Rutiinin ja C-vitamiinin vaikutuksen arviointi hemodialyysipotilaiden oksidatiiviseen stressiin

Rutiinin ja C-vitamiinin vaikutuksen arviointi hemodialyysipotilaiden oksidatiiviseen stressiin

Pöytäkirja, joka on jätetty farmaseuttisten tieteiden maisterin tutkinnon osittaiseen suorittamiseen (kliininen apteekki)

Tekijä:

Samia mohamed omar

valvonnassa

Prof. Dr. Nagwa Ali Sabri Professori ja kliinisen farmasian osaston johtaja Farmasian tiedekunta Ain shams University

Assoc. Prof. Tamer Wahid El Said Nefrologian apulaisprofessori Lääketieteellinen tiedekunta Ain shams University

Dr. Radwa Maher Abd-el-Kader-el-Borolossy Kliinisen farmasian lehtori Farmasian tiedekunta Ain Shams University

Johdanto

Sairastuvuus ja kuolleisuus ovat ajankohtaisimpia tärkeimpiä ongelmia, joita lääketieteen tutkijat kohtaavat maailmassa kroonisissa munuaissairauspotilaissa. (Kazi et al, 2008) Oksidatiivinen stressi liittyy proteiinien, lipidien ja DNA:n oksidatiiviseen vaurioon ja sillä on tärkeä rooli kroonisen munuaissairauspotilaiden taudin etenemisessä, oksidatiivisessa stressissä reaktiivisten happilajien (ROS) tuotanto ylittää antioksidantin määrän. kapasiteetti, myös hemodialyysissä, oksidatiivinen stressi lisääntyi heikosti yhteensopivien dialyysikalvohoitojen takia, mikä aktivoi neutrofiilejä ja monosyyttejä (fagosyyttisoluja), ja myös antioksidanttikapasiteetin heikkenemisestä, jossa aktiivisuus superoksididismutaasi-, glutationiperoksidaasi- ja peroksiredoksiini2-entsyymeillä ei-entsymaattisten antioksidanttien, kuten C-, E- ja A-vitamiinien alhaisten pitoisuuksien lisäksi. (Gwozdzinski K et al, 2021) Useat ESRD-potilaiden samanaikaiset sairaudet liittyvät oksidatiiviseen stressiin, jolle on ominaista korkea prooksidanttitaso, kuten dyslipidemia , verisuonten kalkkeutuminen, verenpainetauti, diabetes mellitus (DM) ja vanhuus. (Mondaresi) et al, 2015) Aliravitsemustila ja dialyysihoitoon liittyvä krooninen tulehdus laukaisevat myös reaktiivisten happilajien tuotannon. (handelman) et al, 2001) 14-kertainen nousu ROS-tasoissa indusoituu jokaisen hemodialyysikerran jälkeen. (Nguyen) et ai., 1985; Chen et ai, 1998; Yang et al, 2006)

Munuaiset syntetisoivat antioksidanttisia entsyymejä, mukaan lukien glutationiperoksidaaseja, ja sen toimintahäiriö johtaa näiden entsyymien pitoisuuksien laskuun, minkä seurauksena prooksidantit lisääntyvät. (Kelly, Rothwell, 2020) Rasvahappojen hapettumista vapaiden radikaalien vaikutuksesta kutsutaan lipidiperoksidaatioksi ja se on vastuussa kudosvaurioista. (Fatani) et al, 2016) Lipidiperoksidaatiosta syntyvä malondialdehydi on nukleofiilinen aine, jolla on kyky hyökätä ja muuttaa aminohappojen ja proteiinien sulfhydryyliosan toimintoja. (Slatter) et al, 2000) Useat tutkimukset ovat vahvistaneet, että hemodialyysipotilaiden lisääntynyt kuolleisuus oli yhteydessä oksidatiiviseen stressiin suhteessa MDA:n lisääntymiseen, joka on tyydyttymättömien rasvahappojen hapettumisen lopputuote. (Juretic) et al, 2001) Antioksidantit ovat kehon tuottamia endogeenisiä antioksidantteja (entsymaattisia ja ei-entsymaattisia) ja eksogeenisiä antioksidantteja, joita on ruoassa ja ravintolisissä. (Liakopoulos) et al, 2019) B-, C-, D- ja E-vitamiinit, koentsyymi Q10, L-karnitiini, a-lipoiinihappo, kurkumiini, vihreä tee, flavonoidit, polyfenolit, omega-3-monityydyttymättömät rasvahapot, statiinit, hivenaineet ja N-asetyyli kysteiiniä on tutkittu eksogeenisinä antioksidantteina oksidatiivisen stressin vähentämiseksi hemodialyysipotilailla. (Liakopoulos) et al, 2019) Oksidatiivisen stressin vähentäminen hemodialyysipotilailla käyttämällä antioksidanttihoitoja voi olla hyödyllinen tapa pelastaa henkiä, välttää kuolemantaistelua ja parantaa heidän elämänlaatuaan19.(Navarro) et al, 2019) Monet tietokantoissa olevat kliiniset tutkimukset ovat vahvistaneet, että dialyysihoitoon liittyvät komplikaatiot paranevat potilailla, joita on täydennetty kasviperäisillä antioksidanteilla (Asgharpour). M, Alirezaei A, 2012) Viime aikoina on kiinnitetty enemmän huomiota rutiinin antioksidanttiseen vaikutukseen. Moretti et al, 2012)

