A terhesség alatti krónikus anyai stressz magzati biomarkerei (FELICITy)

Indoklás:

A Müncheni Technische Universität München (TUM) Klinikum rechts der Isar Szülészeti és Nőgyógyászati ​​Klinikum Szülészeti és Nőgyógyászati ​​Klinikumának perinatológiai centrumába járó nők populációjának egy csoportja a szülés miatt azon személyek csoportjába tartozik, akiknél magasabb az észlelt stressz-szint, egyidejűleg olyan magzatokat hordoz, amelyek megváltozott szimpatikus és vagus aktivitást mutatnak.

Kísérleti terv:

Ezt a vizsgálatot a Technische Universität München (TUM) Klinikum rechts der Isar Szülészeti és Nőgyógyászati ​​Osztályán végzik, amely a Münchenben, Németországban található, rendkívül összetett perinatológiai felsőfokú központ, amely évente körülbelül 2000 anyát/újszülöttet szolgál ki. A TUM szülészorvosai a vizsgálat felvételi kritériumai szerint azonosítják a leendő alanyokat, összhangban a 18 és 45 év közötti egyedülálló terhes nőkkel a harmadik trimeszterben (legalább 28 hetes terhességben), és a) súlyos placenta-elváltozások nélkül; b) magzati fejlődési rendellenességek; c) az anya terhesség alatti súlyos betegsége (pl. prelampsia), d) anyai kábítószer- vagy alkoholfogyasztás, e) koraszülés (37 hétnél kevesebb) és f) köldökzsinórvér pH

A leendő résztvevőket egy tájékoztató ülésre irányítják, ahol elmagyarázzák az eljárásokat, befejezik a formális beiratkozást, és beszerzik maguktól a résztvevők beleegyezési űrlapját, valamint csecsemőik szülői hozzájárulását. Ezek a protokollok szigorúan összhangban vannak a TUM Orvosi Kutatások Etikai Alapelvei Bizottságával, és jóváhagyta őket a Klinikum rechts der Isar Kórház Etikai Bizottsága. Az átvételt követően a résztvevők az I-IV.

I. fázis: Szűrés:

Ebben a kezdeti szakaszban a vizsgálók demográfiai információkat gyűjtenek a beleegyező nőktől, és a résztvevőket stresszes vagy kontroll csoportokba sorolják a Cohen észlelt stressz skála-10 (PSS-10) pontozása után. Ez a kérdőív azt méri, hogy az élethelyzeteket milyen mértékben értékelik stresszesnek, és széles körben használt pszichológiai eszköz a nem specifikus észlelt stressz mérésére. A PSS előrejelzi a stressz objektív biológiai markereit és a megbetegedések fokozott kockázatát a magasabb stresszszinttel rendelkező személyek körében. A PSS-pontszámokat különösen a születés előtti stressz, a szorongás és a depressziós tünetek összefüggésére használták, mint a szoptatási szándék előrejelzőjét, valamint a terhes nők észlelt stresszének összefüggéseinek vizsgálatát. Az anyai megnövekedett prenatális stressz, amelyet PSS-ben és szorongásban mértek, a fiatal csecsemők temperamentumbeli változásaihoz kapcsolták, és kockázati tényezőt jelenthet a pszichopatológia későbbi életében. A PSS-10-et német ajkú lakosság körében validálták, és gyors eszköz lesz a leendő alanyok stresszszűrésére. A jelenlegi vizsgálat céljaira a PSS-10 ≥19 pontszámmal rendelkező résztvevőket stresszes kategóriába soroljuk, és a II. Minden beleegyezett, stresszesnek minősített alany esetében a következő szűrt résztvevő, aki megfelel az anyai és terhességi kornak, és PSS-10 pontszáma < 19, bekerül a II. fázisba kontrollként. A toborzás addig folytatódik, amíg el nem érik a célzott n=75 alany/csoport kohorszot.

