Immunothérapie PolyTreg dans la transplantation d'îlots

ARRIÈRE-PLAN:

Le diabète sucré de type 1 (T1DM) est une maladie auto-immune caractérisée par la destruction des cellules bêta (β) pancréatiques, entraînant une carence absolue en insuline. À ce jour, la transplantation d'îlots cliniques est une modalité acceptée pour traiter certains patients qui présentent des événements hypoglycémiques fréquents et une responsabilité glycémique sévère. Le "protocole d'Edmonton" est devenu une étape importante en signalant une production soutenue de peptide C et des taux élevés d'indépendance à l'insuline après la greffe chez des patients atteints de DT1. En raison des défis associés à l'allo- et à l'auto-immunité dans la transplantation d'îlots, une immunosuppression appropriée est nécessaire pour prévenir le rejet aigu et/ou à long terme. Les protocoles d'immunosuppression actuels utilisés à Edmonton et dans de nombreux autres sites internationaux pour la transplantation d'îlots consistent en une combinaison de traitement d'induction, anti-inflammatoire et d'entretien, ce qui explique les taux de réussite plus élevés de la transplantation d'îlots. Malgré les points forts du schéma d'immunosuppression actuel décrit ci-dessus, il n'a pas réussi à améliorer les taux de réussite d'un seul donneur (15 %), la majorité des patients ayant besoin de 2 greffes d'îlots ou plus pour atteindre l'indépendance à l'insuline. À Edmonton, des essais cliniques sont conçus pour améliorer l'isolement des îlots, la prise de greffe et la survie à long terme du greffon. La nécessité d'une immunosuppression à haute dose tout au long de la vie est associée à des effets secondaires substantiels et continue de limiter l'application de la transplantation d'îlots plus tôt au cours de la maladie.

Les cellules T régulatrices (Tregs) sont un petit sous-ensemble de cellules T CD4 + qui dépendent du facteur de transcription FOXP3 pour leur différenciation et leur fonction de lignée. Les Tregs sont devenus le principal contributeur à l'auto-tolérance en supprimant l'activation et la fonction effectrice d'autres cellules immunitaires. Les Tregs fonctionnent en empêchant l'initiation d'une activation immunitaire indésirable et en supprimant les réponses immunitaires en cours pour limiter la destruction des tissus témoins. Il a été suggéré que l'infusion de Tregs avant des dommages importants au greffon pourrait améliorer les résultats à long terme du greffon. Contrairement aux régimes immunosuppresseurs généralisés, les Tregs ont une longue durée de vie et peuvent fonctionner de manière dominante et spécifique à l'antigène. Ainsi, la perfusion thérapeutique de Tregs a le potentiel d'induire une tolérance à long terme spécifique au donneur sans entraver les réponses immunitaires souhaitées aux agents pathogènes et aux tumeurs chez les patients transplantés. En termes de diabète, les études animales et humaines démontrent le rôle central des Tregs dans la préservation de la fonction des cellules β. L'infusion de Tregs prévient et même inverse le diabète chez les souris diabétiques non obèses (NOD). Il a été démontré dans des études animales que les Tregs infusés migrent vers le site de l'allogreffe peu de temps après la transplantation et peuvent induire une survie stable de la greffe d'îlots sans immunosuppression. Des études humaines récentes rapportent des défauts fonctionnels des Tregs dans le DT1, qui semblent réversibles.

Cet essai clinique est une collaboration entre l'équipe du programme clinique de transplantation d'îlots du Dr Shapiro à Edmonton, en Alberta, avec les Drs. Les équipes de Tang et Bluestone à l'Université de Californie à San Francisco (UCSF). Drs. Tang et Bluestone ont joué un rôle déterminant dans le développement de la technologie PolyTreg, offrant une opportunité pour cette collaboration passionnante dans un essai clinique d'infusion de Treg dans la transplantation d'îlots. L'équipe du Dr Tang se concentre sur la traduction des connaissances sur les mécanismes de tolérance immunitaire en de nouvelles thérapies pour le traitement du diabète auto-immun et la prévention du rejet de greffe. Ils ont démontré l'efficacité des Tregs à plusieurs niveaux pour stopper la destruction des tissus dans des modèles de souris diabétiques en subvertissant les lymphocytes T effecteurs entièrement différenciés. Les recherches du Dr Bluestone au cours des 25 dernières années se sont concentrées sur la compréhension des processus de base qui contrôlent l'activation des lymphocytes T et la tolérance immunitaire dans l'auto-immunité et la transplantation d'organes, avec un accent particulier sur les Tregs. Le Dr Bluestone a démontré que l'immunothérapie PolyTreg peut être administrée en toute sécurité chez les patients adultes atteints d'un nouveau DT1. Drs. Tang et Bluestone ont une expérience abondante dans l'isolement et la production de Treg et l'immunothérapie de Treg, et apportent un solide soutien technique et scientifique à ce projet. Les chercheurs s'attendent à ce que cette collaboration intègre les atouts de l'immunothérapie Treg et du traitement standard de la greffe d'îlots. Par conséquent, cet essai consiste à étudier l'innocuité et l'efficacité de la perfusion de Treg incorporée dans le protocole actuel de transplantation d'îlots, dans l'espoir de trouver des alternatives plus efficaces au régime actuel d'immunosuppression dans la transplantation d'îlots.

