Évaluation de l'effet de la rutine et de la vitamine C sur le stress oxydatif chez les patients hémodialysés

Évaluation de l'effet de la rutine et de la vitamine C sur le stress oxydatif chez les patients hémodialysés

Un protocole soumis pour l'accomplissement partiel du Master en sciences pharmaceutiques (pharmacie clinique)

Par:

samia mohamed omar

Sous la surveillance de

Prof. Dr. Nagwa Ali Sabri Professeur et chef du département de pharmacie clinique Faculté de pharmacie Université Ain Shams

Assoc. Pr Tamer Wahid El Said Professeur agrégé de néphrologie Faculté de médecine Université Ain Shams

Dr. Radwa Maher Abd-el-Kader-el-Borolossy Maître de conférences en pharmacie clinique Faculté de pharmacie Université Ain Shams

Introduction

La morbidité et la mortalité sont les problèmes les plus importants actuellement rencontrés par les scientifiques médicaux dans le monde chez les patients atteints d'insuffisance rénale chronique. (Kazi et al, 2008) Le stress oxydatif est associé à des dommages oxydatifs aux protéines, aux lipides et à l'ADN et joue un rôle important dans la progression de la maladie chez les patients atteints d'insuffisance rénale chronique, dans le stress oxydatif, la production d'espèces réactives de l'oxygène (ROS) dépasse l'antioxydant capacité, également en hémodialyse, le stress oxydatif a augmenté en raison des traitements membranaires de dialyse à faible compatibilité, qui activent les neutrophiles et les monocytes (cellules phagocytaires), et également en raison d'une diminution de la capacité antioxydante dans laquelle l'activité des enzymes superoxyde dismutase, glutathion peroxydase et peroxiredoxin2 est réduit en plus de faibles niveaux d'antioxydants non enzymatiques comme les vitamines C, E et A. (Gwozdzinski K et al, 2021) Plusieurs comorbidités chez les patients atteints d'IRT sont liées au stress oxydatif caractérisé par des niveaux élevés de pro-oxydants, comme la dyslipidémie , calcification vasculaire, hypertension, diabète sucré (DM) et vieillesse.(Mondaresi et al, 2015) L'état de malnutrition et l'inflammation chronique accompagnant la dialyse déclenchent également la production d'espèces réactives de l'oxygène. (handelman et al, 2001) une augmentation de 14 fois des niveaux de ROS est induite après chaque séance d'hémodialyse. (Nguyen et al, 1985; Chen et al, 1998 ; Yang et al, 2006)

Le rein synthétise les enzymes antioxydantes, y compris les glutathion peroxydases et son échec entraîne une réduction des niveaux de ces enzymes et, par conséquent, une augmentation des pro-oxydants. (Kelly, Rothwell, 2020) L'oxydation des acides gras par les radicaux libres est appelée peroxydation lipidique et elle est responsable de lésions tissulaires.(Fatani et al, 2016) Le malondialdéhyde généré à partir de la peroxydation lipidique est un agent nucléophile capable d'attaquer et de modifier les fonctions des acides aminés et de la fraction sulfhydryle des protéines. (Slatter et al, 2000) Plusieurs études ont confirmé que l'augmentation du taux de mortalité chez les patients hémodialysés était associée au stress oxydatif en relation avec des niveaux accrus de MDA, produit final de l'oxydation des acides gras insaturés. (Juretic et al, 2001) Les antioxydants sont des antioxydants endogènes produits par le corps (enzymatiques et non enzymatiques) et des antioxydants exogènes présents dans les aliments et les suppléments. (Liakopoulos et al, 2019) Vitamines B, C, D et E, coenzymeQ10, L-carnitine, acide a-lipoïque, curcumine, thé vert, flavonoïdes, polyphénols, acides gras polyinsaturés oméga-3, statines, oligo-éléments et N-acétyle la cystéine ont été étudiées comme antioxydants exogènes pour réduire le stress oxydatif chez les patients hémodialysés. (Liakopoulos et al, 2019) Réduire le stress oxydatif chez les patients hémodialysés en utilisant des traitements antioxydants peut être une approche utile pour sauver des vies, éviter la mort et améliorer leur qualité de vie19.(Navarro et al, 2019) De nombreuses études cliniques présentes dans les bases de données ont confirmé l'amélioration des complications accompagnées de dialyse chez les patients supplémentés en antioxydants à base de plantes. (Asgharpour M, Alirezaei A, 2012) Dernièrement, l'attention se porte de plus en plus sur l'effet antioxydant de la rutine.( Moretti E et al, 2012)

