胰岛移植中的 PolyTreg 免疫疗法

背景：

1 型糖尿病 (T1DM) 是一种自身免疫性疾病，其特征是胰腺 β (β) 细胞遭到破坏，导致胰岛素绝对缺乏。 迄今为止，临床胰岛移植是一种公认​​的治疗表现出频繁低血糖事件和严重血糖易感性患者的方式。 “埃德蒙顿协议”成为一个里程碑，它报告了 T1DM 患者移植后 C 肽的持续产生和高胰岛素依赖率。 由于胰岛移植中与同种异体免疫和自身免疫相关的挑战，需要适当的免疫抑制来防止急性和/或长期排斥反应。 目前在埃德蒙顿和许多其他国际胰岛移植中心使用的免疫抑制方案包括诱导、抗炎和维持治疗的组合，是胰岛移植成功率较高的原因。 尽管上述当前免疫抑制方案具有优势，但它未能提高单供者成功率 (15%)，大多数患者需要 2 次或更多次胰岛移植才能实现胰岛素依赖性。 在埃德蒙顿，临床试验旨在改善胰岛分离、植入和移植物的长期存活。 终生、高剂量免疫抑制的需要与大量副作用相关，并且在疾病过程的早期继续限制胰岛移植的应用。

调节性 T 细胞 (Treg) 是 CD4+ T 细胞的一小部分，其谱系分化和功能依赖于 FOXP3 转录因子。 通过抑制其他免疫细胞的激活和效应功能，Tregs 已成为自我耐受的主要贡献者。 Tregs 通过阻止不需要的免疫激活的启动和通过抑制正在进行的免疫反应来限制旁观者组织破坏来发挥作用。 有人提出，在广泛的移植物损伤之前输注 Tregs 可能会改善长期的移植物结果。 与广义免疫抑制方案不同，Treg 寿命长，可以以显性和抗原特异性方式发挥作用。 因此，Tregs 的治疗性输注有可能诱导长期供体特异性耐受，而不会阻碍移植患者对病原体和肿瘤的所需免疫反应。 在糖尿病方面，动物和人类研究都证明了 Tregs 在保护 β 细胞功能方面的核心作用。 输注 Tregs 可预防甚至逆转非肥胖糖尿病 (NOD) 小鼠的糖尿病。 在动物研究中已经证明，注入的 Tregs 在移植后不久迁移到同种异体移植物部位，并且可以在没有免疫抑制的情况下诱导稳定的胰岛移植物存活。 最近的人类研究报告了 T1DM 中 Tregs 的功能缺陷，这似乎是可逆的。

该临床试验是 Shapiro 博士在艾伯塔省埃德蒙顿的临床胰岛移植计划团队与 Drs. 的合作。 加州大学旧金山分校 (UCSF) 的 Tang 和 Bluestone 团队。 博士。 Tang 和 Bluestone 在开发 PolyTreg 技术方面发挥了重要作用，为在胰岛移植中 Treg 输注的临床试验中开展这一激动人心的合作提供了机会。 唐博士的团队专注于将免疫耐受机制的知识转化为治疗自身免疫性糖尿病和预防移植排斥的新疗法。 他们已经证明了 Tregs 在糖尿病小鼠模型中通过破坏完全分化的效应 T 细胞在多个水平上阻止组织破坏的功效。 Bluestone 博士在过去 25 年的研究重点是了解在自身免疫和器官移植中控制 T 细胞活化和免疫耐受的基本过程，包括特别强调 Tregs。 Bluestone 博士已经证明，PolyTreg 免疫疗法可以安全地用于新发 T1DM 的成年患者。 博士。 Tang和Bluestone在Treg分离生产和Treg免疫治疗方面具有丰富的经验，为该项目带来了强有力的技术和科学支持。 研究人员预计，此次合作将整合 Treg 免疫疗法和胰岛移植标准疗法的优势。 因此，本试验旨在研究将 Treg 输注纳入当前胰岛移植方案的安全性和有效性，以期在胰岛移植中找到更有效的替代当前免疫抑制方案的方案。

试验设计

根据现有的临床前和临床发现，研究人员假设 Tregs 可以防止移植胰岛的自身排斥和同种异体排斥，从而随着时间的推移改善 1 型糖尿病成人患者的胰岛素非依赖性耐久性和 C 肽功能。

