妊娠中の慢性的な母親のストレスの胎児バイオマーカー (FELICITy)

根拠:

出産のためにミュンヘン工科大学 (TUM) の Klinikum rechts der Isar の産科および婦人科の周産期センターに通う女性集団のコホートは、より高い知覚ストレス レベルを持つ人々のグループに分類される可能性があります。交感神経活動と迷走神経活動の変化を示す胎児を同時に運ぶ。

実験計画：

この研究は、ミュンヘン工科大学（TUM）のクリニクム・レヒツ・デア・イザールの産婦人科で実施されます。このセンターは、ドイツのミュンヘンにあり、年間約2000人の母親/新生児にサービスを提供する複雑性の高い周産期学の第三センターです。 TUM産科医は、研究の選択基準に従って、妊娠第3期（少なくとも妊娠28週）の18〜45歳の単胎妊娠女性に一致する見込みのある被験者を特定します。 b) 胎児の奇形; c) 妊娠中の母親の重度の病気 (すなわち 癇癇前症)、d) 母体の薬物またはアルコール乱用、e) 早産 (37 週未満)、および f) 臍帯血 pH

参加予定者は説明会に参加するように紹介され、手順の説明、正式な登録が完了し、参加者本人からの同意書と乳児の保護者の同意が得られます。 これらのプロトコルは、TUM の医学研究倫理委員会に厳密に従っており、病院の倫理委員会「Klinikum rechts der Isar」の承認を得ています。 受け入れられると、参加者はフェーズ I ～ IV に入ります。

フェーズ I: スクリーニング:

この初期段階では、調査員は同意した女性から人口統計情報を収集し、参加者はコーエン知覚ストレス スケール 10 (PSS-10) を採点した後、ストレスまたはコントロールとして分類されます。 このアンケートは、人生の状況がストレスの多いものとして評価される程度を測定し、非特異的な知覚ストレスを測定するために広く使用されている心理的手段です。 PSS は、ストレスの客観的な生物学的マーカーを予測し、ストレスレベルが高いと認識されている人の病気のリスクを高めます。 特に、PSS スコアを使用して、出生前のストレス、不安、抑うつ症状を母乳育児の意思の予測因子として関連付け、妊娠中の女性の知覚ストレスの相関関係を調べました。 PSSおよび不安として測定される母親の出生前ストレスの増加は、幼い乳児の気質の変化と関連しており、人生の後半で精神病理学の危険因子を表す可能性があります. PSS-10 はドイツ語を話す集団で検証されており、被験者候補のストレスをスクリーニングするための迅速なツールとなります。 現在の研究の目的のために、PSS-10スコアが19以上の参加者は、ストレスを受けていると分類され、フェーズIIに入ります。 ストレスを受けていると分類された同意済みのすべての被験者について、PSS-10 スコアが 19 未満で母体年齢と妊娠年齢が一致する次のスクリーニング参加者は、コントロールとしてフェーズ II に入力されます。 募集は、n=75 被験者/グループの目的のコホートに到達するまで続けられます。

フェーズ II: 母親の心理評価と胎児の出生前記録:

1. アンケート: このフェーズに入る登録参加者は、妊娠に関する懸念を評価するために、広く使用され、検証された自己評価アンケートに記入するよう求められます。 参加者は、妊娠に関連する特定の心配や懸念を評価するために設計された出生前の苦痛アンケート（PDQ-12）に記入する必要があります。これには、医学的問題、身体的症状、子育て、人間関係、身体の変化、労働と出産、および妊娠に関する懸念に関する項目が含まれます。赤ちゃんの健康。 この手段は、多様な文化的および社会経済的背景を持つ妊婦を対象とした多数の研究で以前に適用されており、妊娠関連のストレスを評価する効果的な手段です。 PDQ-12 はドイツ語に翻訳され、検証されました。 さらに、参加者は、教育レベル、社会経済的状況、民族性、病歴に関するアンケートに記入します。
2. ANS評価：同じ訪問中に、胎児の心拍数（FHR）は、ルーチンの心電図検査（CTG）によって測定され、同時に経腹心電図検査（経腹部 - 胎児ECG）によって測定されます。 電気生理学的信号には、母体の心電図 (mECG)、胎児の心電図 (fECG)、およびノイズが含まれており、5 つの使い捨て電極を使用して記録されます。 5 つの使い捨て電極は、標準化された方法で母体の腹部に配置されます。 電極を配置する前に、電極配置部位で研磨紙を使用して皮膚インピーダンスを低下させます。 データは、コンピューターにダウンロードした後、オフラインで分析されます。 既知の問題である fECG 法で信号損失が高い場合 (妊娠 28 週から 32 週の間でより頻繁に発生しますが、それ以降にも発生する可能性があります)、従来の外部 CTG は、超音波トランスデューサを使用して同時に実行されます。母体の腹部。 研究者は、FHRモニタリングの高度な方法を展開することにより、ANS活動に対するPSの影響を分析します。位相整流信号平均化（PRSA）、多次元FHR変動分析、および母体と胎児の心拍数同期FECG登録およびCTG登録の評価が行われます。妊娠中に 1 回、少なくとも 40 分間実施して、胎児の活動状態を取得します。 分娩中は、従来の CTG と、可能であれば fECG と mECG が同時に実行されます。

フェーズ III: 配信:

1. 母体のコルチゾール評価: 視床下部-下垂体-副腎 (HPA) 軸の活性化のホルモン生成物であるコルチゾールは、母体のストレスと周産期の転帰を結び付ける潜在的なメカニズムとして示唆されています。 単一の血液および/または唾液サンプルは、単一の時点での測定値を提供し、その主要な生理的日次変動を考慮すると、出生前期間中の全体的または長期的な HPA 活動を評価するための最も有益な測定値ではない場合があります。 最近、髪のコルチゾール測定値の使用により、数か月にわたる統合されたコルチゾール分泌のレトロスペクティブな指標が提供されることが実証されました。 コルチゾールは発生した毛髪に取り込まれ、ゆっくりと成長すると考えられています. したがって、特定の毛髪セグメントのコルチゾールの量は、特定の毛髪セグメントの成長期間にわたる統合された全身性ステロイド ホルモン濃度を反映すると想定されます。 毛髪と唾液コルチゾールはヒト以外の霊長類で高度に相関しており、妊娠中の女性では毛髪コルチゾール濃度の増加が実証されています。 したがって、毛髪コルチゾールは、最大 3 ～ 6 か月の長期間にわたる HPA 活動の総合的な尺度として機能する可能性があります。 分娩当日、Society of Hair Testing (Soc of Hair testing, 1997) が推奨するように、髪の毛 (直径 3 mm 程度) を頭皮にできるだけ近い頭部の後頭部から採取します。 1 か月あたり約 1 cm の髪の成長速度に基づいて、近位の 3 cm の長さの髪のセグメントは、サンプリング前の 3 か月間にわたる統合されたホルモン分泌を反映すると想定されます。 3 cm の毛髪サンプルは、保護のためにアルミ ホイルで包み、室温で保管します。 コルチゾール測定のために毛髪サンプルが送られます。
2. 母体の採血（この研究の一部ではありません-血液はバイオバンクに保存されます）：血清および血漿標本を提供するために最大20 mlが収集されます。 血液標本は、血清標本のための1回の遠心分離サイクル（RTで2750 rpm x 10分）の後、2-4 x 1.8 mlのラベル付きCryotubeバイアルに保存され、-80°Cで保存され、血漿標本のための10回の穏やかな反転の後、 -20℃。 血液サンプルは、2 ～ 4 時間以内に処理および凍結されます。 収集と凍結の間の時間間隔は、すべての検体について記録されます。
3. 臍帯血サンプル: 出産後、胎盤分離前に臍帯血サンプルを採取し、上記と同じ手順に従って血清および血漿標本用の 2 本のチューブに分注します。 3 番目のサンプルを PAXgene チューブに収集し、慎重に 10 回逆さにして、直立させた状態で 5 時間 RT で放置します。 チューブは、-20 ° C で 10-16 時間後、-80 ° C で保存されます。 (PAXgene サンプルはこの研究の一部ではありません。血液はバイオバンクに保管されます)
4. 胎盤サンプル（この研究の一部ではありません-サンプルはバイオバンクに保存されます）：胎盤が配達されると、母体側が解剖されます。 脱落膜の汚染を避けるために、生検を 2 回 (約 1 cm³) 行います。 サンプルを Cryotube バイアルに入れ、-20 ° C ですぐに保存します。
5. 新生児の記録: 出生後すぐに、新生児専門の助産師が Oracollect-DNA キット (DNA Genotek、カナダ) のスポンジで両側の歯茎を優しくこすり、室温で保存することにより、新生児から唾液/頬のサンプルを収集します。身体測定基準 pH および APGAR スコアを含む臨床データが記録されます。

フェーズ IV: 生後記録:

フェーズ I で募集されたコホートをフォローアップし、神経発達動物研究を反映して、PS 誘発エピジェネティック リプログラミングのバイオ マーカーを測定する可能性を探る縦断的研究を行います。

1. 乳児の発達評価：研究の最終段階で、母親は産後うつ病と母乳育児を評価するための最終アンケートに記入するよう求められます。これは郵便で受け取ります。 現在の研究は出産前の出来事に焦点を当てていますが、出産後の早期ケアは母親のうつ病の影響を大きく受けており、乳児の脳のエピジェネティックな再プログラミングを変更する可能性があります。 したがって、最初の数か月間の育児への母親の関与のレベルは、メチル化状態に直接影響する可能性があり、記録されます。 母親は、産後のケアの評価を完了するために、食事とケアのルーチンについて尋ねられます。
2. 乳児の認知発達は、生後18か月のBayley Scale III of Infant development（BSID）によって評価されます。 BSID は、0 ～ 3 歳の乳児の認知、運動、および行動の発達を評価することを目的とした一連のテストで構成されています。 精神発達指数および精神運動発達指数コンポーネントの平均スコアは 100、標準偏差は 15 (55 ～ 145 の範囲) です。 スコアが 70 ～ 84 の場合はパフォーマンスがやや遅れていることを示し、スコアが 69 以下の場合はパフォーマンスが大幅に遅れていることを示します。 テストされた乳児の約 13.5% がこれらのカテゴリに分類されると予想されます。 妊娠中の母親の精神的苦痛は、2 歳児の BSID スコアと用量反応的に関連していた。 母親のストレスの分類に関しては盲目の専門の心理学者が、約40分間のテストを実施します。
3. この最後の来院時に乳児から新しい唾液サンプルを採取します。 バイオマーカーは、幼児から得られた唾液DNAから定量化されます。 ANS評価のためにECGが測定されます。 メチル化レベルは、母親のストレス、うつ病、不安、乳児の認知発達、およびこれらの新規バイオマーカーの有効性を評価する ANS 能力と相関します。