Evaluering af effekten af ​​rutin og vitamin C på oxidativ stress hos hæmodialysepatienter

Evaluering af virkningen af ​​rutin og vitamin C på oxidativ stress hos hæmodialysepatienter

En protokol indsendt til delvis opfyldelse af kandidatgraden i farmaceutiske videnskaber (klinisk farmaci)

Ved:

Samia mohamed omar

Under opsyn af

Prof. Dr. Nagwa Ali Sabri Professor og leder af afdelingen for klinisk farmaci Det farmaceutiske fakultet Ain shams universitet

Assoc. Prof. Tamer Wahid El Said Lektor i nefrologi Det medicinske fakultet Ain shams universitet

Dr. Radwa Maher Abd-el-Kader-el-Borolossy Underviser i klinisk farmaci Det farmaceutiske fakultet Ain Shams University

Introduktion

Sygelighed og dødelighed er de vigtigste problemer, som medicinske forskere i verden støder på hos patienter med kronisk nyresygdom. (Kazi et al, 2008) Oxidativt stress er forbundet med oxidativ skade på proteiner, lipider og DNA og spiller en vigtig rolle i sygdomsprogression hos patienter med kronisk nyresygdom, i oxidativt stress overstiger produktionen af ​​reaktive oxygenarter (ROS) antioxidanten kapacitet, også i hæmodialyse, øget oxidativ stress på grund af lav-kompatibilitet dialyse membran behandlinger, som aktiverer neutrofiler og monocytter (fagocytiske celler), og også på grund af et fald i antioxidant kapacitet, hvor aktiviteten superoxid dismutase, glutathion peroxidase og peroxiredoxin2 enzymer er reduceret ud over lave niveauer af ikke-enzymatiske antioxidanter som vitamin C, E og A. (Gwozdzinski K et al, 2021) Adskillige komorbiditeter hos ESRD-patienter er relateret til oxidativt stress karakteriseret ved høje niveauer af pro-oxidanter, såsom dyslipidæmi , vaskulær forkalkning, hypertension, diabetes mellitus(DM) og alderdom.(Mondaresi et al, 2015) Underernæringsstatus og kronisk inflammation ledsager dialyse, udløser også produktion af reaktive iltarter.(handelman et al, 2001) 14 gange stigning i ROS-niveauer induceres efter hver hæmodialysesession.(Nguyen et al., 1985; Chen et al., 1998; Yang et al., 2006)

Nyren syntetiserer antioxidantenzymer, herunder glutathionperoxidaser, og dens svigt fører til reducerede niveauer af disse enzymer og som følge heraf øges pro-oxidanter.(Kelly, Rothwell, 2020) Frie radikalers oxidation af fedtsyrer kaldes lipidperoxidation og er ansvarlig for vævsskade.(Fatani et al, 2016) Malondialdehyd genereret fra lipidperoxidation er et nukleofilt middel, der har evnen til at angribe og ændre funktioner af aminosyrer og sulfhydryldel af proteiner.(Slatter et al, 2000) Adskillige undersøgelser har godkendt, at øget dødelighed hos hæmodialysepatienter var forbundet med oxidativt stress i forbindelse med øgede niveauer af MDA, slutprodukt af umættet fedtsyreoxidation.(Juretic et al, 2001) Antioxidanter er endogene antioxidanter produceret af kroppen (enzymatiske og ikke-enzymatiske) og eksogene antioxidanter til stede i fødevarer og kosttilskud.(Liakopoulos et al, 2019) Vitaminer B, C, D og E, coenzym Q10, L-carnitin, a-liponsyre, curcumin, grøn te, flavonoider, polyfenoler, omega-3 flerumættede fedtsyrer, statiner, sporstoffer og N-acetyl cystein er blevet undersøgt som eksogene antioxidanter til at reducere oxidativt stress hos hæmodialysepatienter.(Liakopoulos et al, 2019) Reduktion af oxidativ stress hos hæmodialysepatienter ved at bruge antioxidantbehandlinger kan være en nyttig tilgang for at redde liv, undgå dødskamp og forbedre deres livskvalitet19.(Navarro et al, 2019) Mange kliniske undersøgelser, der findes i databaser, har bekræftet forbedrede komplikationer ledsaget af dialyse hos patienter suppleret med urteantioxidanter.(Asgharpour M, Alirezaei A, 2012) På det seneste er opmærksomheden stigende mod antioxidantvirkningen af ​​rutin.( Moretti et al., 2012)