主要目标

评估在胰岛移植患者中静脉输注体外选择和体外扩增的自体 polyTregs 的安全性和可行性。

主要结果测量/终点

不良事件

化验异常

毒性迹象

输液反应

感染相关并发症

次要目标

评估对内源性胰岛素分泌的影响：评估 Tregs 对胰岛移植患者 b 细胞功能的影响。

次要结果测量/终点

MMTT 期间的 C 肽反应

胰岛素的使用

糖化血红蛋白

探索目标

糖尿病免疫反应的替代标志物：测量 PolyTregs 对病理性自身免疫和同种异体免疫反应的影响。

探索性结果测量/终点多色流式细胞术 (MFC) 以评估对免疫特性的影响（输注前、输注后 1、2、4 周和 3、6 和 12 个月）

使用四聚体/或 ELISA 斑点测定（输注前以及输注后 3、6 和 12 个月）的自身抗体和自身反应性 T 细胞。

使用氘标记的输注 PolyTregs 在血液中的持久性和稳定性（输注后第 1、7、14、28、3 个月、6 个月和 12 个月）

该试验设计将允许确定以下具体目标：

证明 PolyTreg 免疫疗法在 1 型糖尿病患者胰岛移植中的安全性。

评估 PolyTreg 免疫疗法对接受胰岛移植患者的免疫学影响。

评估疗效并确定 PolyTreg 免疫疗法的最佳剂量。

研究人员提出，PolyTregs 将保护/抑制自身排斥和同种异体排斥，从而随着时间的推移改善胰岛素非依赖性持久性和 C 肽功能。 在这个试验中，研究者提出低水平的Tac/西罗莫司免疫抑制，研究者希望较少的早期暴露和长期暴露于高剂量他克莫司会导致β细胞功能明显改善，肾功能不全，机会性感染，移植后减少淋巴增生性疾病（PTLD）。 长期目标是为后续的 2 期疗效/安全性随机对照试验 (RCT) 开发和优化 PolyTreg 剂量。

研究程序

研究参与者将接受这项研究的筛选评估。 这将包括标准护理胰岛移植的筛查。 对于有生育潜力的女性，调查人员将要求通过验血确认她们没有怀孕。 如果患者符合条件并同意参加，他/她将根据研究者的判断被分配到对照组或治疗组。 两组之间的唯一区别是治疗组将接受 PolyTregs 输注，而对照组将不接受 PolyTregs 输注。 调查人员将从他/她的医疗记录中收集某些详细信息，包括年龄、性别、种族和医疗信息。 如果患者被分配到治疗组，将采集 400 mL 的血样用于 PolyTregs 制造，将在胰岛移植后第 6 周回输给患者。 研究人员将首先在对照组中招募两名参与者，如果前两名患者的手术看起来安全，他们将继续对两组进行进一步招募。

对于治疗组：

研究访问 1：胰岛前移植

在开始胰岛移植诱导治疗之前，将收集总共 400 毫升的全血，并立即运送到 UCSF 进行 PolyTregs 制造。

研究访问 2：胰岛移植

在这次访问中，参与者将根据阿尔伯塔大学医院的现行标准程序进行胰岛移植。 唯一的区别是使用较低剂量的他克莫司/西罗莫司进行免疫抑制。

研究访问 3：胰岛移植后 30 天±7 天

在访问 2 时，参与者将在阿尔伯塔大学医院 (UAH) 的临床调查部门 (CIU) 进行标准的护理代谢测试和血液样本采集。 这些测试评估移植胰岛的功能，包括精氨酸刺激的 c 肽测试和 Ensure 测试。 血液样本将在大约 90 分钟内以不同的时间间隔采集，并将测试：HbA1c、c 肽、胰岛素和葡萄糖。 调查人员还可能要求查看参与者的胰岛素使用/血糖记录。 此外，还将采集血液样本用于检测免疫概况、抗体和 T 细胞功能。

研究访问 4：PolyTreg 输注（胰岛移植后 6 周 ± 7 天）

参与者将在胰岛移植后第 6 周进入 UAH 进行 PolyTregs 输注。 他/她将在输液后留在 UAH 24 小时进行监测。 将收集血样以评估参与者在医院期间输注的 PolyTregs 的持久性和稳定性。

研究访问 5：PolyTregs 输注后 1 周±2 天

PolyTregs 输注后第 7 天，UAH 将采集血样，以评估输注 PolyTregs 的持久性和稳定性以及参与者的免疫概况。

研究访问 6：PolyTregs 输注后 2 周±4 天

PolyTregs 输注后第 14 天，UAH 将采集血样，以评估输注 PolyTregs 的持久性和稳定性以及参与者的免疫概况。

研究访问 7：PolyTregs 输注后 4 周±7 天

PolyTregs 输注后第 28 天，UAH 将采集血样，以评估输注 PolyTregs 的持久性和稳定性以及参与者的免疫概况。

研究访问 8：PolyTregs 输注后 6 周±7 天（胰岛移植后 12 周±7 天）

在这次访问中，参与者将在 UAH 的 CIU 进行标准的护理代谢测试和血液样本采集。 这些测试评估移植胰岛的功能，包括精氨酸刺激的 c 肽测试和 Ensure 测试。 血液样本将在大约 90 分钟内以不同的时间间隔采集，并将测试：HbA1c、c 肽、胰岛素和葡萄糖。 调查人员还可能要求查看参与者的胰岛素使用/血糖记录。