CONCEPTION D'ESSAI

Sur la base des résultats précliniques et cliniques existants, les chercheurs ont émis l'hypothèse que les Tregs protègent à la fois de l'auto et de l'allorerejet des îlots transplantés, améliorant ainsi la durabilité indépendante de l'insuline et la fonction du peptide C au fil du temps chez les adultes atteints de DT1.

Objectif principal

Évaluer l'innocuité et la faisabilité de la perfusion intraveineuse de polyTregs autologues sélectionnés ex vivo et expansés ex vivo chez les patients transplantés d'îlots.

Mesure de résultat primaire/point final

Événements indésirables

Anomalies de laboratoire

Signes de toxicité

Réactions à la perfusion

Complications liées à l'infection

Objectif secondaire

Pour évaluer les effets sur la sécrétion d'insuline endogène : Évaluer l'effet des Tregs sur la fonction des cellules b chez les patients transplantés d'îlots.

Mesure de critère de jugement secondaire/point final

Réponse du peptide C pendant les MMTT

Utilisation d'insuline

HbA1C

Objectif exploratoire

Marqueurs de substitution de la réponse immunitaire du diabète : mesurez l'effet des PolyTregs sur les réponses pathologiques auto-immunes et allo-immunes.

Mesure de résultat exploratoire/point final Cytométrie en flux multicolore (MFC) pour évaluer l'effet sur le profil immunitaire (avant la perfusion, 1, 2, 4 semaines et 3, 6 et 12 mois après la perfusion)

Auto-anticorps et lymphocyte T autoréactif en utilisant un test tétramère/ou ELISA spot (pré-infusion et 3, 6 et 12 mois après l'infusion).

Persistance et stabilité des PolyTregs infusés dans le sang à l'aide du marquage au deutérium (jours 1, 7, 14, 28, 3 mois, 6 mois et 12 mois après la perfusion)

Ce plan d'essai permettra de déterminer les objectifs spécifiques suivants :

Démontrer l'innocuité de l'immunothérapie PolyTreg dans la transplantation d'îlots chez les patients diabétiques de type 1.

Évaluer l'impact immunologique de l'immunothérapie PolyTreg sur les patients recevant une greffe d'îlots.

Évaluer l'efficacité et établir la dose optimale pour l'immunothérapie PolyTreg.

Les chercheurs proposent que les PolyTregs protègent/atténuent à la fois l'auto et l'allo-rejet, améliorant ainsi la durabilité indépendante de l'insuline et la fonction du peptide C au fil du temps. Dans cet essai, les chercheurs proposent une immunosuppression Tac/Sirolimus de faible niveau, les chercheurs espèrent qu'une exposition moins précoce et à long terme au tacrolimus à forte dose conduira à une amélioration marquée de la fonction des cellules bêta, moins de dysfonctionnement rénal, moins d'infections opportunistes, moins de post-transplantation maladie lymphoproliférative (PTLD). L'objectif à long terme est de développer et d'optimiser le dosage de PolyTreg pour un essai contrôlé randomisé (ECR) d'efficacité/innocuité de phase 2 ultérieur.

PROCÉDURES D'ÉTUDE

Les participants à l'étude subiront une évaluation de dépistage pour cette étude. Cela comprendra le dépistage de la norme de soins pour la greffe d'îlots. Pour les femmes en âge de procréer, les enquêteurs demanderont de confirmer qu'elles ne sont pas enceintes par un test sanguin. Si le patient est éligible et a consenti à participer, il sera affecté soit au groupe témoin, soit au groupe de traitement, à la discrétion de l'investigateur. La seule différence entre les deux groupes sera que le groupe de traitement recevra une perfusion de PolyTregs et le groupe témoin ne recevra pas de perfusion de PolyTregs. Les enquêteurs recueilleront certains détails à partir de son dossier médical, notamment l'âge, le sexe, l'origine ethnique et les informations médicales. Si le patient est affecté au groupe de traitement, un échantillon de sang de 400 ml sera prélevé pour la fabrication de PolyTregs, qui sera réinjecté au patient à la semaine 6 après la greffe d'îlots. Les enquêteurs inscriront d'abord deux participants dans le groupe témoin et procéderont à une nouvelle inscription pour les deux groupes si la procédure semble sûre chez les deux premiers patients.