Flavonoider er for nylig blevet anerkendt af en videnskabelig gruppe som en unik klasse af terapeutiske molekyler på grund af deres forskellige farmakologiske egenskaber, rutin, kendt som vitamin p eller rotosid, er blevet opdaget for mange af farmakologiske virkninger.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin er en flavonol, der findes i passionsblomst, boghvede, te og æble.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin kaldet rotosid, quercetin-3-rutinosid, og sophorin er acitrus flavonoid glycosid.( Kreft S, Knapp M, Kreft I, 1999) Rutin er et fytokemikalie med mange terapeutiske egenskaber. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Et gammelt ordsprog et æble om dagen, holder lægen væk, ser ud til at være rigtigt, da rutin, der findes i æbler, har mange biologiske aktiviteter. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin er nødvendig for at blive undersøgt grundigt for at demonstrere effektiv sikkerhedsprofil hos mennesker for at få dets fordele som terapeutisk supplement. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin som behandling viste sig at producere betydelig indvirkning på sekretion af cytokiner. (Gandhi GR et al, 2020) Cytokiner udskilles af immunceller, og betændelse under langvarige sygdomme forårsager cytokin-medieret organdysfunktion og vævsskade, såsom ved diabetes mellitus, cancer, leddegigt. (Gautam R et al, 2006) De immunmodulerende og antiinflammatoriske virkninger af rutin på kroniske stofskiftesygdomme understøtter ideen om, at rutin kan bruges til behandling af sådanne disse lidelser og deres komplikationer. (Gandhi GR et al, 2020) Blodsukker reduceret og lipidprofil forbedret ved brug af rutin, også aktiviteter af ALT, AST og LDL i leveren, serum og hjerteforandringer forhindres af rutin, rutin viste sig at have evnen til at reducere lever- og hjerteniveauer af TG og Forøger glykogenniveauet. (Gandhi GR et al, 2020)

Utroligt nok blev stabiliteten af ​​rutin-aganist-oxidation fundet at være større end dens aglycogen, quercetin. (Suzuki et al, 2005) Rutin bruges ofte kombineret med C-vitamin, fordi det er essentielt for C-vitaminoptagelse og som antioxidant. (Bus ze Wski et al, 1993) Menneskekroppen kan ikke syntetisere flavonoider, og kosten kan levere rutin, og rutin er ikke kun til for at forlænge produkternes holdbarhed, men øger også produkternes ernæringsmæssige værdi. (Chua LS, 2013) Ud over toksiner fjerner hæmodialyse næringsstoffer fra blodet, såsom ascorbinsyre (AA), og også hæmodialysepatienter har mangel på ascorbinsyre på grund af diætrestriktioner, og dette udløser oxidativt stress og inflammation, der allerede er induceret af uræmi, der slutter med kardiovaskulære hændelser og dødelighed.(Chaghouri P et al, 2021) ROS reduceret med AA, især superoxidanionradikal, og til gengæld oxideret ascorbinsyre. (Bendich A et al, 1986) AA-syre reagerer kompetitivt med ROS, fjerner dem, før de oxiderer cellekomponenterne, og AA oxideres, hvilket beskytter lipidmembraner, proteiner og DNA mod beskadigelse. (Berratta M et al, 2020) I leukocytter når ascorbinsyrekoncentrationerne 50-100- højere end i plasma. (Berratta M et al, 2020) Der er ikke udført undersøgelser om effekten af ​​rutin som antioxidant på det oxidative stress hos hæmodialysepatienter.

Med hensyn til antioxidant og anti-inflammatorisk effektivitet af AA, er det vigtigt at se C-vitamin effekt på hæmodialyse patienter. (Chaghouri P et al, 2021) Baseret på den antioxidante og antiinflammatoriske virkning af begge, er rutin og c-vitamin bekræftet af en række undersøgelser in vitro og in vivo, rutin og C-vitamin udvalgt til at blive undersøgt hos hæmodialysepatienter.

Formålet med undersøgelsen Formålet med denne undersøgelse er at evaluere effekten af ​​rutin og C-vitamin på udvalgte oxidativt stress og inflammatoriske markører.

