesterashämmare och deras roll för att förhindra oocytmognad. Tsafriri och kollegor visade att fosfodiesterashämmare kunde utöva sina effekter selektivt via typspecifika isoformer. Denna studie avslöjade att granulosaceller utövar effekter via typ 4 fosfodiesterashämmare och oocyter svarar på signaler via typ 3 fosfodiesterashämmare så att oocytmognad förhindrades i närvaro av PDE3-hämmare men ägglossningen var opåverkad (15). Senast undersökte Jensen och kollegor effekterna både in vitro och in vivo av en fosfodiesteras 3-hämmare ORG 9935 på oocytmognad hos rhesusapor. I dessa djurstudier fann man att in vitro kunde ORG 9935 i en koncentration av 1,0 umol/l fullständigt hämma oocytmognad (7).

In vivo-modeller visade en liknande minskning av oocytmognad, med den mest dramatiska minskningen hos apor som behandlats med en utökad dosregim av ORG 9935 (200 mg/kg/d) före ägglossning (8). Dessutom studerades graviditetsfrekvensen hos makaker behandlade med ORG 9935 och jämfördes med kontroller. Sammantaget fanns det ingen statistiskt signifikant minskning av graviditetsfrekvensen hos de makaker som behandlats med PDE3-hämmare; Det verkade dock finnas tecken på ett dossvar eftersom inget djur blev dräktigt som hade serum ORG 9935-nivåer över 300 nM/L (9). Trots ett tydligt dossvar erkänner författarna till denna studie att PDE3-Is har systemiska effekter som också är dosbegränsande. Vid högre doser observerades biverkningar som takykardi och hypotoni.

Fosfodiesteras 3-hämmare har dessutom studerats in vitro för att bedöma oocytmognad hos människor. Humana oocyter odlade i närvaro av ORG 9935 (1um) under 24 timmar visade en statistiskt signifikant minskning av nedbrytning av groddblåsor (en tidig markör för oocytmognad) i jämförelse med kontrolloocyter (12). Det finns dock inga mänskliga in vivo-modeller som bedömer oocytmognad efter behandling med en fosfodiesteras 3-hämmare.

Cilostazol, ett FDA-godkänt läkemedel för behandling av claudicatio intermittens, är en klass IIIa fosfodiesterashämmare. Dess systemiska effekter hos människor inkluderar vasodilatation, minskning av trombocytaggregation, minskning av triglyceridnivåer och ökning av HDL-kolesterolnivåer (4). Humana kliniska prövningar behandlade inte fertilitets- och graviditetsfrekvenser; dock rapporterar tillverkarens produktmärkning att inga fertilitetseffekter inträffade hos råttor. Senast genomfördes dock två djurstudier in vivo som undersökte dräktighetsfrekvensen hos möss som behandlats med Cilostazol (1,10). I båda dessa studier visades möss behandlade med Cilostazol vara helt infertila vid uppföljning; Men när läkemedlet väl avbröts kunde alla möss som inte kunde bli gravida under behandling med cilostazol senare ha graviditeter av normal kullstorlek. Det är viktigt att nämna att i studien av Albarzanchi fick möss PO cilostazol i en dos av 7,5 eller 15 mg PO under tre dagar (1). I studien av Li utförd i Kina var den maximala dosen högre (300 mg/kg) (10). Graviditetsresultaten för båda studierna var desamma.

Dessa studier visar två viktiga aspekter av en preventivmetod: effektivitet och reversibilitet. Dessutom publicerade forskarna som publicerade Cilostazols fertilitetseffekter hos möss ett sammandrag som visar en liknande effekt hos svin (2). När en human dos på 100 mg Cilostazol två gånger dagligen gavs före ägglossningen inträffade inga dokumenterade graviditeter. Efter upphörande av studieläkemedlet kunde alla svin bli gravida.

Med tanke på framgången med fosfodiesterashämmare i både in vivo och in vitro-modeller för förebyggande av oocytmognad och graviditet i djurmodeller, är det rimligt att vi undersöker denna potentiella icke-hormonella orala preventivmetod ytterligare. Med tanke på de många kliniska prövningar av FDA som måste genomföras tar det årtionden att utveckla nya preventivmetoder. Men eftersom Cilostazol är ett godkänt läkemedel från FDA med en acceptabel biverkningsprofil, anser vi att det är lämpligt att slutföra inledande studier av detta läkemedel på människor med en in vivo-teknik validerad i makaker, en modell med samma tidpunkt för peri-ägglossning. händelser som kvinnor, för att fastställa dess möjliga användning som ett icke-hormonellt oralt preventivmedel.

Det primära syftet med forskningsstudien är att fastställa om kvinnor som tar Cilostazol uppvisar försämring av oocytmognad i jämförelse med parade historiska kontroller efter stimulering av äggstocksfollikel. För syftet med vår studie kommer oocytmognad att bedömas med användning av oocytmognadsstadierna i profas I, metafas I och metafas II. Således kommer vi att bedöma procentandelen oocyter som aspireras från folliklar under kontrollerad äggstocksstimulering som fortskrider bortom germinal vesikelstadiet (t. GVBD) hos de kvinnor som får cilostazol och jämför detta med mognaden av oocyter som erhållits från samma kvinnor som genomgick äggstocksfollikelstimulering tidigare medan de inte fick studieläkemedel.

Vi föreslår att kvinnor som genomgår behandling med den FDA-godkända dosen på 100 mg PO BID av Cilostazol kommer att visa en försämring av oocytmognad i jämförelse med parade historiska kontroller efter äggstocksfollikelstimulering.