研究访问 9：PolyTregs 输注后 12 周±7 天

PolyTregs 输注后第 12 周，UAH 将采集血样，以评估输注 PolyTregs 的持久性和稳定性、免疫概况和抗体以及 T 细胞功能。

研究访问 10：PolyTregs 输注后 26 周±30 天

PolyTregs 输注后第 26 周，UAH 将采集血样，以评估输注 PolyTregs 的持久性和稳定性、免疫概况和抗体以及 T 细胞功能。

研究访问 11：PolyTregs 输注后 52 周±30 天

PolyTregs 输注后第 52 周，UAH 将采集血样，以评估输注 PolyTregs 的持久性和稳定性、免疫概况和抗体以及 T 细胞功能。 参与者还将在 UAH 的 CIU 进行标准的护理代谢测试和血液样本采集。 这些测试评估移植胰岛的功能，包括精氨酸刺激的 c 肽测试和 Ensure 测试。 血液样本将在大约 90 分钟内以不同的时间间隔采集，并将测试：HbA1c、c 肽、胰岛素和葡萄糖。 调查人员还可能要求查看参与者的胰岛素使用/血糖记录。

长期护理标准随访

在第 11 次研究访问之后，参与者将遵循胰岛移植的标准护理时间表。

对于对照组：

研究访问 1：胰岛移植

在这次访问中，参与者将根据阿尔伯塔大学医院的现行标准程序进行胰岛移植。 唯一的区别是使用较低剂量的他克莫司/西罗莫司进行免疫抑制。

研究访问 2：胰岛移植后 30 天（± 7 天）

在访问 2 时，参与者将在阿尔伯塔大学医院 (UAH) 的临床调查部门 (CIU) 进行标准的护理代谢测试和血液样本采集。 这些测试评估移植胰岛的功能，包括精氨酸刺激的 c 肽测试和 Ensure 测试。 血液样本将在大约 90 分钟内以不同的时间间隔采集，并将测试：HbA1c、c 肽、胰岛素和葡萄糖。 调查人员还可能要求查看患者的胰岛素使用/血糖记录。 此外，还将采集血液样本用于检测免疫概况、抗体和 T 细胞功能。

研究访视 3：胰岛移植后 7 周±7 天

在访问 3 时，将在 UAH 收集血样以评估参与者的免疫状况。

研究访问 4：胰岛移植后 8 周 ± 7 天

在第 4 次访问时，将在 UAH 采集血样以评估参与者的免疫状况。

研究访问 5：胰岛移植后 10 周±7 天

在第 5 次访问时，将在 UAH 采集血样以评估参与者的免疫状况。

研究访问 6：胰岛移植后 12 周±7 天

在这次访问中，参与者将在阿尔伯塔大学医院 (UAH) 的临床调查部门 (CIU) 进行标准的护理代谢测试和血液样本采集。 这些测试评估移植胰岛的功能，包括精氨酸刺激的 c 肽测试和 Ensure 测试。 血液样本将在大约 90 分钟内以不同的时间间隔采集，并将测试：HbA1c、c 肽、胰岛素和葡萄糖。 调查人员还可能要求查看患者的胰岛素使用/血糖记录。

研究访问 7：胰岛移植后 18 周±7 天

在第 7 次访问时，将在 UAH 采集血样，以评估参与者的免疫状况和抗体以及 T 细胞功能。

研究访问 8：胰岛移植后 32 周±30 天

在第 8 次访问时，将在 UAH 采集血样，以评估参与者的免疫概况、抗体和 T 细胞功能。

研究访问 9：胰岛移植后 58 周±30 天

在第 9 次访问时，将在 UAH 采集血样，以评估参与者的免疫状况和抗体以及 T 细胞功能。 研究参与者还将在 UAH 的 CIU 进行标准的护理代谢测试和血液样本采集。 这些测试评估移植胰岛的功能，包括精氨酸刺激的 c 肽测试和 Ensure 测试。 血液样本将在大约 90 分钟内以不同的时间间隔采集，并将测试：HbA1c、c 肽、胰岛素和葡萄糖。 调查人员还可能要求查看参与者的胰岛素使用/血糖记录。

长期护理标准随访

在第 9 次研究访问之后，参与者将遵循胰岛移植的标准护理时间表。