II. fázis: Anya pszichológiai értékelése és magzati prenatális felvételek:

1. Kérdőívek: Ebben az összefüggésben az ebbe a fázisba lépő beiratkozott résztvevőket felkérik egy széles körben használt és validált önértékelő kérdőív kitöltésére a terhességgel kapcsolatos aggályok felmérése érdekében. A résztvevőknek ki kell tölteniük a Prenatal Distress Questionnaire-t (PDQ-12), amelynek célja a terhességgel kapcsolatos konkrét aggodalmak és aggodalmak felmérése, és az egészségügyi problémákkal, testi tünetekkel, gyermekneveléssel, kapcsolatokkal, testi változásokkal, szüléssel és szüléssel, valamint a a baba egészsége. Ezt az eszközt korábban számos tanulmányban alkalmazták különböző kulturális és társadalmi-gazdasági hátterű terhes nők bevonásával, és hatékony eszköz a terhességgel kapcsolatos stressz felmérésére. A PDQ-12-t lefordították németre és validálták. Ezenkívül a résztvevők kitöltenek egy kérdőívet iskolai végzettségükről, társadalmi-gazdasági helyzetükről, etnikai hovatartozásukról és klinikai előéletükről.
2. ANS felmérés: Ugyanazon látogatás során a magzati szívfrekvenciát (FHR) mérik rutin cardiotographiával (CTG) és egyidejűleg transzabdominális elektrokardiográfiával (transabdominalis-magzati EKG). Az elektrofiziológiai jel az anyai EKG-t (mECG), a magzati EKG-t (fECG) és a zajt tartalmazza, rögzítése 5 eldobható elektródával történik. Az öt eldobható elektródát szabványos módon az anya hasára kell helyezni. Az elektródák felhelyezése előtt a bőr impedanciája csökken, ha csiszolópapírt használnak az elektródák elhelyezésének helyén. Az adatok a számítógépes letöltés után off-line elemzésre kerülnek. Abban az esetben, ha a fECG módszerrel nagy a jelveszteség, ami ismert probléma (gyakrabban 28-32 terhességi hét között, de ez után is előfordulhat), egyidejűleg hagyományos külső CTG-t kell végezni egy ultrahang transzducer segítségével. anyai has. A kutatók elemzik a PS hatását az ANS aktivitásra az FHR monitorozás fejlett módszereinek alkalmazásával: fázis-recectified signal averaging (PRSA), többdimenziós FHR variabilitáselemzés és az anya-magzat szívritmusszinkronizálásának FECG-regisztrációinak, valamint CTG-regisztrációinak értékelése. terhesség alatt egyszer, legalább 40 percen keresztül a magzati aktivitás állapotának megállapításához. A vajúdás során a hagyományos CTG és lehetőség szerint a fECG és a mECG egyidejűleg történik.

III. fázis: Szállítás:

1. Anyai kortizol értékelése: A kortizolt, a hipotalamusz-hipofízis-mellékvese (HPA) tengely aktiválásának hormonális termékét az anyai stressz és a perinatális kimenetel közötti potenciális mechanizmusként javasolták. Az egyszeri vér- és/vagy nyálminták egyetlen időpontban nyújtanak mérést, és figyelembe véve a fő fiziológiai napi ingadozásokat, nem biztos, hogy a leginformatívabb mérőszám az általános vagy hosszú távú HPA aktivitás értékelésére a prenatális időszakban. A közelmúltban a haj kortizol mérése kimutatta, hogy retrospektív indexet ad az integrált kortizol szekrécióról több hónapon keresztül. Feltételezik, hogy a kortizol beépül a feltörekvő hajba, és lassan növekszik vele. Ezért feltételezzük, hogy egy adott hajszegmensben a kortizol mennyisége tükrözi az integrált szisztémás szteroid hormon koncentrációt egy adott hajszegmens növekedési periódusában. A szőr és a nyál kortizolja erősen korrelál a főemlősökben, és kimutatták, hogy terhes nőknél megnő a haj kortizol koncentrációja. Ezért a hajkortizol képes a HPA-aktivitás integrált mérőszámaként szolgálni akár 3-6 hónapig terjedő hosszú ideig. A szülés napján a hajszálakat (~3 mm átmérőjű) a fej hátsó vertex régiójából kell összegyűjteni a fejbőrhöz a lehető legközelebb, a Society of Hair Testing (Soc of Hair testing, 1997) ajánlása szerint. A hozzávetőleges havi 1 cm-es szőrnövekedési ütem alapján feltételezhető, hogy a közeli 3 cm hosszú szőrszegmens tükrözi az integrált hormonszekréciót a mintavétel előtti három hónapos időszakban. A 3 cm-es hajmintát a védelem érdekében alufóliába csomagoljuk és szobahőmérsékleten tároljuk. Hajmintákat küldünk kortizol meghatározására.
2. Anyai vérvétel (nem része ennek a vizsgálatnak – a vért a biobankban tárolják): Maximum 20 ml-t gyűjtenek a szérum- és plazmaminták készítéséhez. A vérmintákat a szérumminták egy centrifugálási ciklusa után (2750 ford./perc x 10 perc szobahőmérsékleten) 2-4 x 1,8 ml-es, címkével ellátott Cryotube fiolákban tárolják, és -80 °C-on, valamint 10 enyhe megfordítás után a plazmamintáknál tárolják. -20 °C. A vérmintákat 2-4 órán belül feldolgozzák és lefagyasztják. A begyűjtés és a fagyasztás közötti időintervallumot minden minta esetében rögzíteni kell.
3. Köldökzsinór vérminták: A baba megszületése után és a méhlepény elválasztása előtt a köldökzsinórt rögzítik, és köldökzsinórvér-mintákat vesznek, és két csőben szétosztják a szérum- és plazmamintákhoz a fent részletezett eljárás szerint. A harmadik mintát egy PAXgene csőbe gyűjtik, óvatosan 10-szer megfordítják, és 5 órán át szobahőmérsékleten hagyják függőleges helyzetben. A csöveket ezután -80 °C-on tárolják 10-16 óra múlva -20 °C-on. (a PAXgene minta nem része ennek a vizsgálatnak – a vér a biobankban kerül tárolásra)
4. Méhlepényminták (nem része ennek a vizsgálatnak – a mintákat a biobankban tárolják): A méhlepény megszületése után az anyai oldalt feldarabolják. Két biopsziát vesznek (körülbelül 1 cm³), elkerülve a decidua szennyeződést. A mintákat Cryotube fiolákba helyezzük és azonnal -20 °C-on tároljuk.
5. Újszülött felvételek: Nem sokkal a születés után egy újszülött szakosodott szülésznő nyál-/bukkális mintát vesz az újszülöttektől úgy, hogy az Oracollect-DNA kit (DNA Genotek, Kanada) szivacsával gyengéden dörzsöli az ínyeket mindkét oldalon, és RT-n tárolja. A rendszer rögzíti a klinikai adatokat, beleértve a testmérők pH-értékét és az APGAR pontszámot.