Patient og metoder

1. Design:

   Prospektive, interventionelle, Open label, randomiserede kontrollerede kliniske forsøg vil blive udført på voksne patienter med ESRD i regelmæssig hæmodialyse.

2. Indstillinger:

Undersøgelsen vil blive udført på nefrologi- og dialyseenhed i ain shams universitetshospital

I alt 105 patienter vil blive rekrutteret og opdelt i 3 grupper: - Gruppe 1: (Ruta C-gruppe) 35 patienter vil tage en dosis på 2 tabletter rutin 60 mg i kombination med C-vitamin 160 mg tre gange dagligt i 4 måneder i ud over deres standardterapi.

Gruppe 2: (C-vitamingruppe) 35 patienter vil tage en dosis på 500 mg C-vitamin to gange dagligt i 4 måneder ud over deres standardbehandling.

Gruppe 3: Kontrolgruppe, 35 patienter vil kun tage standardbehandlingen.

Baseline-karakteristika: Følgende data vil blive indsamlet fra alle patienter ved baseline

1. Alder, køn, vægt, varighed af ESRD og hæmodialysekomorbiditeter.
2. Dialysevarighed, BUN, Cr (mg/d L), Albumin (mg/d L), Hb (g m%), nyrefunktionstest, leverfunktionstest, blodsukkerniveau, TG, totalt kolesterolniveau, LDL-C, HLD -C.

Overvågningsparametre:

1. Patienterne vil blive overvåget for bivirkninger.
2. blodprøven vil blive udtaget ved baseline og ved afslutningen af ​​undersøgelsen fra alle grupper, derefter vil sera blive centrifugeret ved 3000 rpm, i 10 minutter ved 4°C og derefter opbevaret frosset ved -80 C til den biokemiske evaluering plasmamalondialdehyd, C-reaktivt protein, GSH-PX, TNF-α og ESR. Denne analyse vil blive udført ved hjælp af enzym-linked immunosorbent assay-teknik (ELISA)

Etiske overvejelser:

• Undersøgelsen vil blive udført i henhold til Helsinki-erklæringen.
• Godkendelse af Forskningsetiske Udvalg ved Det Farmaceutiske Fakultet - Ain-Shams Universitet - Det Farmaceutiske Fakultetets forskningsetiske komité institutionelle bedømmelsesudvalg.
• Et informeret samtykke vil blive taget fra alle patienter før tilmelding til undersøgelsen, uden at patienterne er forpligtet til at trække sig fra undersøgelsen, hvis de ønsker det.

Statistisk analyse:

Statistiske analyser vil blive udført ved hjælp af SPSS-softwaren (Statistical Package for the Social Sciences). Kontinuerlige variable vil blive repræsenteret som middel + standardafvigelse (SD) eller som median + interkvartilområde (IQR). Statistiske tests vil blive valgt baseret på enten de resulterende data vil være parametriske eller ikke-parametriske. P-værdier lavere end 0,05 anses for statistisk signifikante, og P-værdier lavere end 0,001 betragtes som meget signifikante.

Beregning af prøvestørrelse:

Prøvestørrelsen blev beregnet af GPower v.3.1.9.4 1. Ifølge Connelly (2008) tyder litteraturen på, at en pilotundersøgelse bør være 10 % af stikprøven 3 lige store grupper og en alfa på 0,05, stikprøvestørrelsen ville være 966 deltagere. For vores pilotundersøgelse ville den nødvendige stikprøvestørrelse være 97 deltagere. For at tage højde for frafald og fremskrevet til den større forældreundersøgelse 2.

Derfor besluttede vi at rekruttere i alt 105 deltagere, ligeligt fordelt på, til et fuldskalastudie, der forventede en lille effektstørrelse på 0,10, for at nå en styrke på 80 % for at forkaste nulhypotesen, med lighed af gruppestørrelser. 3 grupper (35 deltagere i hver gruppe).

F-tests - ANOVA: Faste effekter, omnibus, envejsanalyse: A priori: Beregn påkrævet prøvestørrelse Input: Effektstørrelse f = 0,10 α err prob = 0,05 Effekt (1-β err prob) = 0,80 Antal grupper = 3 Output : Ikke-centralitetsparameter λ = 9,6900000 Kritisk F = 3,0050418 Tæller df = 2 Nævner df = 966 Samlet stikprøvestørrelse = 969 Faktisk effekt = 0,8011010