Evaluación del Efecto de la Rutina y la Vitamina C sobre el Estrés Oxidativo en Pacientes en Hemodiálisis

Evaluación del Efecto de la Rutina y la Vitamina C sobre el Estrés Oxidativo en Pacientes en Hemodiálisis

Presentado Protocolo para Cumplimiento Parcial de Maestría en Ciencias Farmacéuticas (Farmacia Clínica)

Por:

Samia mohamed omar

Bajo supervisión de

Prof. Dr. Nagwa Ali Sabri Profesor y jefe del departamento de farmacia clínica Facultad de farmacia Ain shams university

Asoc. Prof. Tamer Wahid El Said Profesor asociado de Nefrología Facultad de medicina Universidad Ain Shams

Dra. Radwa Maher Abd-el-Kader-el-Borolossy Profesora de Farmacia Clínica Facultad de Farmacia Universidad Ain Shams

Introducción

La morbilidad y la mortalidad son los problemas importantes más actuales que enfrentan los científicos médicos en el mundo en pacientes con enfermedad renal crónica. (Kazi et al, 2008) El estrés oxidativo está asociado con el daño oxidativo a las proteínas, los lípidos y el ADN y desempeña un papel importante en la progresión de la enfermedad en pacientes con enfermedad renal crónica. En el estrés oxidativo, la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS) supera el antioxidante. capacidad, también en hemodiálisis, el estrés oxidativo aumentó debido a tratamientos con membranas de diálisis de baja compatibilidad, que activan neutrófilos y monocitos (células fagocíticas), y también debido a una disminución en la capacidad antioxidante en la que la actividad de las enzimas superóxido dismutasa, glutatión peroxidasa y peroxirredoxina2 se reduce además de los bajos niveles de antioxidantes no enzimáticos como las vitaminas C, E y A. (Gwozdzinski K et al, 2021) Varias comorbilidades en pacientes con ESRD están relacionadas con el estrés oxidativo caracterizado por altos niveles de prooxidantes, como la dislipidemia , calcificación vascular, hipertensión arterial, diabetes mellitus (DM) y vejez.(Mondaresi et al, 2015) El estado de desnutrición y la inflamación crónica que acompañan a la diálisis también desencadenan la producción de especies reactivas de oxígeno. (Handelman et al, 2001) se induce un aumento de 14 veces en los niveles de ROS después de cada sesión de hemodiálisis. (Nguyen et al, 1985; Chen et al., 1998; Yang y otros, 2006)

El riñón sintetiza las enzimas antioxidantes, incluidas las glutatión peroxidasas, y su falla conduce a niveles reducidos de estas enzimas y, como consecuencia, aumentan los prooxidantes. (Kelly, Rothwell, 2020) La oxidación de ácidos grasos por radicales libres se denomina peroxidación lipídica y es responsable del daño tisular. (Fatani et al, 2016) El malondialdehído generado a partir de la peroxidación de lípidos es un agente nucleofílico que tiene la capacidad de atacar y cambiar las funciones de los aminoácidos y la fracción sulfhidrilo de las proteínas. (Slatter et al, 2000) Varios estudios han aprobado que la mayor tasa de mortalidad en pacientes en hemodiálisis se asoció con el estrés oxidativo en relación con mayores niveles de MDA, producto final de la oxidación de ácidos grasos insaturados. (Juretic et al, 2001) Los antioxidantes son antioxidantes endógenos producidos por el cuerpo (enzimáticos y no enzimáticos) y antioxidantes exógenos presentes en alimentos y suplementos. (Liakopoulos et al, 2019) Vitaminas B, C, D y E, coenzima Q10, L-carnitina, ácido a-lipoico, curcumina, té verde, flavonoides, polifenoles, ácidos grasos poliinsaturados omega-3, estatinas, oligoelementos y N-acetilo cisteína se han estudiado como antioxidantes exógenos para reducir el estrés oxidativo en pacientes en hemodiálisis. (Liakopoulos et al, 2019) La reducción del estrés oxidativo en pacientes en hemodiálisis mediante el uso de tratamientos antioxidantes puede ser un enfoque útil para salvar vidas, evitar la lucha contra la muerte y mejorar su calidad de vida19. (Navarro et al, 2019) Muchos estudios clínicos presentes en bases de datos han confirmado mejores complicaciones acompañadas de diálisis en pacientes suplementados con antioxidantes a base de hierbas. (Asgharpour M, Alirezaei A, 2012) Últimamente, está aumentando la atención hacia el efecto antioxidante de la rutina.( Moretti E et al, 2012)

