Utvärdering av effekten av rutin och vitamin C på oxidativ stress hos hemodialyspatienter

Utvärdering av effekten av rutin och vitamin C på oxidativ stress hos hemodialyspatienter

Ett protokoll inlämnat för partiell uppfyllelse av magisterexamen i farmaceutiska vetenskaper (klinisk farmaci)

Förbi:

Samia mohamed omar

Under överinseende av

Prof. Dr. Nagwa Ali Sabri Professor och chef för klinisk farmaciavdelning Farmaceutiska fakulteten Ain shams universitet

Assoc. Prof. Tamer Wahid El Said Docent i nefrologi Medicinska fakulteten Ain shams universitet

Dr. Radwa Maher Abd-el-Kader-el-Borolossy Lektor i klinisk farmaci Farmaceutiska fakulteten Ain Shams University

Introduktion

Sjuklighet och dödlighet är de mest aktuella problemen som medicinska forskare möter i världen hos patienter med kronisk njursjukdom. (Kazi et al, 2008) Oxidativ stress är associerad med oxidativ skada på proteiner, lipider och DNA och spelar en viktig roll i sjukdomsprogression hos patienter med kronisk njursjukdom, vid oxidativ stress överstiger produktionen av reaktiva syrearter (ROS) antioxidanten kapacitet, även vid hemodialys, ökade oxidativ stress på grund av lågkompatibla dialysmembranbehandlingar, som aktiverar neutrofiler och monocyter (fagocytiska celler), och även på grund av en minskning av antioxidantkapaciteten där aktiviteten superoxiddismutas, glutationperoxidas och peroxiredoxin2 enzymer reduceras utöver låga nivåer av icke-enzymatiska antioxidanter som vitamin C, E och A. (Gwozdzinski K et al, 2021) Flera komorbiditeter hos ESRD-patienter är relaterade till oxidativ stress som kännetecknas av höga nivåer av prooxidanter, som dyslipidemi , vaskulär förkalkning, hypertoni, diabetes mellitus(DM) och hög ålder.(Mondaresi et al, 2015) Undernäringsstatus och kronisk inflammation åtföljer dialys utlöser också produktion av reaktiva syreämnen.(handelman et al, 2001) 14 gånger ökning av ROS-nivåer induceras efter varje hemodialyssession.(Nguyen et al, 1985; Chen et al, 1998; Yang et al, 2006)

Njuren syntetiserar antioxidantenzymerna, inklusive glutationperoxidaser och dess misslyckande leder till minskade nivåer av dessa enzymer och som en följd av detta ökar prooxidanter.(Kelly, Rothwell, 2020) Oxidationen av fettsyror av fria radikaler kallas lipidperoxidation och den är ansvarig för vävnadsskador.(Fatani et al, 2016) Malondialdehyd som genereras från lipidperoxidation är ett nukleofilt medel som har förmågan att attackera och ändra funktioner hos aminosyror och sulfhydryldelen av proteiner.(Slatter et al, 2000) Flera studier har godkänt att ökad dödlighet hos hemodialyspatienter var associerad med oxidativ stress i samband med ökade nivåer av MDA, slutprodukt av omättad fettsyraoxidation.(Juretic et al, 2001) Antioxidanter är endogena antioxidanter som produceras av kroppen (enzymatiska och icke-enzymatiska) och exogena antioxidanter som finns i mat och kosttillskott.(Liakopoulos et al, 2019) Vitaminer B, C, D och E, koenzym Q10, L-karnitin, a-liponsyra, curcumin, grönt te, flavonoider, polyfenoler, omega-3 fleromättade fettsyror, statiner, spårämnen och N-acetyl cystein har studerats som exogena antioxidanter för att minska oxidativ stress hos hemodialyspatienter.(Liakopoulos et al, 2019) Att minska oxidativ stress hos hemodialyspatienter genom att använda antioxidantbehandlingar kan vara användbart för att rädda liv, undvika dödskamp och förbättra deras livskvalitet19.(Navarro et al, 2019) Många kliniska studier som finns i databaser har bekräftat förbättrade komplikationer åtföljd dialys hos patienter som kompletterats med växtbaserade antioxidanter.(Asgharpour M, Alirezaei A, 2012) På senare tid har uppmärksamheten ökat mot antioxidanteffekten av rutin.( Moretti et al, 2012)

