芦丁和维生素C对血液透析患者氧化应激影响的评价

芦丁和维生素C对血液透析患者氧化应激影响的评价

为部分完成药学硕士学位（临床药学）而提交的协议

经过：

萨米亚·穆罕默德·奥马尔

在监督下

Nagwa Ali Sabri 博士教授兼临床药学系主任 Ain shams 大学药学院

副教授。 Prof. Tamer Wahid El Said 艾因夏姆斯大学医学院肾病学副教授

Radwa Maher Abd-el-Kader-el-Borolossy 博士艾因夏姆斯大学药学院临床药学讲师

介绍

发病率和死亡率是目前全世界医学家在慢性肾病患者中遇到的最重要的问题。 (Kazi et al, 2008) 氧化应激与蛋白质、脂质和 DNA 的氧化损伤有关，并且在慢性肾病患者的疾病进展中发挥重要作用，在氧化应激中，活性氧 (ROS) 的产生超过抗氧化剂能力，同样在血液透析中，由于低相容性透析膜处理激活中性粒细胞和单核细胞（吞噬细胞），氧化应激增加，也由于抗氧化能力降低，其中活性超氧化物歧化酶，谷胱甘肽过氧化物酶和过氧化物酶2酶除了维生素 C、E 和 A 等低水平的非酶抗氧化剂外，还减少了。（Gwozdzinski K 等人，2021 年）ESRD 患者的几种合并症与以高水平促氧化剂为特征的氧化应激有关，如血脂异常、血管钙化、高血压、糖尿病 (DM) 和老年。 (Mondaresi 等人，2015 年）营养不良状况和伴随透析的慢性炎症也会引发活性氧的产生。（handelman 等人，2001 年）每次血液透析后 ROS 水平增加 14 倍。（Nguyen 等人，1985 年；陈等，1998；杨等人，2006）

肾脏合成抗氧化酶，包括谷胱甘肽过氧化物酶，它的衰竭导致这些酶的水平降低，结果促氧化剂增加。（凯利， Rothwell，2020）自由基对脂肪酸的氧化称为脂质过氧化，它会导致组织损伤。（Fatani et al, 2016) 脂质过氧化产生的丙二醛是一种亲核剂，具有攻击和改变氨基酸和蛋白质巯基部分功能的能力。（Slatter 等人，2000 年）几项研究证实，血液透析患者的死亡率增加与氧化应激有关，而氧化应激与不饱和脂肪酸氧化终产物 MDA 水平升高有关。（Juretic 等人，2001 年）抗氧化剂是由身体（酶促和非酶促）产生的内源性抗氧化剂和存在于食物和补充剂中的外源性抗氧化剂。（Liakopoulos 等人，2019）维生素 B、C、D 和 E、辅酶 Q10、左旋肉碱、a-硫辛酸、姜黄素、绿茶、类黄酮、多酚、omega-3 多不饱和脂肪酸、他汀类药物、微量元素和 N-乙酰半胱氨酸已被研究作为外源性抗氧化剂，用于减少血液透析患者的氧化应激。 (Liakopoulos 等人，2019 年）通过使用抗氧化剂治疗减少血液透析患者的氧化应激可能是挽救生命、避免死亡斗争和提高生活质量的有用方法 19。（Navarro 等人，2019）数据库中的许多临床研究证实，补充草药抗氧化剂的患者透析并发症有所改善。（Asgharpour M, Alirezaei A , 2012) 最近，人们越来越关注芦丁的抗氧化作用。（ Moretti E 等人，2012）

黄酮类化合物最近被科学团体认可为一类独特的治疗分子，因为它们具有多种药理特性，芦丁，被称为维生素 p 或 rotoside 已被发现具有许多药理作用。（ Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017）芦丁是一种黄酮醇，存在于西番莲、荞麦、茶和苹果中。（ Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) 芸香苷称为 rotoside、quercetin-3-rutinoside，槐糖苷为柑橘类黄酮苷。（ Kreft S, Knapp M, Kreft I, 1999) 芦丁是一种植物化学物质，具有许多治疗特性。 (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) 一句古老的谚语“一日一苹果，医生远离我”似乎是对的，因为苹果中发现的芦丁具有许多生物活性。 （Ganeshpurkar A，Saluja AK，2017 年）需要对芦丁进行广泛研究，以证明其在人体中的有效安全性，从而获得其作为治疗补充剂的益处。 ( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) 芦丁被发现对细胞因子的分泌产生相当大的影响。 (Gandhi GR et al, 2020) 细胞因子由免疫细胞分泌，长期疾病期间的炎症会导致细胞因子介导的器官功能障碍和组织损伤，例如糖尿病、癌症、类风湿性关节炎。 (Gautam R et al, 2006) 芦丁对慢性代谢疾病的免疫调节和抗炎作用支持芦丁可用于治疗此类疾病及其并发症的观点。 (Gandhi GR et al, 2020) 使用芦丁可以降低血糖并改善血脂水平，芦丁还可以防止肝脏、血清和心脏中 ALT、AST 和 LDL 的活性发生变化，芦丁被发现具有以下能力：降低肝脏和心脏的 TG 水平并提高糖原水平。 （Gandhi GR 等人，2020 年）