Los flavonoides han sido reconocidos recientemente por un grupo científico como una clase única de moléculas terapéuticas debido a sus diversas propiedades farmacológicas. La rutina, conocida como vitamina p o rotósido, ha sido descubierta por muchos de sus efectos farmacológicos.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) La rutina es un flavonol que se encuentra en la flor de la pasión, el trigo sarraceno, el té y la manzana.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) La rutina se llama rotósido, quercetina-3-rutinosido y la soforina es un glucósido flavonoide ácido.( Kreft S, Knapp M, Kreft I, 1999) La rutina es un fitoquímico que tiene muchas propiedades terapéuticas. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Un dicho antiguo que una manzana al día mantiene alejado al médico parece tener razón, ya que la rutina, que se encuentra en las manzanas, tiene muchas actividades biológicas. ( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) La rutina debe estudiarse ampliamente para demostrar un perfil de seguridad efectivo en humanos para obtener sus beneficios como suplemento terapéutico. ( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Se descubrió que la rutina como tratamiento produce un impacto considerable en la secreción de citocinas. (Gandhi GR et al, 2020) Las citocinas son secretadas por las células inmunitarias, y la inflamación durante enfermedades a largo plazo provoca disfunción orgánica mediada por citocinas y daño tisular, como en la diabetes mellitus, el cáncer y la artritis reumatoide. (Gautam R et al, 2006) Los efectos inmunomoduladores y antiinflamatorios de la rutina en las enfermedades metabólicas crónicas respaldan la idea de que la rutina puede usarse para tratar estos trastornos y sus complicaciones. (Gandhi GR et al, 2020) Se redujo la glucosa en sangre y se mejoró el perfil de lípidos mediante el uso de rutina, también se previenen las actividades de ALT, AST y LDL en el hígado, el suero y los cambios cardíacos mediante la rutina, se descubrió que la rutina tiene la capacidad de reduce los niveles hepáticos y cardíacos de TG y mejora el nivel de glucógeno. (Gandhi GR et al, 2020)

Sorprendentemente, se encontró que la estabilidad de la oxidación del aganista de la rutina era mayor que la de su aglucógeno, la quercetina. (Suzuki et al, 2005) La rutina se usa frecuentemente combinada con vitamina C porque es esencial para la absorción de vitamina C y como antioxidante. (Bus ze Wski et al, 1993) El cuerpo humano no puede sintetizar flavonoides y la dieta puede suministrar rutina, y la rutina no solo prolonga la vida útil de los productos, sino que también aumenta el valor nutricional de los productos. (Chua LS, 2013) Además de las toxinas, la hemodiálisis elimina nutrientes de la sangre, como el ácido ascórbico (AA) y también los pacientes de hemodiálisis tienen deficiencia de ácido ascórbico debido a las restricciones dietéticas y esto desencadena el estrés oxidativo y la inflamación ya inducida por la uremia que termina con eventos cardiovasculares y mortalidad.(Chaghouri P et al, 2021) ROS reducido por AA, particularmente el radical anión superóxido y, a su vez, oxidado por ácido ascórbico. (Bendich A et al, 1986) El ácido AA reacciona competitivamente con las ROS, eliminándolas antes de que oxiden los componentes celulares, y el AA se oxida, protegiendo las membranas lipídicas, las proteínas y el ADN del daño. (Berratta M et al, 2020) En los leucocitos, las concentraciones de ácido ascórbico alcanzan entre 50 y 100 veces más que en el plasma. (Berratta M et al, 2020) No existen estudios realizados sobre el efecto de la rutina como antioxidante sobre el estrés oxidativo en pacientes en hemodiálisis.

En cuanto a la eficacia antioxidante y antiinflamatoria del AA, es fundamental ver el efecto de la vitamina C en los pacientes en hemodiálisis. (Chaghouri P et al, 2021) Basándose en el efecto antioxidante y antiinflamatorio de la rutina y la vitamina C, confirmado por una variedad de estudios in vitro e in vivo, la rutina y la vitamina C se seleccionan para ser estudiadas en pacientes en hemodiálisis.