Flavonoider har nyligen erkänts av en vetenskaplig grupp som en unik klass av terapeutiska molekyler på grund av deras olika farmakologiska egenskaper, rutin, känt som vitamin p eller rotosid, har upptäckts för många av farmakologiska effekter.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin är en flavonol som finns i passionsblomma, bovete, te och äpple.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin kallas rotosid, quercetin-3-rutinosid och soforin är acitrusflavonoidglykosid.( Kreft S, Knapp M, Kreft I, 1999) Rutin är en fytokemikalie som har många terapeutiska egenskaper. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Ett gammalt talesätt ett äpple om dagen, håller läkare borta verkar vara rätt, eftersom rutin, som finns i äpplen, har många biologiska aktiviteter. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin måste studeras omfattande för att visa effektiv säkerhetsprofil hos människor för att få dess fördelar som terapeutiskt tillskott. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutin som behandling visade sig ge avsevärd effekt på utsöndring av cytokiner. (Gandhi GR et al, 2020) Cytokiner utsöndras av immunceller och inflammation under långvariga sjukdomar orsakar cytokinförmedlad organdysfunktion och vävnadsskada, såsom vid diabetes mellitus, cancer, reumatoid artrit. (Gautam R et al, 2006) De immunmodulerande och antiinflammatoriska effekterna av rutin på kroniska metabola sjukdomar stödjer tanken att rutin kan användas för att behandla sådana dessa störningar och deras komplikationer. (Gandhi GR et al, 2020) Blodsocker minskat och lipidprofilen förbättras genom att använda rutin, även aktiviteter av ALT, AST och LDL i levern, serum och hjärtförändringar förhindras av rutin, rutin visade sig ha förmågan att minska lever- och hjärtnivåer av TG och Förhöjer glykogennivån. (Gandhi GR et al, 2020)

Förvånansvärt nog visade sig stabiliteten för rutin-aganistoxidation vara större än dess aglykogen, quercetin. (Suzuki et al, 2005) Rutin används ofta i kombination med C-vitamin eftersom det är viktigt för C-vitaminabsorption och som antioxidationsmedel. (Bus ze Wski et al, 1993) Människokroppen kan inte syntetisera flavonoider och kosten kan tillföra rutin, och rutin är inte bara för att förlänga produkternas hållbarhet, utan ökar också produkternas näringsvärde. (Chua LS, 2013) Förutom toxiner tar hemodialys bort näringsämnen från blodet, såsom askorbinsyra (AA) och även hemodialyspatienter har brist på askorbinsyra på grund av kostrestriktioner och detta utlöser oxidativ stress och inflammation som redan inducerats av uremi som slutar med kardiovaskulära händelser och dödlighet.(Chaghouri P et al, 2021) ROS reducerat med AA, särskilt superoxidanjonradikal, och i sin tur askorbinsyra oxiderad. (Bendich A et al, 1986) AA-syra reagerar konkurrenskraftigt med ROS och tar bort dem innan de oxiderar cellkomponenterna, och AA oxideras, vilket skyddar lipidmembran, proteiner och DNA från skador. (Berratta M et al, 2020) I leukocyter når askorbinsyrakoncentrationerna 50-100- högre än i plasma. (Berratta M et al, 2020) Det finns inga studier utförda om effekten av rutin som antioxidant på den oxidativa stressen hos hemodialyspatienter.

När det gäller antioxidant och antiinflammatorisk effektivitet hos AA är det viktigt att se C-vitamineffekt på hemodialyspatienter. (Chaghouri P et al, 2021) Rutin och C-vitamin som bekräftats av en mängd olika studier in vitro och in vivo har valts ut för att studeras hos patienter med hemodialys, beroende på den antioxidanta och antiinflammatoriska effekten av båda.

Syfte med studien Syftet med denna studie är att utvärdera effekten av rutin och vitamin C på utvalda oxidativ stress och inflammatoriska markörer.

