Kuvan 对 Amish PKU 患者的疗效

苯丙酮尿症 (PKU) 是由苯丙氨酸羟化酶 (PAH) 缺乏引起的。 PAH 负责苯丙氨酸分解代谢的限速步骤。 该反应依赖于四氢生物蝶呤 (BH4)。 BH4 是酶 PAH 的催化辅助因子。 在某些患者中，补充合成 BH4（saproterin dihydrochloride 或 KuvanTm）已被证明可以激活残留的 PAH 活性并降低 Phe 水平。 它还可能通过结合异常的 PAH 蛋白并减少其降解而具有伴侣效应。 Saproterin 是一种经批准的口服药物，用于降低血液苯丙氨酸 (Phe) 水平并增加 BH4 反应性高苯丙氨酸血症患者的 Phe 耐受性。

已发现某些基因型是 Saproterin 反应性的良好预测因子；然而，这些相关性并不完美。 因此，护理标准是进行一项 Saproterin 治疗试验，以评估每个 PAH 患者的反应性，无论其基因型如何。 目前该建议不包括具有两个无效突变的患者。

本研究的目的是确定患有 PKU 的阿米什人患者在接受高剂量、长时间的沙丙蝶呤试验后是否表现出反应。 目标群体具有高频率的特定剪接位点突变，即 1066-11G>A 突变。 该剪接位点突变导致蛋白质构象变化和功能废除。 以前对该基因型的研究表明，PAH 酶的残留活性 <1%，并且对 Saproterin 的反应微不足道。 然而，在这项特定研究中，仅在以 20mg/kg 的标准剂量进行单剂量 BH4 攻击后 24 小时内评估 Phe 水平。

最近，对几位阿米什人患者的观察表明，这些患者在经过较长时间的药物试验后可能会对沙普罗特林产生反应（个人评论 - Samuel Yang，医学博士）。 此外，评估这些患者中 PAH 酶活性的研究发现证据表明，这种基因型可能需要更高的辅助因子浓度才能获得最佳酶活性，因此可能需要比目前推荐的 20 毫克/千克更高剂量的沙丙肝素 (9)。 迄今为止，还没有进行正式的临床试验。

为了回答这种基因型是否在较长时间内对较高剂量的 Saproterin 有反应的问题，研究人员提出了一项随机临床试验，比较接受标准剂量 Saproterin 治疗的患者和接受高剂量 Saproterin 治疗的患者的血液 Phe 水平。 这项研究的结果可能会揭示一个新的对 Saproterin 敏感的 PKU 患者群体。 这可能会质疑 PAH 基因的其他无效突变及其对 Saproterin 的反应性。 这可能导致对以前被认为对 Saproterin 无反应的基因型进行调查。 此外，由于文化和经济原因，单独的饮食治疗已被证明对阿米什人来说是困难的。

这项研究将包括来自三个地方中心的患者，并可能有第四个州外中心参与。 所有患者都将通过 University Hospitals Case Medical Center 入组。 将通过电话或亲自获得同意。

• 来自凯斯西储大学医院/彩虹婴儿和儿童医院/人类遗传学中心的阿米什患者
• 俄亥俄州阿克伦市阿克伦儿童医院的阿米什人患者
• 来自俄亥俄州米德尔菲尔德特殊需要儿童中心（DDC 诊所）的阿米什患者
• 来自蒙大拿州海伦娜市 Shodair 儿童医院的患者。 如果需要更多患者来满足我们的入组目标，可能会招募这些患者。

研究患者将前往他们首选的诊所进行 5 次就诊。 初始测试/第 1 部分：长度为 4 周

招募的患者将在研究的第 1 部分出现在诊所。 在获得知情同意后，将进行分子遗传学检测。 测试将包括 PAH 基因的序列分析。 该测试对于识别每个患者中存在的特定基因型是必要的。 研究人员预计该人群中的大多数对于上述剪接位点突变是纯合子或杂合子。 任何在测序后发现有一个（或没有）可识别突变的患者将不包括在研究中。 基因型将在研究结束时单独分组和分析。 不希望接受基因检测的患者将不被纳入研究。

每个患者的初始血液 Phe 水平也将以滤纸卡上干血点的形式绘制，该滤纸卡将由检测公司提供。 所有 Phe 测试都将在宾夕法尼亚州斯特拉斯堡特殊儿童诊所的临床实验室改进修正案 (CLIA) 认证实验室进行。

基线评估工具（BRIEF、PKU-QOL）也将在初次访视时进行。 我们的研究药物药房将为患者提供一个独特的研究编号，并将开始研究的第 1 部分，如下所述。

在研究的第 1 部分，患者将不会接受任何药物治疗。 每位患者将单独接受饮食治疗。 患者将保持稳定的 Phe 限制饮食（包括配方），这与他们入组时的饮食一致。 这将通过每周保留 3 天的食物日记进行监控。 具体而言，预计患者会在抽血前连续 3 天记日记。 根据这些日记，每周平均 Phe 摄入量和 Phe 耐受性将被计算和记录。 患者还将完成食物频率工具，该工具将在第 1、2 和 3 部分的初次就诊时进行审查。 我们将使用上述所有工具，并允许患者定期拜访我们的营养师，以鼓励他们保持稳定的饮食。