IV. fázis: Szülés utáni felvételek:

Az I. fázisban felvett kohorsz nyomon követése és az idegfejlődési állatkísérletek tükrözése után longitudinális vizsgálatot végzünk, hogy feltárjuk a PS-indukált epigenetikai átprogramozás biomarkereinek mérésének megvalósíthatóságát.

1. Csecsemőfejlődés értékelése: A vizsgálat utolsó szakaszában az anyát felkérik, hogy töltsön ki egy végső kérdőívet a szülés utáni depresszió és a szoptatás felmérésére, amelyet postai úton kap meg. Míg a jelenlegi tanulmány a születés előtti eseményekre összpontosít, a korai posztnatális gondozást erősen befolyásolja az anyai depresszió, és megváltoztathatja a csecsemő agyának epigenetikai átprogramozását. Ezért az anyák gyermekgondozásban való részvételének mértéke az első hónapokban közvetlenül befolyásolhatja a metilációs állapotot, és ezt rögzíteni fogják. Az anyákat megkérdezik az etetési és gondozási rutinokról, hogy elvégezzék a szülés utáni gondozás értékelését.
2. A csecsemők kognitív fejlődését a csecsemőfejlődés Bayley III. skála (BSID) alapján értékelik 18 hónapos korukban. A BSID egy sor tesztből áll, amelyek célja a 0-3 éves csecsemők kognitív, motoros és viselkedési fejlődésének értékelése. A Mentális Fejlődési Index és a Pszichomotoros Fejlődési Index összetevőinek átlagos pontszáma 100, szórása 15 (55 és 145 közötti tartomány). A 70-84 közötti pontszámok enyhén késleltetett teljesítményt, a ≤ 69-es pontszámok pedig jelentősen késleltetett teljesítményt jeleznek. A tesztelt csecsemők körülbelül 13,5%-a várhatóan ebbe a kategóriába tartozik. A terhesség alatti anyai pszichés distressz dózis-válasz összefüggést mutatott a BSID pontszámokkal 2 éves gyermekeknél. A körülbelül 40 perces teszteket egy szakpszichológus végzi, aki vak lesz az anyai stressz kategorizálásában.
3. Ezen az utolsó látogatáson új nyálmintát vesznek a csecsemőktől. A biomarkerek mennyiségét a fiatal csecsemőktől nyert nyál DNS-ből határozzák meg. Az ANS értékeléséhez EKG-t mérnek. A metilezési szintek korrelálnak az anyai stresszel, depresszióval és szorongással, valamint a csecsemő kognitív fejlődésével és az ANS képességével, hogy értékeljék ezen új biomarkerek hatékonyságát.