Patient och metoder

1. Design:

   Prospektiv, interventionell, öppen, randomiserad kontrollerad klinisk prövning kommer att genomföras på vuxna patienter med ESRD på regelbunden hemodialys.

2. Inställningar:

Studien kommer att genomföras på nefrologi- och dialysavdelningen i ain shams universitetssjukhus

Totalt 105 patienter kommer att rekryteras och delas in i 3 grupper: - Grupp 1: (Ruta C-grupp) 35 patienter kommer att ta en dos av 2 tabletter rutin 60 mg i kombination med vitamin C 160 mg tre gånger dagligen i 4 månader i utöver deras standardterapi.

Grupp 2: (C-vitamingrupp) 35 patienter kommer att ta en dos på 500 mg C-vitamin två gånger dagligen i 4 månader utöver sin standardbehandling.

Grupp 3: Kontrollgrupp, 35 patienter tar endast standardterapin.

Baslinjeegenskaper: Följande data kommer att samlas in från alla patienter vid baslinjen

1. Ålder, kön, vikt, varaktighet av ESRD och komorbiditeter vid hemodialys.
2. Dialyslängd, BUN, Cr (mg/d L), Albumin (mg/d L), Hb (g m%), njurfunktionstest, leverfunktionstest, blodsockernivå, TG, total kolesterolnivå, LDL-C, HLD -C.

Övervakningsparametrar:

1. Patienterna kommer att övervakas för biverkningar.
2. blodprov kommer att tas ut vid baslinjen och i slutet av studien från alla grupper, sedan kommer serumet att centrifugeras vid 3000 rpm, i 10 minuter vid 4°C och sedan frysas vid -80 C för den biokemiska utvärderingen av plasmamalondialdehyd, C-reaktivt protein, GSH-PX, TNF-α och ESR. Denna analys kommer att utföras med enzymkopplad immunosorbentanalysteknik (ELISA)

Etiskt övervägande:

• Studien kommer att utföras enligt Helsingforsdeklarationen.
• Godkännande av forskningsetiska kommittén för farmaceutiska fakulteten - Ain-Shams universitet - farmaceutiska fakultetens forskningsetiska kommitté institutionell granskningsnämnd.
• Ett informerat samtycke kommer att tas från alla patienter innan de registreras i studien utan att patienterna är skyldiga att dra sig ur studien om de vill.

Statistisk analys:

Statistiska analyser kommer att göras med programvaran SPSS (Statistical Package for the Social Sciences). Kontinuerliga variabler kommer att representeras som medelvärde + standardavvikelse (SD) eller som median + interkvartilintervall (IQR). Statistiska tester kommer att väljas baserat på antingen de resulterande data kommer att vara parametriska eller icke-parametriska. P-värden lägre än 0,05 anses vara statistiskt signifikanta och P-värden lägre än 0,001 anses vara mycket signifikanta.

Provstorleksberäkning:

Provstorleken beräknades av GPower v.3.1.9.4 1. Enligt Connelly (2008) föreslår litteraturen att ett urval av pilotstudier bör vara 10 % av urvalet 3 lika stora grupper och ett alfa på 0,05, urvalsstorleken skulle vara 966 deltagare. För vår pilotstudie skulle den nödvändiga urvalsstorleken vara 97 deltagare. För att ta hänsyn till avhopp och beräknad för den större föräldrastudien 2.

Därför, för en fullskalig studie, som förväntade oss en liten effektstorlek på 0,10, för att nå en styrka på 80 % för att förkasta nollhypotesen, med lika gruppstorlekar, bestämde vi oss för att rekrytera totalt 105 deltagare, lika fördelade på 3 grupper (35 deltagare i varje grupp).

F-tester - ANOVA: Fasta effekter, omnibus, envägsanalys: A priori: Beräkna erforderlig provstorlek Indata: Effektstorlek f = 0,10 α err prob = 0,05 Effekt (1-β err prob) = 0,80 Antal grupper = 3 Output : Icke-centralitetsparameter λ = 9,6900000 Kritisk F = 3,0050418 Täljare df = 2 Nämnare df = 966 Total urvalsstorlek = 969 Faktisk effekt = 0,8011010