Føtale biomarkører for kronisk maternel stress under graviditet (FELICITy)

Begrundelse:

En kohorte af befolkningen af ​​kvinder, der går på centeret for perinatologi ved afdelingen for obstetrik og gynækologi ved Klinikum rechts der Isar ved Technische Universität München (TUM) for at have født, vil falde i gruppen af ​​personer med højere oplevet stressniveau, der evt. samtidig bære fostre, der viser ændret sympatisk og vagal aktivitet.

Eksperimentelt design:

Denne undersøgelse vil blive udført ved Institut for Obstetrik og Gynækologi ved Klinikum rechts der Isar ved Technische Universität München (TUM), et tertiært center for perinatologi af høj kompleksitet beliggende i München, Tyskland, og som betjener omkring 2000 mødre/nyfødte om året. TUM-fødselslæger vil identificere potentielle forsøgspersoner i henhold til undersøgelsens inklusionskriterier, konsistente med singleton gravide kvinder mellem 18 og 45 år i deres tredje trimester (mindst 28 ugers svangerskab) og uden a) alvorlige placentaændringer; b) føtale misdannelser; c) moderens alvorlige sygdom under graviditeten (dvs. præklampsi), d) moderens stof- eller alkoholmisbrug, e) for tidlig fødsel (mindre end 37 uger) og f) Navlestrengsblod pH

Potentielle deltagere vil blive henvist til at deltage i en informationssession, hvor procedurerne vil blive forklaret, den formelle tilmelding vil blive gennemført, og samtykkeformularerne fra deltagerne selv og forældrenes samtykke til deres spædbørn vil blive indhentet. Disse protokoller er i nøje overensstemmelse med Komitéen for Etiske Principper for Medicinsk Forskning fra TUM og har godkendelse af den etiske komité på Hospitalet "Klinikum rechts der Isar". Ved accept vil deltagerne gå ind i fase I-IV.

Fase I: Screening:

I denne indledende fase vil efterforskerne indsamle demografiske oplysninger fra samtykkende kvinder, og deltagere vil blive kategoriseret som stressede eller kontroller efter at have scoret Cohen Perceived Stress Scale-10 (PSS-10). Dette spørgeskema måler i hvilken grad situationer i ens liv bliver vurderet som stressende og er et meget brugt psykologisk instrument til at måle uspecifik oplevet stress. PSS forudsiger objektive biologiske markører for stress og øget risiko for sygdom blandt personer med højere opfattede stressniveauer. Især blev PSS-score brugt til at relatere prænatal stress, angst og depressive symptomer som forudsigere for intention om at amme og til at undersøge korrelater af opfattet stress hos gravide kvinder. Øget maternel prænatal stress, målt som PSS og angst, var forbundet med temperamentsmæssig variation hos unge spædbørn og kan repræsentere en risikofaktor for psykopatologi senere i livet. PSS-10 er blevet valideret i tysktalende befolkninger og vil være et hurtigt værktøj til at screene stress blandt potentielle forsøgspersoner. Til formålet med det aktuelle studie vil en deltager med en PSS-10-score ≥19 blive kategoriseret som stresset og gået ind i fase II. For hvert samtykkende forsøgsperson kategoriseret som stresset, vil den næste screenede deltager, der matcher moderens og svangerskabsalderen med en PSS-10-score < 19, blive indgået i fase II som kontrol. Rekruttering vil fortsætte, indtil man når den tilsigtede kohorte på n=75 fag/gruppe.

Fase II: Mors psykologiske evaluering og fosterprænatale optagelser:

1. Spørgeskemaer: I den sammenhæng vil tilmeldte deltagere, der går ind i denne fase, blive bedt om at udfylde et udbredt og valideret selvvurderingsspørgeskema for at vurdere bekymringer relateret til graviditet. Deltagerne skal udfylde Prenatal Distress Questionnaire (PDQ-12) designet til at vurdere specifikke bekymringer og bekymringer i forbindelse med graviditet og inkluderer punkter om bekymringer vedrørende medicinske problemer, fysiske symptomer, forældreskab, forhold, kropslige ændringer, fødsel og fødsel, og barnets sundhed. Dette instrument er tidligere blevet anvendt i adskillige undersøgelser, der involverer gravide kvinder med forskellig kulturel og socioøkonomisk baggrund og er et effektivt instrument til at vurdere graviditetsrelateret stress. PDQ-12 er blevet oversat til tysk og blev valideret. Derudover vil deltagerne udfylde et spørgeskema om deres uddannelsesniveau, socioøkonomiske situation, etnicitet og kliniske historie.
2. ANS vurdering: Under samme besøg vil fosterets hjertefrekvens (FHR) blive målt ved en rutinemæssig kardiotokografi (CTG) og samtidig ved transabdominal elektrokardiografi (transabdominal-føtalt EKG). Det elektrofysiologiske signal indeholder moderens EKG (mECG), føtalt EKG (fECG) og støj, det vil blive optaget med 5 engangselektroder. De fem engangselektroder vil blive placeret på moderens mave på en standardiseret måde. Før elektroderne placeres, vil hudimpedansen blive reduceret ved at bruge slibepapir på elektrodeplaceringsstedet. Data vil blive analyseret offline efter computerdownload. I tilfælde af, at signaltabet er højt med fECG-metoden, hvilket er et kendt problem (hyppigere mellem 28 og 32 svangerskabsuger, men også kan forekomme efter denne periode), vil konventionel ekstern CTG blive udført samtidigt ved hjælp af en ultralydstransducer placeret på moderens underliv. Efterforskerne vil analysere virkningen af ​​PS på ANS-aktivitet ved at implementere avancerede metoder til FHR-monitorering: fasekorrigeret signalgennemsnit (PRSA), multidimensionel FHR-variabilitetsanalyse og vurdering af FECG-registreringer af hjertefrekvenssynkronisering af moder-føtal samt CTG-registreringer. udføres én gang under graviditeten i mindst 40 minutter for at få føtal aktivitetsstatus. Under fødslen udføres konventionel CTG og om muligt fECG og mECG samtidigt.

Fase III: Levering:

1. Maternal cortisolvurdering: Cortisol, det hormonelle produkt af aktivering af hypothalamus-hypofyse-binyre-aksen (HPA) er blevet foreslået som en potentiel mekanisme, der forbinder maternel stress og perinatalt resultat. Enkelte blod- og/eller spytprøver giver et mål på et enkelt tidspunkt, og i betragtning af dets store fysiologiske daglige fluktuationer er det muligvis ikke det mest informative mål til at evaluere overordnet eller langsigtet HPA-aktivitet i den prænatale periode. For nylig har brugen af ​​hårkortisolmålinger vist, at det giver et retrospektivt indeks for integreret kortisolsekretion over perioder på flere måneder. Det er postuleret, at kortisol er inkorporeret i det nye hår og langsomt vokser med det. Derfor antages mængden af ​​cortisol i et bestemt hårsegment at afspejle den integrerede systemiske steroidhormonkoncentration over en vækstperiode for et specifikt hårsegment. Hår- og spytkortisol er stærkt korreleret hos ikke-menneskelige primater, og det er blevet påvist øgede hårkortisolkoncentrationer hos gravide kvinder. Derfor har hårkortisol potentialet til at fungere som et integreret mål for HPA-aktivitet over en længere periode på op til 3-6 måneder. På fødselsdagen vil hårstrå (~3 mm i diameter) blive opsamlet fra den bageste toppunkt på hovedet så tæt på hovedbunden som muligt som anbefalet af Society of Hair Testing (Soc of Hair testing, 1997). Baseret på en omtrentlig hårvæksthastighed på 1 cm pr. måned, antages det proksimale 3 cm lange hårsegment at afspejle den integrerede hormonsekretion i løbet af tre måneders perioden forud for prøvetagning. Hårprøven på 3 cm vil blive pakket ind i aluminiumsfolie til beskyttelse og opbevaret ved stuetemperatur. Hårprøver vil blive sendt til kortisolbestemmelse.
2. Moderblodopsamling (ikke en del af denne undersøgelse - blod vil blive opbevaret i biobanken): Der vil blive opsamlet maksimalt 20 ml for at give serum- og plasmaprøver. Blodprøverne vil blive opbevaret i 2-4 x 1,8 ml mærkede Cryotube-hætteglas efter én centrifugeringscyklus for serumprøver (2750 rpm x 10 min ved stuetemperatur) og opbevaret ved -80 °C og efter 10 blide vendinger for plasmaprøver og opbevaret ved -20 °C. Blodprøverne vil blive behandlet og frosset inden for 2-4 timer. Tidsintervallet mellem indsamling og frysning vil blive registreret for alle prøver.
3. Navlestrengsblodprøver: Når barnet er født og før placenta-separation, klemmes snoren fast, og navlestrengsblodprøver vil blive udtaget og fordelt i to rør til serum- og plasmaprøver efter samme procedure som beskrevet ovenfor. En tredje prøve vil blive opsamlet i et PAXgene-rør, forsigtigt vendt 10 gange og efterladt ved stuetemperatur i 5 timer i opretstående stilling. Rørene vil derefter blive opbevaret ved -80 °C efter 10-16 timer ved -20 °C. (PAXgene-prøven er ikke en del af denne undersøgelse - blod vil blive opbevaret i biobanken)
4. Placentaprøver (ikke en del af denne undersøgelse - prøver vil blive opbevaret i biobanken): Når moderkagen er leveret, vil modersiden blive dissekeret. Der vil blive taget to biopsier (ca. 1 cm³) for at undgå decidua-kontamination. Prøverne anbringes i Cryotube-hætteglas og opbevares straks ved -20 °C.
5. Nyfødte optagelser: Kort efter fødslen vil en neonatal specialiseret jordemoder indsamle spyt/mundprøver fra de nyfødte ved forsigtigt at gnide tandkødet på begge sider med svampen fra Oracollect-DNA-kittet (DNA Genotek, Canada) og opbevaret ved RT. Kliniske data, herunder kropsmålinger pH og APGAR-score, vil blive registreret.

