Biomarqueurs fœtaux du stress maternel chronique pendant la grossesse (FELICITy)

Raisonnement:

Une cohorte de la population de femmes fréquentant le centre de périnatologie du département d'obstétrique et de gynécologie du Klinikum rechts der Isar de la Technische Universität München (TUM) pour avoir accouché tombera dans le groupe de personnes ayant des niveaux de stress perçus plus élevés qui pourraient portent simultanément des fœtus qui présentent une activité sympathique et vagale altérée.

Conception expérimentale:

Cette étude sera menée au Département d'obstétrique et de gynécologie du Klinikum rechts der Isar de la Technische Universität München (TUM), un centre tertiaire de périnatologie de haute complexité situé à Munich, en Allemagne et qui dessert environ 2000 mères/nouveau-nés par an. Les obstétriciens de la TUM identifieront les sujets potentiels en fonction des critères d'inclusion de l'étude, compatibles avec les femmes enceintes célibataires âgées de 18 à 45 ans au cours de leur troisième trimestre (au moins 28 semaines de gestation) et sans a) altérations placentaires graves ; b) malformations fœtales ; c) maladie maternelle grave pendant la grossesse (c.-à-d. préclampsie), d) abus de drogues ou d'alcool chez la mère, e) naissance prématurée (moins de 37 semaines) et f) pH du sang de cordon

Les participants potentiels seront référés pour assister à une séance d'information, lorsque les procédures seront expliquées, l'inscription formelle sera complétée et les formulaires de consentement des participants eux-mêmes et le consentement parental pour leurs nourrissons seront obtenus. Ces protocoles sont en stricte conformité avec le Comité des principes éthiques pour la recherche médicale de TUM et ont l'approbation du Comité d'éthique de l'hôpital " Klinikum rechts der Isar". Une fois acceptés, les participants entreront dans les phases I-IV.

Phase I : Dépistage :

Dans cette phase initiale, les enquêteurs recueilleront des informations démographiques auprès des femmes consentantes et les participantes seront classées comme stressées ou témoins après avoir obtenu le Cohen Perceived Stress Scale-10 (PSS-10). Ce questionnaire mesure le degré auquel les situations de la vie sont évaluées comme stressantes et est un instrument psychologique largement utilisé pour mesurer le stress perçu non spécifique. Le PSS prédit des marqueurs biologiques objectifs de stress et un risque accru de maladie chez les personnes ayant des niveaux de stress perçus plus élevés. En particulier, les scores PSS ont été utilisés pour relier le stress prénatal, l'anxiété et les symptômes dépressifs en tant que prédicteurs de l'intention d'allaiter et pour examiner les corrélats du stress perçu chez les femmes enceintes. L'augmentation du stress maternel prénatal, mesuré en termes de PSS et d'anxiété, était associée à une variation de tempérament des jeunes nourrissons et pourrait représenter un facteur de risque de psychopathologie plus tard dans la vie. Le PSS-10 a été validé dans des populations germanophones et sera un outil rapide de dépistage du stress chez les sujets potentiels. Aux fins de l'étude actuelle, un participant avec un score PSS-10 ≥ 19 sera classé comme stressé et entrera dans la phase II. Pour chaque sujet consentant classé comme stressé, le prochain participant dépisté correspondant à l'âge maternel et gestationnel avec un score PSS-10 <19 sera entré dans la phase II en tant que contrôle. Le recrutement se poursuivra jusqu'à atteindre la cohorte visée de n=75 sujets/groupe.

Phase II : Évaluation psychologique maternelle et enregistrements prénataux fœtaux :