令人惊奇的是，芦丁抗氧化的稳定性被发现高于其糖原，槲皮素。 (Suzuki et al,2005) 芦丁经常与维生素 C 结合使用，因为它对维生素 C 的吸收至关重要，并且作为抗氧化剂。 (Bus ze Wski et al,1993) 人体不能合成类黄酮，饮食可以提供芦丁，芦丁不仅可以延长产品的保质期，还可以增加产品的营养价值。 (Chua LS, 2013) 除了毒素外，血液透析会去除血液中的营养物质，例如抗坏血酸 (AA)，并且血液透析患者由于饮食限制而缺乏抗坏血酸，这会引发已经由尿毒症引起的氧化应激和炎症，最终以心血管事件和死亡率。（Chaghouri P et al, 2021) ROS 被 AA 减少，特别是超氧阴离子自由基，然后抗坏血酸被氧化。 (Bendich A et al, 1986) AA 酸与 ROS 竞争性反应，在它们氧化细胞成分之前清除它们，AA 被氧化，保护脂质膜、蛋白质和 DNA 免受损害。 （Berratta M 等人，2020 年）白细胞中的抗坏血酸浓度比血浆中高 50 到 100。 (Berratta M et al, 2020) 目前还没有关于芦丁作为抗氧化剂对血液透析患者氧化应激的影响的研究。

关于AA的抗氧化和抗炎功效，必须要看维生素C对血液透析患者的作用。 (Chaghouri P et al, 2021) 依靠两者的抗氧化和抗炎作用，芦丁和维生素 C 被多种体外和体内研究证实，选择芦丁和维生素 C 在血液透析患者中​​进行研究。

研究目的 本研究的目的是评估芦丁和维生素 C 对选定的氧化应激和炎症标志物的影响。

患者和方法

1. 设计：

   前瞻性、干预性、开放标签、随机对照临床试验将在接受定期血液透析的 ESRD 成人患者中进行。

2. 设置：

该研究将在艾因夏姆斯大学医院的肾脏病和透析科进行

总共招募 105 名患者并分为 3 组： - 第 1 组：（Ruta C 组）35 名患者将服用 2 片 60 mg 芦丁和 160 mg 维生素 C，每天 3 次，持续 4 个月除了他们的标准疗法。

第 2 组：（维生素 C 组）35 名患者除了标准疗法外，每天两次服用 500 毫克维生素 C，持续 4 个月。

第三组：对照组，35名患者仅接受标准治疗。

基线特征：将在基线时从所有患者收集以下数据

1. 年龄、性别、体重、ESRD 持续时间和血液透析合并症。
2. 透析时间、BUN、Cr（mg/d L）、白蛋白（mg/d L）、Hb（g m%）、肾功能检查、肝功能检查、血糖水平、TG、总胆固醇水平、LDL-C、HLD -C。

监测参数：

1. 将监测患者的副作用。
2. 将在基线和研究结束时从所有组中抽取血样，然后将血清以 3000 rpm 离心，在 4°C 下离心 10 分钟，然后在 -80 C 下冷冻保存，用于生化评估血浆丙二醛， C-反应蛋白、GSH-PX、TNF-α 和 ESR。 该分析将通过酶联免疫吸附测定技术 (ELISA) 进行

伦理考虑：

• 该研究将根据赫尔辛基宣言进行。
• 药学院研究伦理委员会的批准 - Ain-Shams 大学 - 药学院研究伦理委员会机构审查委员会。
• 在参加研究之前，将征得所有患者的知情同意书，如果他们愿意，患者无需退出研究。

统计分析：

将使用 SPSS 软件（社会科学统计软件包）进行统计分析。 连续变量将表示为均值 + 标准差 (SD) 或中位数 + 四分位距 (IQR)。 将根据结果数据是参数还是非参数来选择统计测试。 低于 0.05 的 P 值被认为具有统计学意义，低于 0.001 的 P 值被认为具有高度显着性。

样本量计算：

样本量由 GPower v.3.1.9.4 1 计算得出。 根据 Connelly（2008 年）的说法，文献表明，试点研究样本应为 3 个同等大小的样本组的 10%，且 alpha 为 0.05，样本大小为 966 名参与者。 对于我们的试点研究，所需的样本量为 97 名参与者。 考虑辍学率并预测更大的家长研究 2。

因此，对于一项全面的研究，期望 0.10 的小效应量，达到 80% 的效力拒绝原假设，在组大小相等的情况下，我们决定招募总共 105 名参与者，平均分配给3组（每组35人）。

F 测试 - 方差分析：固定效应、综合、单向分析：先验：计算所需样本量输入：效应大小 f = 0.10 α 错误概率 = 0.05 功效（1-β 错误概率）= 0.80 组数 = 3 输出：非中心参数 λ = 9.6900000 临界 F = 3.0050418 分子 df = 2 分母 df = 966 总样本量 = 969 实际功效 = 0.8011010