임신 중 만성 산모 스트레스의 태아 바이오마커 (FELICITy)

이론적 해석:

뮌헨 공과대학(Technische Universität München, TUM)의 Klinikum rechts der Isar 산부인과 센터의 주산기학 센터에 다니는 여성 인구 집단은 출산을 위해 인지된 스트레스 수준이 더 높은 사람들의 그룹에 속할 것입니다. 변화된 교감신경 및 미주신경 활동을 보이는 태아를 수반합니다.

실험적 설계:

이 연구는 독일 뮌헨에 위치하고 있으며 매년 약 2000명의 산모/신생아에게 서비스를 제공하는 고도로 복잡한 Perinatology의 3차 센터인 Technische Universität München(TUM)의 Klinikum rechts der Isar 산부인과에서 수행됩니다. TUM 산부인과 의사는 연구의 포함 기준에 따라 18세에서 45세 사이의 세 번째 3분기(임신 28주 이상)의 단태 임산부와 일관되고 a) 심각한 태반 변화가 없는 예비 피험자를 식별할 것입니다. b) 태아 기형; c) 임신 중 산모의 심각한 질병(즉, 자간전증), d) 산모의 약물 또는 알코올 남용, e) 조산(37주 미만) 및 f) 제대혈 pH

예비 참가자는 정보 세션에 참석하도록 추천되며, 절차가 설명되면 정식 등록이 완료되고 참가자 자신의 동의서와 유아에 대한 부모의 동의가 얻어집니다. 이러한 프로토콜은 TUM의 의학 연구 윤리 원칙 위원회를 엄격히 준수하며 "Klinikum rechts der Isar" 병원 윤리 위원회의 승인을 받았습니다. 수락 시 참가자는 단계 I-IV에 들어갑니다.

I상: 스크리닝:

이 초기 단계에서 조사관은 동의한 여성으로부터 인구통계학적 정보를 수집하고 참가자는 Cohen Perceived Stress Scale-10(PSS-10)을 채점한 후 스트레스 또는 통제로 분류됩니다. 이 설문지는 개인의 삶의 상황이 스트레스로 평가되는 정도를 측정하며 불특정하게 인지된 스트레스를 측정하기 위해 널리 사용되는 심리적 도구입니다. PSS는 인지된 스트레스 수준이 더 높은 사람들 사이에서 스트레스의 객관적인 생물학적 지표와 질병 위험 증가를 예측합니다. 특히, PSS 점수는 모유수유 의도의 예측인자로서 산전 스트레스, 불안 및 우울 증상을 관련시키고 임산부의 인지된 스트레스의 상관관계를 조사하는 데 사용되었습니다. PSS 및 불안으로 측정되는 산모의 산전 스트레스 증가는 어린 영아의 기질적 변이와 관련이 있으며 나중에 정신병리의 위험 요인이 될 수 있습니다. PSS-10은 독일어 사용 인구에서 검증되었으며 예비 피험자 사이에서 스트레스를 선별하는 빠른 도구가 될 것입니다. 현재 연구의 목적을 위해 PSS-10 점수가 19 이상인 참가자는 스트레스를 받는 것으로 분류되고 2단계에 진입합니다. 스트레스를 받는 것으로 분류된 모든 동의 대상자에 대해 PSS-10 점수 < 19인 산모 및 재태 연령에 대해 일치하는 다음 선별된 참가자는 대조군으로 2단계에 입력됩니다. 모집은 n=75 과목/그룹의 목표 코호트에 도달할 때까지 계속됩니다.

2단계: 산모 심리 평가 및 태아 태아 기록:

1. 설문지: 맥락에서 이 단계에 진입하는 등록 참가자는 임신과 관련된 문제를 평가하기 위해 널리 사용되고 검증된 자체 평가 설문지를 작성해야 합니다. 참가자는 임신과 관련된 특정 걱정과 우려를 평가하기 위해 고안된 산전 고통 설문지(PDQ-12)를 작성해야 하며 의학적 문제, 신체적 증상, 육아, 관계, 신체 변화, 진통 및 분만, 아기의 건강. 이 도구는 이전에 다양한 문화 및 사회 경제적 배경을 가진 임산부와 관련된 수많은 연구에 적용되었으며 임신 관련 스트레스를 평가하는 효과적인 도구입니다. PDQ-12는 독일어로 번역되어 검증되었습니다. 또한 참가자는 교육 수준, 사회 경제적 상황, 민족 및 임상 병력에 대한 설문지를 작성합니다.
2. ANS 평가: 동일한 방문 동안 태아 심박수(FHR)는 일상적인 심전도(CTG)와 경복부 심전도(경복부-태아 ECG)에 의해 동시에 측정됩니다. 전기생리학적 신호에는 모체 ECG(mECG), 태아 ECG(fECG) 및 노이즈가 포함되며 5개의 일회용 전극을 사용하여 기록됩니다. 5개의 일회용 전극은 표준화된 방식으로 산모의 복부에 배치됩니다. 전극을 배치하기 전에 전극 배치 부위에 연마지를 사용하여 피부 임피던스를 줄입니다. 데이터는 컴퓨터 다운로드 후 오프라인으로 분석됩니다. 알려진 문제(임신 28주에서 32주 사이에 더 자주 발생하지만 그 이후에도 발생할 수 있음)인 fECG 방법에서 신호 손실이 높은 경우, 기존의 체외 CTG는 초음파 트랜스듀서를 자궁에 장착하여 동시에 시행합니다. 산모 복부. 조사관은 고급 FHR 모니터링 방법(PRSA(위상 정류 신호 평균화), 다차원 FHR 가변성 분석 및 산모-태아 심박동 동기화 평가 FECG 등록 및 CTG 등록)을 배포하여 PS가 ANS 활동에 미치는 영향을 분석할 것입니다. 태아 활동 상태를 얻기 위해 임신 중 최소 40분 동안 1회 수행합니다. 분만 중 기존 CTG와 가능한 경우 fECG 및 mECG가 동시에 수행됩니다.

3단계: 배송:

1. 산모 코르티솔 평가: 시상하부-뇌하수체-부신(HPA) 축 활성화의 호르몬 산물인 코티솔은 산모 스트레스와 주산기 결과를 연결하는 잠재적인 메커니즘으로 제안되었습니다. 단일 혈액 및/또는 타액 샘플은 단일 시점에서 측정을 제공하고 주요 생리적 일일 변동을 고려하면 출생 전 기간 동안 전체 또는 장기 HPA 활동을 평가하는 가장 유익한 측정이 아닐 수 있습니다. 최근에, 모발 코티솔 측정의 사용은 그것이 몇 달 동안 통합된 코티솔 분비의 후향적 지표를 제공한다는 것을 입증했습니다. 코르티솔이 나오는 모발에 통합되어 천천히 자라는 것으로 가정됩니다. 따라서 특정 모발 부분의 코르티솔 양은 특정 모발 부분의 성장 기간 동안 통합된 전신 스테로이드 호르몬 농도를 반영하는 것으로 가정합니다. 머리카락과 타액 코르티솔은 비인간 영장류에서 높은 상관 관계가 있으며 임산부의 머리카락 코르티솔 농도가 증가한 것으로 입증되었습니다. 따라서 모발 코티솔은 최대 3-6개월의 장기간에 걸쳐 HPA 활동의 통합 척도 역할을 할 가능성이 있습니다. 분만 당일 모발 테스트 학회(Soc of Hair testing, 1997)에서 권장하는 대로 가능한 한 두피에 가까운 머리 뒤쪽 정수리 영역에서 모발 가닥(~3mm 직경)을 수집합니다. 매월 1cm의 대략적인 모발 성장 속도를 기준으로 근위부 3cm 길이의 모발 세그먼트는 샘플링 전 3개월 동안 통합된 호르몬 분비를 반영하는 것으로 가정합니다. 3cm 모발 샘플은 보호를 위해 알루미늄 호일로 싸서 실온에 보관합니다. 코르티솔 측정을 위해 모발 샘플을 보냅니다.
2. 산모 혈액 수집(이 연구의 일부가 아님 - 혈액은 바이오뱅크에 저장됨): 혈청 및 혈장 표본을 제공하기 위해 최대 20ml가 수집됩니다. 혈액 표본은 혈청 표본에 대한 1회 원심분리 주기(RT에서 2750rpm x 10분) 후 2-4 x 1.8ml 라벨이 붙은 Cryotube 바이알에 저장되고 -80°C에서 저장되고 혈장 표본에 대해 10번의 완만한 반전 후에 저장됩니다. -20 °C. 혈액 샘플은 2-4시간 이내에 처리되고 동결됩니다. 수집과 동결 사이의 시간 간격은 모든 표본에 대해 기록됩니다.
3. 제대혈 샘플: 아기가 분만되고 태반이 분리되기 전에 제대혈 샘플을 채취하여 위에서 설명한 것과 동일한 절차에 따라 혈청 및 혈장 샘플을 위한 두 개의 튜브에 분배합니다. 세 번째 샘플은 PAXgene 튜브에 수집하고 조심스럽게 10회 뒤집은 다음 RT에서 수직으로 5시간 동안 방치합니다. 그런 다음 튜브는 -20°C에서 10-16시간 후 -80°C에서 보관됩니다. (PAXgene 샘플은 이 연구의 일부가 아닙니다. 혈액은 바이오뱅크에 보관됩니다)
4. 태반 샘플(이 연구의 일부가 아님 - 샘플은 바이오뱅크에 보관됨): 태반이 분만되면 모체 쪽이 해부됩니다. 탈락막 오염을 방지하기 위해 2회의 생검(약 1 cm³)을 실시합니다. 샘플을 Cryotube 바이알에 넣고 -20°C에서 즉시 보관합니다.
5. 신생아 기록: 출생 직후 신생아 전문 조산사는 Oracollect-DNA 키트(DNA Genotek, 캐나다)의 스폰지로 양쪽 잇몸을 부드럽게 문질러 신생아의 타액/구강 샘플을 수집하고 RT에 보관합니다. 신체 지표 pH 및 APGAR 점수를 포함한 임상 데이터가 기록됩니다.

