孕期慢性母体压力的胎儿生物标志物 (FELICITy)

理由：

在慕尼黑工业大学 (TUM) 的 Klinikum rechts der Isar 妇产科围产学中心分娩的一组妇女将属于感知压力水平较高的人群，这可能会同时携带的胎儿表现出交感神经和迷走神经活动的改变。

实验设计：

这项研究将在慕尼黑工业大学 (TUM) 的 Klinikum rechts der Isar 妇产科进行，这是一个位于德国慕尼黑的高度复杂的围产学三级中心，每年为大约 2000 名母亲/新生儿提供服务。 TUM 产科医生将根据研究的纳入标准确定预期受试者，与 18 至 45 岁处于妊娠晚期（至少妊娠 28 周）且没有 a) 严重胎盘改变的单胎孕妇一致； b) 胎儿畸形； c) 孕期产妇重病（即 先兆子痫)、d) 母亲吸毒或酗酒、e) 早产（小于 37 周）和 f) 脐带血 pH 值

未来的参与者将被转介参加信息会议，届时将解释程序，完成正式注册，并获得参与者本人的同意书和父母对婴儿的同意。 这些协议严格遵守 TUM 医学研究伦理原则委员会，并获得医院伦理委员会“Klinikum rechts der Isar”的批准。 接受后，参与者将进入第一至第四阶段。

第一阶段：筛选：

在这个初始阶段，调查人员将从同意的女性那里收集人口统计信息，并且在对科恩感知压力量表 10 (PSS-10) 进行评分后，参与者将被归类为压力或控制。 该问卷测量生活中的情境被评估为压力的程度，是一种广泛使用的心理工具，用于测量非特定的感知压力。 PSS 预测压力的客观生物标志物和感知压力水平较高的人的疾病风险增加。 特别是，PSS 分数用于将产前压力、焦虑和抑郁症状作为母乳喂养意向的预测指标，并检查孕妇感知压力的相关性。 以 PSS 和焦虑衡量的产妇产前压力增加与年幼婴儿的气质变化有关，可能是日后精神病理学的危险因素。 PSS-10 已在德语人群中得到验证，将成为筛选潜在受试者压力的快速工具。 出于当前研究的目的，PSS-10 分数≥19 的参与者将被归类为有压力并进入第二阶段。 对于每个被归类为有压力的同意受试者，下一个筛选的与 PSS-10 分数 < 19 的母亲和胎龄匹配的参与者将作为对照进入第二阶段。 招募将继续进行，直到达到 n=75 受试者/组的目标队列。

第二阶段：母亲心理评估和胎儿产前记录：

1. 调查问卷：在上下文中，进入此阶段的参与者将被要求完成一份广泛使用且经过验证的自评调查问卷，以评估与怀孕相关的问题。 参与者必须完成产前痛苦问卷 (PDQ-12)，该问卷旨在评估与怀孕有关的具体忧虑和疑虑，包括有关医疗问题、身体症状、养育子女、人际关系、身体变化、分娩和分娩以及宝宝的健康。 该仪器以前已应用于涉及来自不同文化和社会经济背景的孕妇的大量研究，是评估怀孕相关压力的有效工具。 PDQ-12 已被翻译成德文并得到验证。 此外，参与者将填写一份关于他们的教育水平、社会经济状况、种族和临床病史的问卷。
2. ANS 评估：在同一次就诊期间，将通过常规胎心宫缩图 (CTG) 并同时通过经腹心电图（经腹-胎儿心电图）测量胎儿心率 (FHR)。 电生理信号包含母体心电图（mECG）、胎儿心电图（fECG）和噪声，将使用5个一次性电极进行记录。 五个一次性电极将以标准化的方式放置在产妇腹部。 在放置电极之前，通过在电极放置部位使用砂纸来降低皮肤阻抗。 数据将在计算机下载后进行离线分析。 对于 fECG 方法信号损失高的情况，这是一个已知问题（在妊娠 28 至 32 周之间更常见，但也可能发生在该时期之后），将使用放置在产妇腹部。 研究人员将通过部署先进的 FHR 监测方法来分析 PS 对 ANS 活动的影响：相位校正信号平均 (PRSA)、多维 FHR 变异性分析和母胎心率同步评估 FECG 注册以及 CTG 注册将是在怀孕期间进行一次至少 40 分钟以获得胎儿活动状态。 在分娩期间，将同时进行常规 CTG 以及 fECG 和 mECG（如果可能）。