Objetivo del estudio El objetivo de este estudio es evaluar el efecto de la rutina y la vitamina C en marcadores inflamatorios y de estrés oxidativo seleccionados.

Paciente y métodos

1. Diseño:

   Se llevará a cabo un ensayo clínico prospectivo, intervencionista, abierto, aleatorizado y controlado en pacientes adultos con ESRD en hemodiálisis regular.

2. Ajustes:

El estudio se llevará a cabo en la unidad de nefrología y diálisis del hospital universitario ain shams.

Se reclutarán un total de 105 pacientes y se dividirán en 3 grupos: - Grupo 1: (grupo Ruta C) 35 pacientes tomarán una dosis de 2 comprimidos de rutina 60 mg en combinación con vitamina C 160 mg tres veces al día durante 4 meses en además de su terapia estándar.

Grupo 2: (grupo de vitamina C) 35 pacientes tomarán una dosis de 500 mg de vitamina C dos veces al día durante 4 meses además de su terapia estándar.

Grupo 3: Grupo de control, 35 pacientes tomarán solo la terapia estándar.

Características iniciales: Los siguientes datos se recopilarán de todos los pacientes al inicio

1. Edad, sexo, peso, duración de la IRCT y comorbilidades de la hemodiálisis.
2. Duración de la diálisis, BUN, Cr (mg/d L), Albúmina (mg/d L), Hb (g m%), prueba de función renal, prueba de función hepática, nivel de glucosa en sangre, TG, nivel de colesterol total, LDL-C, HLD -C.

Parámetros de seguimiento:

1. Los pacientes serán monitoreados por efectos secundarios.
2. Se extraerá una muestra de sangre al inicio y al final del estudio de todos los grupos, luego los sueros se centrifugarán a 3000 rpm, durante 10 minutos a 4 ° C, y luego se mantendrán congelados a -80 C para la evaluación bioquímica del plasma malondialdehído. Proteína C Reactiva, GSH-PX, TNF-α y ESR. Este análisis se realizará mediante la técnica de ensayo inmunoabsorbente ligado a enzimas (ELISA)

Consideración ética:

• El estudio se realizará de acuerdo con la Declaración de Helsinki.
• Aprobación del comité de ética de la investigación de la facultad de farmacia - universidad de Ain-Shams - junta de revisión institucional del comité de ética de la investigación de la facultad de farmacia.
• Se tomará un consentimiento informado de todos los pacientes antes de la inscripción en el estudio sin ninguna obligación por parte de los pacientes de retirarse del estudio si así lo desean.

Análisis estadístico:

Los análisis estadísticos se realizarán utilizando el software SPSS (paquete estadístico para las ciencias sociales). Las variables continuas se representarán como media + desviación estándar (DE) o como mediana + rango intercuartílico (RIC). Las pruebas estadísticas se elegirán en función de que los datos resultantes sean paramétricos o no paramétricos. Los valores de P inferiores a 0,05 se consideran estadísticamente significativos y los valores de P inferiores a 0,001 se consideran altamente significativos.

Cálculo del tamaño de la muestra:

El tamaño de la muestra fue calculado por GPower v.3.1.9.4 1. Según Connelly (2008), la literatura sugiere que la muestra de un estudio piloto debe ser el 10% de la muestra 3 grupos de igual tamaño y un alfa de 0,05, el tamaño de la muestra sería de 966 participantes. Para nuestro estudio piloto, el tamaño de muestra requerido sería de 97 participantes. Para dar cuenta de los abandonos y proyectados para el estudio principal más grande 2.

Por lo tanto, para un estudio a gran escala, esperando un tamaño de efecto pequeño de 0.10, para alcanzar un poder del 80% para rechazar la hipótesis nula, con igualdad de tamaños de grupo, decidimos reclutar un total de 105 participantes, divididos equitativamente entre los 3 grupos (35 participantes en cada grupo).

Pruebas F - ANOVA: Efectos fijos, ómnibus, unidireccional Análisis: A priori: Calcular el tamaño de muestra requerido Entrada: Tamaño del efecto f = 0,10 α err prob = 0,05 Potencia (1-β err prob) = 0,80 Número de grupos = 3 Salida : Parámetro de no centralidad λ = 9,6900000 F crítica = 3,0050418 GL del numerador = 2 GL del denominador = 966 Tamaño total de la muestra = 969 Potencia real = 0,8011010