Tieteellinen ryhmä on äskettäin tunnustanut flavonoidit ainutlaatuiseksi terapeuttisten molekyylien ryhmäksi niiden erilaisten farmakologisten ominaisuuksien vuoksi. Rutiinilla, joka tunnetaan nimellä p-vitamiini tai rotosidi, on löydetty monia farmakologisia vaikutuksia. Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutiini on flavonoli, jota löytyy passionkukasta, tattarista, teestä ja omenasta. Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutiinia kutsutaan rotosidiksi, kversetiini-3-rutinosidiksi ja soforiini on asitrus-flavonoidiglykosidi. Kreft S, Knapp M, Kreft I, 1999) Rutiini on fytokemikaali, jolla on monia terapeuttisia ominaisuuksia. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Vanha sanonta omena päivässä, pitää lääkärin loitolla näyttää olevan oikea, sillä omenoista löytyvällä rutiinilla on monia biologisia toimintoja. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutiinia on tutkittava laajasti, jotta voidaan osoittaa tehokas turvallisuusprofiili ihmisillä, jotta se hyötyisi terapeuttisena lisäaineena. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Rutiinin hoitona havaittiin olevan huomattava vaikutus sytokiinien erittymiseen. (Gandhi GR et al, 2020) Immuunisolut erittävät sytokiinejä, ja pitkäkestoisten sairauksien tulehdus aiheuttaa sytokiinivälitteisiä elinten toimintahäiriöitä ja kudosvaurioita, kuten diabetes mellituksessa, syövässä, nivelreumassa. (Gautam R et al, 2006) Rutiinin immunomoduloivat ja anti-inflammatoriset vaikutukset kroonisissa aineenvaihduntasairauksissa tukevat ajatusta, että rutiinia voidaan käyttää tällaisten häiriöiden ja niiden komplikaatioiden hoidossa. (Gandhi GR et al, 2020) Rutiinin käyttö alensi verensokeria ja paransi lipidiprofiilia, myös ALT:n, AST:n ja LDL:n toimintaa maksassa, seerumissa ja sydämessä muutoksia estetään rutiinilla, rutiinilla havaittiin olevan kyky alentaa maksan ja sydämen TG-tasoja ja parantaa glykogeenitasoa. (Gandhi GR et al, 2020)

Hämmästyttävää kyllä, rutiinin hapettumisen stabiilisuuden havaittiin olevan suurempi kuin sen aglykogeenin, kversetiinin. (Suzuki et al, 2005) Rutiinia käytetään usein yhdessä C-vitamiinin kanssa, koska se on välttämätön C-vitamiinin imeytymiselle ja hapettumisenestoaineena. (Bus ze Wski et al, 1993) Ihmiskeho ei pysty syntetisoimaan flavonoideja ja rutiini voi saada rutiinia, ja rutiini ei ole vain tuotteiden säilyvyyden pidentämiseen, vaan se myös lisää tuotteiden ravintoarvoa. (Chua LS, 2013) Hemodialyysi poistaa verestä myrkkyjen lisäksi ravintoaineita, kuten askorbiinihappoa (AA) ja myös hemodialyysipotilailla on askorbiinihapon puute ruokavalion rajoitusten vuoksi ja tämä laukaisee oksidatiivisen stressin ja tulehduksen, joka on jo aiheuttanut uremian, joka päättyy sydän- ja verisuonitapahtumat ja kuolleisuus. (Chaghouri P et al, 2021) AA:lla pelkistetty ROS, erityisesti superoksidianioniradikaali, ja vuorostaan ​​askorbiinihappo hapetettu. (Bendich A et al, 1986) AA-happo reagoi kilpailevasti ROS:n kanssa, poistaen ne ennen kuin ne hapettavat solukomponentit, ja AA hapettuu, mikä suojaa lipidikalvoja, proteiineja ja DNA:ta vaurioilta. (Berratta M et al, 2020) Leukosyyteissä askorbiinihappopitoisuudet saavuttavat 50-100 korkeammat kuin plasmassa. (Berratta M et al, 2020) Rutiinin vaikutuksesta antioksidanttina hemodialyysipotilaiden oksidatiiviseen stressiin ei ole tehty tutkimuksia.

Mitä tulee AA:n antioksidanttiseen ja anti-inflammatoriseen tehokkuuteen, on tärkeää nähdä C-vitamiinin vaikutus hemodialyysipotilailla. (Chaghouri P et al, 2021) Rutiinin ja c-vitamiinin antioksidanttiseen ja anti-inflammatoriseen vaikutukseen tukeutuen, jotka on vahvistettu useissa tutkimuksissa in vitro ja in vivo, rutiini ja C-vitamiini valitaan tutkittavaksi hemodialyysipotilailla.

