Фетальные биомаркеры хронического материнского стресса во время беременности (FELICITy)

Обоснование:

Когорта женщин, обращающихся в центр перинатологии при отделении акушерства и гинекологии в Klinikum rechts der Isar Мюнхенского технического университета (TUM) по поводу родов, попадет в группу лиц с более высоким воспринимаемым уровнем стресса, который может одновременное вынашивание плодов с измененной симпатической и блуждающей активностью.

Экспериментальная дизайн:

Это исследование будет проводиться в отделении акушерства и гинекологии в Klinikum rechts der Isar Технического университета Мюнхена (TUM), специализированном центре перинатологии высокой сложности, расположенном в Мюнхене, Германия, который обслуживает около 2000 матерей/новорожденных в год. Акушеры ТУМ будут определять предполагаемых субъектов в соответствии с критериями включения в исследование, согласующимися с одноплодными беременными женщинами в возрасте от 18 до 45 лет в третьем триместре (по крайней мере, 28 недель беременности) и без а) серьезных изменений плаценты; б) пороки развития плода; в) тяжелое заболевание матери во время беременности (т.е. преклампсия), г) злоупотребление наркотиками или алкоголем у матери, д) преждевременные роды (менее 37 недель) и е) рН пуповинной крови

Потенциальные участники будут направлены на информационную сессию, где будут объяснены процедуры, будет завершена официальная регистрация и будут получены формы согласия от самих участников и согласия родителей для их младенцев. Эти протоколы находятся в строгом соответствии с Комитетом по этическим принципам медицинских исследований ТУМ и одобрены Комитетом по этике больницы «Klinikum rechts der Isar». После принятия участники перейдут к этапу I-IV.

Фаза I: Скрининг:

На этом начальном этапе исследователи будут собирать демографическую информацию от давших согласие женщин, и участники будут классифицированы как находящиеся в состоянии стресса или в контрольной группе после подсчета баллов по Шкале воспринимаемого стресса Коэна-10 (PSS-10). Этот опросник измеряет степень, в которой жизненные ситуации оцениваются как стрессовые, и является широко используемым психологическим инструментом для измерения неспецифического воспринимаемого стресса. PSS предсказывает объективные биологические маркеры стресса и повышенный риск заболевания среди людей с более высоким воспринимаемым уровнем стресса. В частности, баллы PSS использовались для связи пренатального стресса, беспокойства и депрессивных симптомов как предикторов намерения кормить грудью, а также для изучения коррелятов воспринимаемого стресса у беременных женщин. Повышенный материнский пренатальный стресс, измеряемый PSS и тревожностью, был связан с изменчивостью темперамента младенцев раннего возраста и может представлять собой фактор риска развития психопатологии в более позднем возрасте. Тест PSS-10 был апробирован на немецкоязычном населении и станет быстрым инструментом для скрининга стресса среди потенциальных испытуемых. Для целей текущего исследования участник с оценкой PSS-10 ≥19 будет классифицирован как находящийся в состоянии стресса и включен в Фазу II. Для каждого давшего согласие субъекта, отнесенного к категории подверженных стрессу, следующий прошедший скрининг участник, соответствующий материнскому и гестационному возрасту с оценкой PSS-10 <19, будет включен в Фазу II в качестве контроля. Набор будет продолжаться до тех пор, пока не будет достигнута целевая когорта из n = 75 субъектов/группу.