Pour le groupe de traitement :

Visite d'étude 1 : Pré-greffe d'îlots

Avant le début de la thérapie d'induction de greffe d'îlots, un total de 400 ml de sang total sera prélevé et immédiatement transporté à l'UCSF pour la fabrication de PolyTregs.

Visite d'étude 2 : Greffe d'îlots

Lors de cette visite, les participants subiront une greffe d'îlots conformément aux procédures standard en vigueur à l'hôpital de l'Université de l'Alberta. La seule différence sera l'utilisation de doses plus faibles de Tacrolimus/Sirolimus pour l'immunosuppression.

Visite d'étude 3 : 30 jours ± 7 jours après la greffe d'îlots

Lors de la deuxième visite, les participants subiront des tests métaboliques de qualité et des échantillons de sang seront prélevés à l'unité d'investigation clinique (UIC) de l'hôpital universitaire de l'Alberta (UAH). Ces tests évaluent la fonction des îlots transplantés et comprennent un test de peptide C stimulé par l'arginine et un test Ensure. Des échantillons de sang seront prélevés à différents intervalles de temps pendant environ 90 minutes et testeront : HbA1c, peptide C, insuline et glucose. Les enquêteurs peuvent également demander d'examiner les dossiers d'utilisation d'insuline/de glycémie des participants. De plus, un échantillon de sang sera prélevé pour tester les profils immunitaires, les anticorps et la fonction des lymphocytes T.

Visite d'étude 4 : Perfusion de PolyTreg (6 semaines ± 7 jours après la greffe d'îlots)

Le participant sera admis à l'UAH à la semaine 6 après la transplantation d'îlots pour la perfusion de PolyTregs. Il/elle restera à l'UAH pendant 24 heures pour un suivi après la perfusion. Un échantillon de sang sera prélevé pour évaluer la persistance et la stabilité des PolyTregs infusés pendant le séjour du participant à l'hôpital.

Visite d'étude 5 : 1 semaine ± 2 jours après la perfusion de PolyTregs

Un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH au jour 7 après la perfusion de PolyTregs pour évaluer la persistance et la stabilité des PolyTregs infusés et les profils immunitaires des participants.

Visite d'étude 6 : 2 semaines ± 4 jours après la perfusion de PolyTregs

Un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH au jour 14 après la perfusion de PolyTregs pour évaluer la persistance et la stabilité des PolyTregs infusés et les profils immunitaires des participants.

Visite d'étude 7 : 4 semaines ± 7 jours après la perfusion de PolyTregs

Un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH au jour 28 après la perfusion de PolyTregs pour évaluer la persistance et la stabilité des PolyTregs infusés et les profils immunitaires des participants.

Visite d'étude 8 : 6 semaines ± 7 jours après la perfusion de PolyTregs (12 semaines ± 7 jours après la greffe d'îlots)

Lors de cette visite, les participants subiront des tests métaboliques standard et des échantillons de sang seront prélevés au CIU de l'UAH. Ces tests évaluent la fonction des îlots transplantés et comprennent un test de peptide C stimulé par l'arginine et un test Ensure. Des échantillons de sang seront prélevés à différents intervalles de temps pendant environ 90 minutes et testeront : HbA1c, peptide C, insuline et glucose. Les enquêteurs peuvent également demander d'examiner les dossiers d'utilisation d'insuline/de glycémie des participants.

Visite d'étude 9 : 12 semaines ± 7 jours après la perfusion de PolyTregs

Un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH à la semaine 12 après la perfusion de PolyTregs pour évaluer la persistance et la stabilité des PolyTregs infusés, les profils immunitaires et les anticorps et la fonction des lymphocytes T.

Visite d'étude 10 : 26 semaines ± 30 jours après la perfusion de PolyTregs

Un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH à la semaine 26 après la perfusion de PolyTregs pour évaluer la persistance et la stabilité des PolyTregs infusés, les profils immunitaires et les anticorps et la fonction des lymphocytes T.