단계 IV: 출생 후 기록:

1상에서 모집된 코호트에 대한 후속 조치와 신경발달 동물 연구를 반영하여 PS 유도 후생유전적 재프로그래밍의 바이오마커 측정 타당성을 탐구하기 위한 종적 연구를 수행할 것입니다.

1. 영아 발달 평가: 연구의 마지막 단계에서 산모는 우편으로 받게 될 산후 우울증과 모유 수유를 평가하기 위한 최종 설문지를 작성해야 합니다. 현재 연구는 산전 사건에 초점을 맞추고 있지만, 조기 산후 관리는 산모의 우울증에 크게 영향을 받으며 유아 뇌의 후성적 재프로그래밍을 변경할 수 있습니다. 따라서 첫 달 동안 보육에 대한 어머니의 참여 수준은 메틸화 상태에 직접적인 영향을 미칠 수 있으며 기록됩니다. 어머니는 산후 관리 평가를 완료하기 위해 수유 및 관리 루틴에 대해 질문을 받게 됩니다.
2. 영아의 인지 발달은 생후 18개월에 Bayley Scale III of Infant development(BSID)로 평가됩니다. BSID는 0~3세 유아의 인지, 운동 및 행동 발달을 평가하기 위한 일련의 테스트로 구성됩니다. 정신 발달 지수 및 정신 운동 발달 지수 구성 요소의 평균 점수는 100이고 표준 편차는 15(55~145 범위)입니다. 70-84점 사이의 점수는 약간 지연된 수행을 나타내고 점수 ≤ 69는 현저하게 지연된 수행을 나타냅니다. 검사를 받은 영아의 약 13.5%가 해당 범주에 속할 것으로 예상됩니다. 임신 중 산모의 심리적 고통은 2세 아동의 BSID 점수와 용량 반응 방식으로 연관되었습니다. 산모의 스트레스 분류에 대해 눈이 먼 전문 심리학자가 약 40분 동안 진행되는 테스트를 관리합니다.
3. 이 마지막 방문에서 유아로부터 새로운 타액 샘플을 수집합니다. 바이오마커는 어린 영아에게서 얻은 타액 DNA에서 정량화됩니다. ECG는 ANS 평가를 위해 측정됩니다. 메틸화 수준은 산모의 스트레스, 우울증 및 불안, 유아의 인지 발달 및 이러한 새로운 바이오마커의 효능을 평가하는 ANS 능력과 상관 관계가 있을 것입니다.