Фаза II: Психологическая оценка матери и пренатальные записи плода:

1. Анкеты: в контексте зарегистрированных участников, вступающих в этот этап, будет предложено заполнить широко используемый и проверенный вопросник самооценки, чтобы оценить проблемы, связанные с беременностью. Участники должны будут заполнить Опросник дородового стресса (PDQ-12), предназначенный для оценки конкретных опасений и опасений, связанных с беременностью, и включает вопросы, касающиеся проблем со здоровьем, физических симптомов, воспитания, отношений, телесных изменений, родов и родов, а также здоровье малыша. Этот инструмент ранее применялся в многочисленных исследованиях с участием беременных женщин из разных культурных и социально-экономических слоев и является эффективным инструментом для оценки стресса, связанного с беременностью. PDQ-12 был переведен на немецкий язык и прошел валидацию. Кроме того, участники заполняют анкету об уровне своего образования, социально-экономическом положении, этнической принадлежности и истории болезни.
2. Оценка ВНС: во время одного и того же визита будет измеряться частота сердечных сокращений плода (ЧЧСС) с помощью обычной кардиотокографии (КТГ) и одновременно с помощью трансабдоминальной электрокардиографии (трансабдоминально-фетальная ЭКГ). Электрофизиологический сигнал содержит ЭКГ матери (мЭКГ), ЭКГ плода (фЭКГ) и шум, он будет записываться с помощью 5 одноразовых электродов. Пять одноразовых электродов будут размещены на животе матери стандартным образом. Перед размещением электродов импеданс кожи будет уменьшен путем использования наждачной бумаги в месте размещения электродов. Данные будут проанализированы в автономном режиме после загрузки на компьютер. В случае высокой потери сигнала при методе фЭКГ, что является известной проблемой (чаще между 28 и 32 неделями беременности, но также может возникнуть и после этого периода), одновременно будет выполняться обычная наружная КТГ с использованием ультразвукового датчика, размещенного на материнский живот. Исследователи проанализируют влияние PS на активность ВНС, применяя передовые методы мониторинга ЧСС: усреднение сигнала с выпрямлением по фазе (PRSA), многомерный анализ вариабельности ЧСС и оценку синхронизации сердечного ритма матери и плода. проводится один раз во время беременности в течение не менее 40 минут, чтобы получить статус активности плода. Во время родов обычная КТГ и, если возможно, фЭКГ и мЭКГ будут выполняться одновременно.

Фаза III: Доставка:

1. Оценка материнского кортизола: кортизол, гормональный продукт активации гипоталамо-гипофизарно-надпочечниковой системы (ГГН), был предложен в качестве потенциального механизма, связывающего материнский стресс и перинатальный исход. Отдельные образцы крови и/или слюны обеспечивают измерение в один момент времени и, учитывая его основные физиологические ежедневные колебания, могут быть не самым информативным показателем для оценки общей или долгосрочной активности HPA в пренатальный период. Недавно использование измерения кортизола в волосах продемонстрировало, что оно обеспечивает ретроспективный показатель интегрированной секреции кортизола в течение нескольких месяцев. Предполагается, что кортизол включается в формирующиеся волосы и медленно растет вместе с ними. Поэтому предполагается, что количество кортизола в конкретном сегменте волос отражает интегрированную концентрацию системных стероидных гормонов в течение периода роста конкретного сегмента волос. Уровень кортизола в волосах и слюне сильно коррелирует у приматов, кроме человека, и было продемонстрировано повышение концентрации кортизола в волосах у беременных женщин. Следовательно, кортизол в волосах может служить интегрированным показателем активности HPA в течение длительного периода времени до 3-6 месяцев. В день родов пряди волос (диаметром ~ 3 мм) будут собираться с задней макушки головы как можно ближе к коже головы, как это рекомендовано Обществом тестирования волос (Soc of Hair testing, 1997). Исходя из приблизительной скорости роста волос, равной 1 см в месяц, предполагается, что проксимальный сегмент волос длиной 3 см отражает интегрированную секрецию гормонов за трехмесячный период до отбора проб. Образец волос длиной 3 см заворачивают в алюминиевую фольгу для защиты и хранят при комнатной температуре. Образцы волос будут отправлены для определения кортизола.
2. Сбор материнской крови (не является частью этого исследования — кровь будет храниться в биобанке): будет собрано максимум 20 мл для получения образцов сыворотки и плазмы. Образцы крови будут храниться в 2-4 х 1,8 мл промаркированных криопробирках после одного цикла центрифугирования для образцов сыворотки (2750 об/мин x 10 мин при комнатной температуре) и храниться при -80 °C и после 10 плавных переворачиваний для образцов плазмы и храниться при -20 °С. Образцы крови будут обработаны и заморожены в течение 2-4 часов. Интервал времени между сбором и замораживанием будет записан для всех образцов.
3. Образцы пуповинной крови: после родов и до отделения плаценты пуповину пережимают, а образцы пуповинной крови берут и распределяют по двум пробиркам для образцов сыворотки и плазмы, следуя той же процедуре, что описана выше. Третий образец будет собран в пробирку PAXgene, осторожно перевернут 10 раз и оставлен при комнатной температуре на 5 часов в вертикальном положении. Затем пробирки будут хранить при температуре -80 °C через 10-16 часов при температуре -20 °C. (образец PAXgene не является частью этого исследования — кровь будет храниться в биобанке)
4. Образцы плаценты (не являются частью этого исследования — образцы будут храниться в биобанке): после доставки плаценты будет иссечена материнская сторона. Будут взяты две биопсии (примерно 1 см³), чтобы избежать загрязнения децидуальной оболочки. Образцы помещают в криопробирки и сразу же хранят при температуре -20 °C.
5. Записи новорожденных: вскоре после рождения акушер-специалист по неонатологии возьмет образцы слюны/буккального сока у новорожденных путем осторожного растирания десен с обеих сторон губкой из набора Oracollect-DNA (DNA Genotek, Канада) и сохранит их в RT. Клинические данные, включая показатели pH тела и оценку по шкале APGAR, будут записаны.