Fase IV: Postnatale optagelser:

Efter opfølgning på kohorten rekrutteret i fase I og spejling af neuroudviklingsdyreundersøgelsen, vil vi udføre en longitudinel undersøgelse for at udforske muligheden for at måle biomarkører for PS-induceret epigenetisk omprogrammering.

1. Spædbørns udviklingsvurdering: I sidste fase af undersøgelsen vil moderen blive bedt om at udfylde et sidste spørgeskema for at vurdere fødselsdepression og amning, som hun vil modtage med posten. Mens den nuværende undersøgelse er fokuseret på prænatale begivenheder, er tidlig postnatal pleje stærkt påvirket af moderdepression og kan ændre den epigenetiske omprogrammering af spædbarnets hjerne. Derfor kan niveauet af moderens involvering i børnepasning i løbet af de første måneder direkte påvirke methyleringsstatus og vil blive registreret. Mødre vil blive spurgt om ernærings- og plejerutiner for at gennemføre vurderingen efter fødsel.
2. Spædbørns kognitive udvikling vil blive vurderet ved Bayley Scale III of Infant Development (BSID) ved 18 måneders alderen. BSID er sammensat af en række tests, der har til formål at evaluere kognitiv, motorisk og adfærdsmæssig udvikling hos spædbørn i alderen 0-3 år. Komponenterne Mental Development Index og Psychomotor Development Index har en gennemsnitlig score på 100 og en standardafvigelse på 15 (interval fra 55 til 145). Scorer mellem 70-84 indikerer mildt forsinket præstation, og score ≤ 69 indikerer signifikant forsinket præstation. Cirka 13,5 % af de testede spædbørn forventes at falde i disse kategorier. Mødres psykologiske lidelser under graviditeten var forbundet på en dosis-respons måde med BSID-score hos 2-årige børn. En specialiseret psykolog, som vil være blind med hensyn til kategorisering af maternel stress, vil administrere testene, som vil vare omkring 40 minutter.
3. En ny spytprøve vil blive indsamlet fra spædbørnene ved dette sidste besøg. Biomarkørerne vil blive kvantificeret fra spyt-DNA opnået fra de unge spædbørn. EKG vil blive målt til ANS vurdering. Methyleringsniveauer vil være korreleret med moderens stress, depression og angst, med spædbarnets kognitive udvikling og ANS kapacitet til at vurdere effektiviteten af ​​disse nye biomarkører.