Les flavonoïdes ont récemment été reconnus par un groupe scientifique comme une classe unique de molécules thérapeutiques en raison de leurs diverses propriétés pharmacologiques, la rutine, connue sous le nom de vitamine p ou rotoside, a été découverte pour de nombreux effets pharmacologiques.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) La rutine est un flavonol présent dans la fleur de la passion, le sarrasin, le thé et la pomme.( Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) La rutine appelée rotoside, la quercétine-3-rutinoside et la sophorine est un glycoside flavonoïde d'agrumes. ( Kreft S, Knapp M, Kreft I, 1999) La rutine est un phytochimique qui possède de nombreuses propriétés thérapeutiques. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Un ancien dicton une pomme par jour, éloigne le médecin semble avoir raison, car la rutine, présente dans les pommes, a de nombreuses activités biologiques. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) La rutine doit être étudiée de manière approfondie pour démontrer un profil d'innocuité efficace chez l'homme afin d'obtenir ses avantages en tant que complément thérapeutique. (Ganeshpurkar A, Saluja AK, 2017) Il a été constaté que la rutine en tant que traitement avait un impact considérable sur la sécrétion de cytokines. (Gandhi GR et al, 2020) Les cytokines sont sécrétées par les cellules immunitaires, et l'inflammation au cours des maladies à long terme, provoque un dysfonctionnement des organes médié par les cytokines et des lésions tissulaires, comme dans le diabète sucré, le cancer, la polyarthrite rhumatoïde. (Gautam R et al, 2006) Les effets immunomodulateurs et anti-inflammatoires de la rutine sur les maladies métaboliques chroniques soutiennent l'idée que la rutine peut être utilisée dans le traitement de ces troubles et de leurs complications. (Gandhi GR et al, 2020) Réduction de la glycémie et amélioration du profil lipidique en utilisant la rutine, les activités de l'ALT, de l'AST et des LDL dans le foie, le sérum et les changements cardiaques sont également empêchées par la rutine, la rutine s'est avérée avoir la capacité de réduire les niveaux hépatiques et cardiaques de TG et améliore le niveau de glycogène. (Gandhi GR et al, 2020)

Étonnamment, la stabilité de l'oxydation de l'aganiste de la rutine s'est avérée supérieure à celle de son aglycogène, la quercétine. (Suzuki et al,2005) La rutine est fréquemment utilisée en association avec la vitamine C car elle est essentielle à l'absorption de la vitamine C et comme anti-oxydant. (Bus ze Wski et al, 1993) Le corps humain ne peut pas synthétiser les flavonoïdes et le régime alimentaire peut fournir de la rutine, et la rutine ne sert pas seulement à prolonger la durée de conservation des produits, mais augmente également la valeur nutritionnelle des produits. (Chua LS, 2013) En plus des toxines, l'hémodialyse élimine les nutriments du sang, tels que l'acide ascorbique (AA) et les patients sous hémodialyse sont également déficients en acide ascorbique en raison de restrictions alimentaires, ce qui déclenche un stress oxydatif et une inflammation déjà induits par l'urémie se terminant par événements cardiovasculaires et mortalité.(Chaghouri P et al, 2021) ROS réduit par AA, en particulier le radical anion superoxyde, et à son tour l'acide ascorbique oxydé. (Bendich A et al, 1986) L'acide AA réagit de manière compétitive avec les ROS, les piégeant avant qu'ils n'oxydent les composants cellulaires, et l'AA est oxydé, protégeant les membranes lipidiques, les protéines et l'ADN des dommages. (Berratta M et al, 2020) Dans les leucocytes, les concentrations d'acide ascorbique atteignent 50 à 100 fois plus élevées que dans le plasma. (Berratta M et al, 2020) Aucune étude n'a été menée sur l'effet de la rutine en tant qu'antioxydant sur le stress oxydatif chez les patients hémodialysés.

En ce qui concerne l'efficacité antioxydante et anti-inflammatoire des AA, il est essentiel de voir l'effet de la vitamine C sur les patients hémodialysés. (Chaghouri P et al, 2021) S'appuyant sur l'effet antioxydant et anti-inflammatoire des deux, la rutine et la vitamine c confirmées par une variété d'études in vitro et in vivo, la rutine et la vitamine C sont sélectionnées pour être étudiées chez les patients hémodialysés.