Фаза IV: Постнатальные записи:

Следуя за когортой, набранной на фазе I, и отражая исследование развития нервной системы на животных, мы проведем продольное исследование, чтобы изучить возможность измерения биомаркеров эпигенетического перепрограммирования, вызванного PS.

1. Оценка развития младенцев: на заключительном этапе исследования матери будет предложено заполнить окончательный вопросник для оценки послеродовой депрессии и грудного вскармливания, который она получит по почте. В то время как текущее исследование сосредоточено на антенатальных событиях, ранняя послеродовая помощь сильно зависит от материнской депрессии и может изменить эпигенетическое перепрограммирование мозга младенца. Следовательно, степень участия матери в уходе за детьми в первые месяцы жизни может напрямую влиять на статус метилирования и будет регистрироваться. Матерей спросят о процедурах кормления и ухода, чтобы завершить оценку послеродового ухода.
2. Когнитивное развитие младенцев будет оцениваться по Шкале развития младенцев Бейли III (BSID) в возрасте 18 месяцев. BSID состоит из серии тестов, направленных на оценку когнитивного, моторного и поведенческого развития младенцев в возрасте от 0 до 3 лет. Компоненты Индекса умственного развития и Индекса психомоторного развития имеют средний балл 100 и стандартное отклонение 15 (диапазон от 55 до 145). Баллы от 70 до 84 указывают на небольшую задержку выполнения, а баллы ≤ 69 указывают на значительную задержку выполнения. Ожидается, что примерно 13,5% протестированных младенцев попадут в эти категории. Психологический дистресс матери во время беременности был связан дозозависимым образом с показателями BSID у детей в возрасте 2 лет. Психолог-специалист, который ничего не знает о классификации материнского стресса, проведет тесты, которые продлятся около 40 минут.
3. Во время последнего визита у младенцев будет взят новый образец слюны. Биомаркеры будут количественно определены по ДНК слюны, полученной от младенцев раннего возраста. ЭКГ будет измеряться для оценки ВНС. Уровни метилирования будут коррелировать со стрессом, депрессией и тревогой у матери, с когнитивным развитием младенца и способностью ВНС оценивать эффективность этих новых биомаркеров.