1. Questionnaires : Dans le contexte, les participantes inscrites entrant dans cette phase seront invitées à remplir un questionnaire d'auto-évaluation largement utilisé et validé afin d'évaluer les préoccupations liées à la grossesse. Les participants devront remplir le questionnaire sur la détresse prénatale (PDQ-12) conçu pour évaluer les inquiétudes et les préoccupations spécifiques relatives à la grossesse et comprend des éléments sur les préoccupations concernant les problèmes médicaux, les symptômes physiques, la parentalité, les relations, les changements corporels, le travail et l'accouchement, et le santé du bébé. Cet instrument a déjà été appliqué dans de nombreuses études impliquant des femmes enceintes de divers horizons culturels et socio-économiques et est un instrument efficace pour évaluer le stress lié à la grossesse. PDQ-12 a été traduit en allemand et a été validé. De plus, les participants rempliront un questionnaire sur leur niveau d'éducation, leur situation socio-économique, leur origine ethnique et leurs antécédents cliniques.
2. Évaluation ANS : Au cours de la même visite, la fréquence cardiaque fœtale (FHR) sera mesurée par une cardiotocographie de routine (CTG) et simultanément par une électrocardiographie transabdominale (ECG transabdomino-fœtal). Le signal électrophysiologique contient l'ECG maternel (mECG), l'ECG fœtal (fECG) et le bruit, il sera enregistré à l'aide de 5 électrodes jetables. Les cinq électrodes jetables seront placées sur l'abdomen maternel de manière standardisée. Avant de placer les électrodes, l'impédance de la peau sera réduite en utilisant du papier abrasif sur le site de placement des électrodes. Les données seront analysées hors ligne après le téléchargement de l'ordinateur. Dans le cas où la perte de signal est élevée avec la méthode fECG, qui est un problème connu (plus fréquent entre 28 et 32 ​​semaines de gestation, mais peut également survenir après cette période), un CTG externe conventionnel sera effectué simultanément à l'aide d'un transducteur à ultrasons placé sur le Ventre maternel. Les chercheurs analyseront l'impact de la PS sur l'activité du SNA en déployant des méthodes avancées de surveillance du FHR : moyenne du signal rectifié en phase (PRSA), analyse de la variabilité multidimensionnelle du FHR et évaluation de la synchronisation de la fréquence cardiaque materno-fœtale. Les enregistrements FECG ainsi que les enregistrements CTG seront effectué une fois pendant la grossesse pendant au moins 40 minutes pour obtenir le statut d'activité fœtale. Pendant le travail, le CTG conventionnel et, si possible, le fECG et le mECG seront effectués simultanément.

Phase III : Livraison :

1. Évaluation du cortisol maternel : le cortisol, le produit hormonal de l'activation de l'axe hypothalamo-hypophyso-surrénalien (HPA), a été suggéré comme un mécanisme potentiel reliant le stress maternel et l'issue périnatale. Des échantillons uniques de sang et/ou de salive fournissent une mesure à un moment donné et, compte tenu de ses principales fluctuations physiologiques quotidiennes, peuvent ne pas être la mesure la plus informative pour évaluer l'activité HPA globale ou à long terme pendant la période prénatale. Récemment, l'utilisation des mesures de cortisol capillaire a démontré qu'elle fournit un indice rétrospectif de la sécrétion de cortisol intégré sur des périodes de plusieurs mois. Il est postulé que le cortisol est incorporé dans les cheveux émergents et pousse lentement avec eux. Par conséquent, la quantité de cortisol dans un segment de cheveux particulier est supposée refléter la concentration systémique intégrée d'hormones stéroïdes sur une période de croissance d'un segment de cheveux spécifique. Les cortisols capillaire et salivaire sont fortement corrélés chez les primates non humains et il a été démontré une augmentation des concentrations de cortisol capillaire chez les femmes enceintes. Par conséquent, le cortisol capillaire a le potentiel de servir de mesure intégrée de l'activité HPA sur une période prolongée allant jusqu'à 3 à 6 mois. Le jour de la parturition, des mèches de cheveux (~ 3 mm de diamètre) seront prélevées dans la région du vertex postérieur de la tête aussi près que possible du cuir chevelu, comme recommandé par la Society of Hair Testing (Soc of Hair testing, 1997). Sur la base d'un taux de croissance des cheveux approximatif de 1 cm par mois, le segment de cheveux proximal de 3 cm de long est supposé refléter la sécrétion hormonale intégrée au cours de la période de trois mois précédant l'échantillonnage. L'échantillon de cheveux de 3 cm sera enveloppé dans du papier d'aluminium pour le protéger et conservé à température ambiante. Des échantillons de cheveux seront envoyés pour la détermination du cortisol.
2. Prélèvement de sang maternel (ne fait pas partie de cette étude - le sang sera conservé à la biobanque) : Un maximum de 20 ml sera prélevé pour fournir des échantillons de sérum et de plasma. Les échantillons de sang seront conservés dans 2 à 4 flacons Cryotube étiquetés de 1,8 ml après un cycle de centrifugation pour les échantillons de sérum (2750 tr/min x 10 min à température ambiante) et conservés à -80 °C et après 10 inversions douces pour les échantillons de plasma et conservés à -20 °C. Les échantillons de sang seront traités et congelés dans les 2 à 4 h. L'intervalle de temps entre la collecte et la congélation sera enregistré pour tous les spécimens.
3. Échantillons de sang de cordon : Une fois que le bébé est né et avant la séparation placentaire, le cordon est clampé et des échantillons de sang de cordon seront prélevés et distribués dans deux tubes pour les échantillons de sérum et de plasma en suivant la même procédure que celle décrite ci-dessus. Un troisième échantillon sera prélevé dans un tube PAXgene, soigneusement retourné 10 fois et laissé à température ambiante pendant 5 h en position verticale. Les tubes seront ensuite stockés à -80 °C après 10-16 hs à -20 °C. (l'échantillon PAXgene ne fait pas partie de cette étude - le sang sera stocké à la biobanque)
4. Échantillons de placenta (ne faisant pas partie de cette étude - les échantillons seront conservés à la biobanque) : Une fois le placenta délivré, le côté maternel sera disséqué. Deux biopsies seront réalisées (environ 1 cm³) en évitant la contamination des caduques. Les échantillons sont placés dans des flacons Cryotube et stockés immédiatement à -20 °C.
5. Enregistrements du nouveau-né : peu de temps après la naissance, une sage-femme spécialisée en néonatologie prélèvera un échantillon de salive/buccal des nouveau-nés en frottant doucement les gencives des deux côtés avec l'éponge du kit Oracollect-DNA (DNA Genotek, Canada) et conservé à température ambiante. Les données cliniques, y compris les paramètres corporels pH et le score APGAR, seront enregistrées.