第三阶段：交付：

1. 产妇皮质醇评估：皮质醇是激活下丘脑-垂体-肾上腺 (HPA) 轴的激素产物，已被认为是连接产妇压力和围产期结局的潜在机制。 单一的血液和/或唾液样本提供了在单一时间点的测量，并考虑到其主要的生理日常波动，可能不是评估产前总体或长期 HPA 活性的最有用的测量。 最近，头发皮质醇测量的使用表明它提供了几个月内综合皮质醇分泌的回顾性指数。 据推测，皮质醇被掺入新出现的毛发中并随之缓慢生长。 因此，假定特定毛发段中皮质醇的量反映了特定毛发段生长期内综合的全身类固醇激素浓度。 头发和唾液皮质醇在非人类灵长类动物中高度相关，并且已经证明孕妇的头发皮质醇浓度增加。 因此，头发皮质醇有可能在长达 3-6 个月的延长时间内作为 HPA 活性的综合指标。 在分娩当天，按照头发测试协会（头发测试协会，1997）的建议，从头顶后部区域尽可能靠​​近头皮收集头发丝（直径约 3 毫米）。 根据每月大约 1 厘米的毛发生长率，假定近端 3 厘米长的毛发段反映了采样前三个月内的综合激素分泌。 3 cm 的头发样本将用铝箔包裹以保护并在室温下储存。 头发样本将被送去进行皮质醇测定。
2. 母体血液采集（不是本研究的一部分——血液将储存在生物库中）：最多采集 20 毫升以提供血清和血浆样本。 血液样本将在血清样本的一个离心周期（2750 rpm x 10 分钟，RT）后储存在 2-4 x 1.8 ml 标记的 Cryotube 小瓶中，并在 -80 °C 下储存，血浆样本在 10 次温和颠倒后储存在-20°C。 血样将在 2-4 小时内处理和冷冻。 将记录所有标本的收集和冷冻之间的时间间隔。
3. 脐带血样本：一旦婴儿出生，在胎盘分离之前，脐带被夹住，脐带血样本将被抽取并按照与上述相同的程序分配到血清和血浆样本的两个试管中。 第三个样品将收集在 PAXgene 管中，小心倒置 10 次并在 RT 下直立放置 5 小时。 在 -20 °C 下 10-16 小时后，将试管储存在 -80 °C 下。 （PAXgene 样本不属于本研究的一部分——血液将储存在生物库中）
4. 胎盘样本（不是本研究的一部分——样本将储存在生物库中）：一旦胎盘被分娩，母方将被解剖。 将进行两次活检（约 1 立方厘米）以避免蜕膜污染。 将样品置于冷冻管小瓶中，并立即储存在 -20 °C 下。
5. 新生儿记录：出生后不久，新生儿专业助产士将使用 Oracollect-DNA 试剂盒（DNA Genotek，加拿大）的海绵轻轻摩擦两侧的牙龈，从新生儿身上采集唾液/口腔样本，并保存在室温下。将记录包括身体指标 pH 值和 APGAR 评分在内的临床数据。

第四阶段：产后记录：

跟进在第一阶段招募的队列并反映神经发育动物研究，我们将进行纵向研究，以探索测量 PS 诱导的表观遗传重编程的生物标志物的可行性。

1. 婴儿发育评估：在研究的最后阶段，母亲将被要求完成一份最终问卷，以评估她将通过邮寄收到的产后抑郁症和母乳喂养情况。 虽然目前的研究侧重于产前事件，但产后早期护理受到母亲抑郁症的严重影响，并可能改变婴儿大脑的表观遗传重编程。 因此，最初几个月母亲参与育儿的程度可能直接影响甲基化状态，并将被记录下来。 母亲将被问及喂养和护理程序以完成产后护理评估。
2. 婴儿的认知发展将在 18 个月大时通过贝利婴儿发育量表 III (BSID) 进行评估。 BSID 由一系列测试组成，旨在评估 0-3 岁婴儿的认知、运动和行为发展。 心理发展指数和精神运动发展指数组成部分的平均得分为 100，标准差为 15（范围为 55 至 145）。 分数在 70-84 之间表示表现轻度延迟，分数 ≤ 69 表示表现明显延迟。 预计约有 13.5% 的受试婴儿属于这些类别。 孕期母亲的心理困扰与 2 岁儿童的 BSID 评分呈剂量反应关系。 一位对产妇压力分类不知情的专业心理学家将进行测试，测试将持续约 40 分钟。
3. 在最后一次访问时，将从婴儿身上收集新的唾液样本。 将从小婴儿获得的唾液 DNA 对生物标志物进行量化。 将测量 ECG 以进行 ANS 评估。 甲基化水平将与母亲的压力、抑郁和焦虑、婴儿的认知发展和 ANS 能力相关，以评估这些新型生物标志物的功效。