血液 Phe 浓度将每周（每个星期一）通过血点卡测量。 患者不需要每周去诊所就诊来绘制 Phe 水平。 血点卡将在他们家中进行，然后邮寄到参考实验室。 为了教导患者并使患者能够舒适地在家中进行自己的血点检测，护理人员（来自 DDC 诊所）将每周前往每位患者的家中进行研究的第 1 部分（总共 3 个家庭血点）。 对于研究的第 2 部分和第 3 部分，那些有能力的患者和家属将在家中进行自己的血点检测。 那些仍然不愿意自己进行血点采集的家庭将继续由家庭护理人员采集血点。

初次访问：

• 用于 PAH 基因测序的静脉血抽取
• 办公室干血点卡基线 Phe 水平
• 提供执行功能和生活质量评估工具（BRIEF、PKU-QOL）
• 收集和记录基线饮食信息。 计算平均每周 Phe，计算 Phe 耐受性。
• 食物频率工具完成并审查。

研究第 1 部分（仅饮食治疗）的血液 Phe 值和 Phe 耐受性将与低剂量和高剂量治疗的第 2 部分和第 3 部分的血液 Phe 值和 Phe 耐受性进行比较。

第 2 部分：长度 - 4 周

研究编号将被随机分配到“标准剂量 Saproterin”或“高剂量 Saproterin”组（治疗组 A 或治疗组 B）。 研究药物药房将在每个治疗期开始时向研究患者提供成套药物。 目标高剂量 Saproterin 剂量为 40mg/kg（四舍五入至最接近的 500mg），以预包装 500mg 粉包的形式提供。 这些包装上标注的剂量将由研究药物药房覆盖，患者无法识别。 标准剂量的 Saproterin 将以 100 毫克片剂的形式提供 20 毫克/千克（四舍五入到最接近的 100 毫克）。 患者无法识别药片的剂量。 药物将每天口服一次。

初始第 2 部分访问：4 周纯饮食期后

• 前 4 周收集的食物日记（每周 3 份）。 计算平均每周 Phe，计算 Phe 耐受性。
• 食物频率工具完成并审查。
• 办公室用干血点卡绘制的基线 Phe 水平
• 提供执行功能和生活质量评估工具（BRIEF、PKU-QOL）
• 提供药物包（高剂量或标准剂量，4 周供应）

第 2 部分最后访问：治疗 4 周后

• 前 4 周收集的食物日记（每周 3 份）。 计算平均每周 Phe，计算 Phe 耐受性。
• 提供执行功能和生活质量评估工具（BRIEF、PKU-QOL）
• 从每位患者处收集空药瓶/药包以评估依从性
• 审查任何潜在的不良事件

这是第 2 部分的结尾。然后将有 2 周的“清除期”，患者不接受任何治疗。 该清除期的长度是根据沙丙蝶呤的平均消除半衰期和之前的临床试验确定的。 saproterin 的平均消除半衰期范围为 3.9 至 17 小时。 在以前的试验中，清除期由 7 天和 30 天组成。 尚未进行功效评估来区分或支持一个清除期与另一个清除期（BioMarin Pharmaceuticals, Inc. 文件中的数据）。 基于上述排除范围，我们确定两周的清除期就足够了。 患者在此期间应保持稳定的饮食。

第 3 部分：长度 - 4 周 治疗组之间将发生交叉：A 到 B 和 B 到 A。

初始第 3 部分访问：2 周清除期后

• 前 2 周收集的食物日记（每周 3 份）。 计算平均每周 Phe，计算 Phe 耐受性。
• 食物频率工具完成并审查。
• 办公室干血斑卡检测的基线 Phe 水平
• 提供执行功能和生活质量评估工具（BRIEF、PKU-QOL）
• 提供药物包（高剂量或标准剂量，4 周供应）
• 审查任何潜在的不良事件

第 3 部分最后访问：治疗 4 周后

• 前 4 周收集的食物日记（每周 3 份）
• 提供执行功能和生活质量评估工具（BRIEF、PKU-QOL）
• 从每位患者处收集空药瓶/药盒以评估依从性
• 审查任何潜在的不良事件

在所有部分中，患者将保持稳定的 Phe 限制饮食，包括配方（与研究第 1 部分中的饮食相同）。 所有 Phe 水平都将被设盲，研究人员在研究结束之前无法访问它们。 在研究结束时，在分析完所有数据后，将向每位患者的主要代谢医师发送研究期间获得的血液 Phe 水平的完整列表（包括高剂量和低剂量治疗）。 然后，医生可以根据患者的 Phe 水平与他们的患者讨论长期的 Saproterin 治疗。

该研究将在所有部分完成并且 A 组和 B 组都接受了高剂量和标准剂量的 Saproterin 试验后结束。 此时将停用所有药物。