Phase IV : Enregistrements postnataux :

Dans le prolongement de la cohorte recrutée à la phase I et à l'image de l'étude neurodéveloppementale chez l'animal, nous réaliserons une étude longitudinale pour explorer la faisabilité de mesurer les biomarqueurs de la reprogrammation épigénétique induite par la PS.

1. Évaluation du développement du nourrisson : Dans la phase finale de l'étude, la mère sera invitée à remplir un questionnaire final pour évaluer la dépression post-partum et l'allaitement qu'elle recevra par la poste. Alors que l'étude actuelle se concentre sur les événements prénatals, les soins postnatals précoces sont fortement impactés par la dépression maternelle et peuvent altérer la reprogrammation épigénétique du cerveau du nourrisson. Par conséquent, le niveau d'implication maternelle dans la garde des enfants au cours des premiers mois pourrait affecter directement le statut de méthylation et sera enregistré. Les mères seront interrogées sur les routines d'alimentation et de soins pour compléter l'évaluation des soins postnatals.
2. Le développement cognitif des nourrissons sera évalué par l'échelle Bayley III du développement du nourrisson (BSID) à l'âge de 18 mois. Le BSID est composé d'une série de tests visant à évaluer le développement cognitif, moteur et comportemental des nourrissons de 0 à 3 ans. Les composantes de l'indice de développement mental et de l'indice de développement psychomoteur ont un score moyen de 100 et un écart type de 15 (intervalle de 55 à 145). Les scores entre 70 et 84 indiquent une performance légèrement retardée, et les scores ≤ 69 indiquent une performance significativement retardée. Environ 13,5 % des nourrissons testés devraient appartenir à ces catégories. La détresse psychologique maternelle pendant la grossesse était associée de manière dose-réponse aux scores BSID chez les enfants de 2 ans. Un psychologue spécialisé, qui sera aveugle quant à la catégorisation du stress maternel, administrera les tests, qui dureront environ 40 minutes.
3. Un nouvel échantillon de salive sera prélevé sur les nourrissons lors de cette dernière visite. Les biomarqueurs seront quantifiés à partir de l'ADN salivaire obtenu chez les jeunes nourrissons. L'ECG sera mesuré pour l'évaluation ANS. Les niveaux de méthylation seront corrélés au stress, à la dépression et à l'anxiété de la mère, au développement cognitif du nourrisson et à la capacité du SNA à évaluer l'efficacité de ces nouveaux biomarqueurs.