Tutkimuksen tarkoitus Tämän tutkimuksen tavoitteena on arvioida rutiinin ja C-vitamiinin vaikutusta valittuihin oksidatiivisiin stressi- ja tulehdusmarkkereihin.

Potilas ja menetelmät

1. Design:

   Prospektiivinen, interventio, avoin, satunnaistettu, kontrolloitu kliininen tutkimus suoritetaan aikuispotilailla, joilla on ESRD ja jotka saavat säännöllistä hemodialyysihoitoa.

2. Asetukset:

Tutkimus tehdään ain shamsin yliopistollisen sairaalan nefrologian ja dialyysin yksikössä

Yhteensä 105 potilasta rekrytoidaan ja jaetaan 3 ryhmään: - Ryhmä 1: (Ruta C ryhmä) 35 potilasta ottaa 2 tabletin rutiinia 60 mg yhdessä 160 mg C-vitamiinin kanssa kolme kertaa päivässä 4 kuukauden ajan. tavanomaisen terapiansa lisäksi.

Ryhmä 2: (C-vitamiiniryhmä) 35 potilasta saa 500 mg:n annoksen C-vitamiinia kahdesti päivässä 4 kuukauden ajan tavallisen hoitonsa lisäksi.

Ryhmä 3: Kontrolliryhmä, 35 potilasta saa vain standardihoitoa.

Lähtötilanteen ominaisuudet: Seuraavat tiedot kerätään kaikilta potilailta lähtötilanteessa

1. Ikä, sukupuoli, paino, ESRD:n kesto ja hemodialyysin samanaikaiset sairaudet.
2. Dialyysin kesto, BUN, Cr (mg/d L), albumiini (mg/d L), Hb (g m%), munuaisten toimintakoe, maksan toimintakoe, verensokeri, TG, kokonaiskolesterolitaso, LDL-C, HLD -C.

Valvontaparametrit:

1. Potilaita seurataan sivuvaikutusten varalta.
2. verinäyte otetaan lähtötilanteessa ja tutkimuksen lopussa kaikista ryhmistä, sitten seerumit sentrifugoidaan nopeudella 3000 rpm, 10 minuuttia 4 °C:ssa ja säilytetään sitten jäädytettynä -80 C:ssa biokemiallista arviointia varten plasman malondialdehydi, C-reaktiivinen proteiini, GSH-PX, TNF-α ja ESR. Tämä analyysi suoritetaan entsyymikytkentäisellä immunosorbenttimääritystekniikalla (ELISA)

Eettiset huomiot:

• Tutkimus suoritetaan Helsingin julistuksen mukaisesti.
• Farmasian tiedekunnan tutkimuseettisen komitean hyväksyminen - Ain-Shamsin yliopisto - farmasian tiedekunnan tutkimuseettisen komitean instituutioiden arviointilautakunta.
• Kaikilta potilailta hankitaan tietoinen suostumus ennen tutkimukseen ilmoittautumista ilman, että potilaalla on velvollisuus vetäytyä tutkimuksesta, jos he haluavat.

Tilastollinen analyysi:

Tilastolliset analyysit tehdään SPSS-ohjelmistolla (Statistical Package for the Social Sciences). Jatkuvat muuttujat esitetään muodossa keskiarvo + keskihajonta (SD) tai mediaani + interkvartiilialue (IQR). Tilastolliset testit valitaan sen perusteella, että tuloksena saadut tiedot ovat parametrisia tai ei-parametrisia. P-arvoja, jotka ovat pienempiä kuin 0,05, pidetään tilastollisesti merkittävinä ja P-arvoja, jotka ovat pienempiä kuin 0,001, pidetään erittäin merkittävinä.

Näytteen kokolaskenta:

Otoskoko laskettiin GPower v.3.1.9.4 1:llä. Connellyn (2008) mukaan kirjallisuus ehdottaa, että pilottitutkimuksen otoksen tulisi olla 10 % otoksen 3 samankokoisesta ryhmästä ja alfa 0,05, otoskoko olisi 966 osallistujaa. Pilottitutkimuksessamme vaadittava otoskoko olisi 97 osallistujaa. Keskeyttäneiden ja laajemman vanhemman tutkimuksen ennusteiden huomioon ottaminen 2.

Siksi, jotta täyden mittakaavan tutkimuksessa odotettiin pienen vaikutuskoon 0,10 saavuttavan 80 %:n kyky hylätä nollahypoteesi, ja ryhmäkoot ovat yhtä suuret, päätimme rekrytoida yhteensä 105 osallistujaa, jotka jakautuvat tasan 3 ryhmää (35 osallistujaa jokaisessa ryhmässä).

F-testit - ANOVA: Kiinteät tehosteet, omnibus, yksisuuntainen analyysi: A priori: Laske tarvittava otoskoko Tulo: Vaikutuskoko f = 0,10 α err todennäköisyys = 0,05 Teho (1-β err prob) = 0,80 Ryhmien lukumäärä = 3 Lähtö : Ei-keskeisyysparametri λ = 9,6900000 Kriittinen F = 3,0050418 Osoittaja df = 2 Nimittäjä df = 966 Kokonaisnäytteen koko = 969 Todellinen teho = 0,8011010