Objectif de l'étude L'objectif de cette étude est d'évaluer l'effet de la rutine et de la vitamine C sur une sélection de marqueurs de stress oxydatif et inflammatoire.

Patient et méthodes

1. Conception:

   Un essai clinique prospectif, interventionnel, ouvert et randomisé sera mené sur des patients adultes atteints d'IRT sous hémodialyse régulière.

2. Paramètres:

L'étude sera réalisée à l'unité de néphrologie et de dialyse du CHU d'ain shams

Au total, 105 patients seront recrutés et répartis en 3 groupes : - Groupe 1 : (groupe Ruta C) 35 patients prendront une dose de 2 comprimés de rutine 60 mg en association avec de la vitamine C 160 mg trois fois par jour pendant 4 mois en en plus de leur traitement standard.

Groupe 2 : (groupe vitamine C) 35 patients prendront une dose de 500 mg de vitamine C deux fois par jour pendant 4 mois en plus de leur traitement standard.

Groupe 3 : Groupe témoin, 35 patients ne prendront que le traitement standard.

Caractéristiques de base : Les données suivantes seront recueillies auprès de tous les patients au départ

1. Âge, sexe, poids, durée de l'IRT et comorbidités de l'hémodialyse.
2. Durée de la dialyse, BUN, Cr (mg/d L), Albumine (mg/d L), Hb (g m%), test de la fonction rénale, test de la fonction hépatique, glycémie, TG, taux de cholestérol total, LDL-C, HLD -C.

Paramètres de surveillance :

1. Les patients seront surveillés pour les effets secondaires.
2. un échantillon de sang sera prélevé au départ et à la fin de l'étude de tous les groupes puis les sérums seront centrifugés à 3000 rpm, pendant 10 minutes à 4°c, puis conservés congelés à -80 C pour l'évaluation biochimique plasma malondialdéhyde, Protéine C-réactive, GSH-PX, TNF-α et ESR. Cette analyse sera réalisée par la technique de dosage immuno-enzymatique (ELISA)

Considération éthique :

• L'étude sera réalisée conformément à la Déclaration d'Helsinki.
• Approbation du comité d'éthique de la recherche de la faculté de pharmacie - université Ain-Shams - comité d'éthique de la recherche de la faculté de pharmacie comité d'examen institutionnel.
• Un consentement éclairé sera recueilli auprès de tous les patients avant l'inscription à l'étude sans aucune obligation pour les patients de se retirer de l'étude s'ils le souhaitent.

Analyses statistiques:

Les analyses statistiques seront effectuées à l'aide du logiciel SPSS (Statistical Package for the Social Sciences). Les variables continues seront représentées sous forme de moyenne + écart type (SD) ou de médiane + intervalle interquartile (IQR). Les tests statistiques seront choisis selon que les données résultantes seront paramétriques ou non paramétriques. Les valeurs P inférieures à 0,05 sont considérées comme statistiquement significatives et les valeurs P inférieures à 0,001 sont considérées comme hautement significatives.

Calcul de la taille de l'échantillon :

La taille de l'échantillon a été calculée par GPower v.3.1.9.4 1. Selon Connelly (2008), la littérature suggère qu'un échantillon d'étude pilote devrait être de 10% de l'échantillon 3 groupes de taille égale et un alpha de 0,05, la taille de l'échantillon serait de 966 participants. Pour notre étude pilote, la taille d'échantillon requise serait de 97 participants. Pour tenir compte des abandons et des projections pour l'étude parentale plus large 2.

Par conséquent, pour une étude à grande échelle, en s'attendant à une petite taille d'effet de 0,10, pour atteindre une puissance de 80 % pour rejeter l'hypothèse nulle, avec égalité des tailles de groupe, nous avons décidé de recruter un total de 105 participants, également répartis entre les 3 groupes (35 participants dans chaque groupe).

Tests F - ANOVA : Effets fixes, omnibus, unidirectionnel Analyse : A priori : Calculer la taille d'échantillon requise Entrée : Taille d'effet f = 0,10 α err prob = 0,05 Puissance (1-β err prob) = 0,80 Nombre de groupes = 3 Sortie : Paramètre de non-centralité λ = 9,6900000 F critique = 3,0050418 Numérateur df = 2 Dénominateur df = 966 Taille totale de l'échantillon = 969 Puissance réelle = 0,8011010