Visite d'étude 11 : 52 semaines ± 30 jours après la perfusion de PolyTregs

Un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH à la semaine 52 après la perfusion de PolyTregs pour évaluer la persistance et la stabilité des PolyTregs infusés, les profils immunitaires et les anticorps et la fonction des lymphocytes T. Les participants subiront également des tests métaboliques standard et des échantillons de sang seront prélevés au CIU de l'UAH. Ces tests évaluent la fonction des îlots transplantés et comprennent un test de peptide C stimulé par l'arginine et un test Ensure. Des échantillons de sang seront prélevés à différents intervalles de temps pendant environ 90 minutes et testeront : HbA1c, peptide C, insuline et glucose. Les enquêteurs peuvent également demander d'examiner les dossiers d'utilisation d'insuline/de glycémie des participants.

Suivi à long terme de la norme de soins

Après la visite d'étude 11, les participants seront suivis par le calendrier de soins standard pour la greffe d'îlots.

Pour le groupe de contrôle :

Visite d'étude 1 : Greffe d'îlots

Lors de cette visite, les participants subiront une greffe d'îlots conformément aux procédures standard en vigueur à l'hôpital de l'Université de l'Alberta. La seule différence sera l'utilisation de doses plus faibles de tacrolimus/sirolimus pour l'immunosuppression.

Visite d'étude 2 : 30 jours (± 7 jours) après la greffe d'îlots

Lors de la deuxième visite, les participants subiront des tests métaboliques de qualité et des échantillons de sang seront prélevés à l'unité d'investigation clinique (UIC) de l'hôpital universitaire de l'Alberta (UAH). Ces tests évaluent la fonction des îlots transplantés et comprennent un test de peptide C stimulé par l'arginine et un test Ensure. Des échantillons de sang seront prélevés à différents intervalles de temps pendant environ 90 minutes et testeront : HbA1c, peptide C, insuline et glucose. Les enquêteurs peuvent également demander d'examiner les dossiers d'utilisation d'insuline/de glycémie du patient. De plus, un échantillon de sang sera prélevé pour tester les profils immunitaires, les anticorps et la fonction des lymphocytes T.

Visite d'étude 3 : 7 semaines ± 7 jours après la greffe d'îlots

Lors de la visite 3, un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH pour évaluer les profils immunitaires des participants.

Visite d'étude 4 : 8 semaines ± 7 jours après la greffe d'îlots

Lors de la visite 4, un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH pour évaluer les profils immunitaires des participants.

Visite d'étude 5 : 10 semaines ± 7 jours après la greffe d'îlots

Lors de la visite 5, un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH pour évaluer les profils immunitaires des participants.

Visite d'étude 6 : 12 semaines ± 7 jours après la greffe d'îlots

Lors de cette visite, les participants subiront des tests métaboliques standard et des échantillons de sang seront prélevés à l'unité d'investigation clinique (UCI) de l'hôpital universitaire de l'Alberta (UAH). Ces tests évaluent la fonction des îlots transplantés et comprennent un test de peptide C stimulé par l'arginine et un test Ensure. Des échantillons de sang seront prélevés à différents intervalles de temps pendant environ 90 minutes et testeront : HbA1c, peptide C, insuline et glucose. Les enquêteurs peuvent également demander d'examiner les dossiers d'utilisation d'insuline/de glycémie du patient.

Visite d'étude 7 : 18 semaines ± 7 jours après la greffe d'îlots

Lors de la visite 7, un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH pour évaluer les profils immunitaires des participants, les anticorps et la fonction des lymphocytes T.

Visite d'étude 8 : 32 semaines ± 30 jours après la greffe d'îlots

Lors de la visite 8, un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH pour évaluer les profils immunitaires des participants, les anticorps et la fonction des lymphocytes T.

Visite d'étude 9 : 58 semaines ± 30 jours après la greffe d'îlots

Lors de la visite 9, un échantillon de sang sera prélevé à l'UAH pour évaluer les profils immunitaires des participants, les anticorps et la fonction des lymphocytes T. Les participants à l'étude subiront également des tests métaboliques standard et des échantillons de sang seront prélevés au CIU de l'UAH. Ces tests évaluent la fonction des îlots transplantés et comprennent un test de peptide C stimulé par l'arginine et un test Ensure. Des échantillons de sang seront prélevés à différents intervalles de temps pendant environ 90 minutes et testeront : HbA1c, peptide C, insuline et glucose. Les enquêteurs peuvent également demander d'examiner les dossiers d'utilisation d'insuline/de glycémie des participants.

Suivi à long terme de la norme de soins

Après la visite d'étude 9, les participants seront suivis par le calendrier de soins standard pour la greffe d'îlots.