白细胞介素和其他细胞因子与 OCT 成像一起用于感染性角膜炎快速评估的验证 (VICTORIA)

角膜的感染或炎症过程（角膜炎）很常见并且威胁视力。 它们是导致失明的第 5 大原因，尤其是传染性角膜炎每年导致 2,000,000 只新失明眼（全球）。 通常，细菌病原体的存在和性质是通过从角膜上划痕，随后进行革兰氏染色和微生物培养检查来确定的。 治疗决策中的主要问题是病原体检测的细菌培养时间长（大约一周）、敏感性相对较低以及细菌对抗生素药物的耐药性越来越频繁。

在之前的小型研究中，发现光学相干断层扫描 (OCT) 结合泪液细胞因子分析有助于区分引起角膜炎的不同病原体。 这些研究似乎改变了角膜炎快速检测领域的游戏规则。 然而，这些研究的问题是样本量小和使用部分过时的设备。

利益/风险评估 虽然参与受试者没有直接利益，但研究结果可以帮助更深入地了解角膜炎的病程，并可以进一步提高疾病管理中的诊断效用。

本研究中没有使用额外的药物。 本研究的结果可能有助于更好地了解角膜炎，并可能实现更快的靶向治疗。 所有应用的测量技术都是无痛的。

因此，风险收益比似乎是可以接受的。

学习目标

基本的：

• 比较引起角膜炎的革兰氏+和革兰氏-细菌在泪膜中的TNF-α水平差异(pg/ml)（非配对样品的z检验）。

中学：

• 要开发一种算法，应该有助于使用细胞因子水平和 OCT 结果来区分引起角膜炎的不同病原体。 这部分研究将是实验性的（偏最小二乘回归和回归随机森林图）
• 角膜炎中 IL-1alpha、IL-1beta、IL-6、IL-8、IL-10、IL-17A、TNF-alpha 的水平
• 光学相干断层扫描的形态学发现：角膜厚度 (µm)、浸润厚度 (µm)、浸润反射率（灰度级，其中 0 为黑色，255 为白色）。

设计：前瞻性单中心试验参与者将从奥地利林茨市开普勒大学眼科诊所的救护车中招募，共计 392 名患者将被纳入本研究。 目标功效：对 7 个解释变量（7 种不同细胞因子）进行 Bonferroni 校正后的显着性水平为 0.8：0.07 使用值（TNF α 2）：第 1 组：18.​​8 (26.36) 和第 2 组：50.12 (103.83) 参数 结果 功效 0.800 alpha 0.007 平均值（第 1 组） 18.8 平均值（第 2 组） 50.12 Std. 偏差（第 1 组）26.36 标准。 偏差（第 2 组） 103.83 样本量 1 146 样本量 2 146 功效（获得） 0.798 为了更正潜在的舍入误差（计算出的功效 0.798），应向每组添加一个案例。

尽管不会有任何后续研究，但研究人员仍预计退出率为 30%，原因如下：如前所述，所有角膜活检中有 67% 的结果为阳性培养。 13 在这种情况下，如果培养未提供阳性结果，则必须将患者排除在分析之外。

因此，调查员将包括 147 + 147 + (147+147)*0.33 = 391.02 眼睛 -> 392 只眼睛 如果角膜活检呈阳性（发现导致角膜炎的病原体），则只能进行数据分析。 因此，研究者预计大约 30% 的患者不会被纳入分析。 在这些情况下，仍将评估 OCT 图像，但泪膜样本将根据组织废物方案处理，或者如果调查眼科医生预计是非感染性角膜炎（如神经营养性溃疡），则细胞因子将进行量化。

测量技术 CASIA 2（Tomey，日本）是一种 ss-OCT 生物测量仪，可以对眼前节进行高分辨率成像。

泪液取样和细胞因子分析 将在没有局部麻醉的情况下通过受影响的眼睛的结膜灌洗来收集样品。 通过轻轻拉下下眼睑并使用无针胰岛素注射器，将在室温下将无菌生理盐水注入下结膜囊。 几秒钟后，灌洗液将被吸回到同一个注射器中，注射器不会接触结膜。 之后，样本将被储存在-80摄氏度，直到收集完所有样本。 正如在那些样本中提到的，角膜活检呈阴性的样本将被处理掉，或者（如果眼科预计是非感染性角膜炎）仍将被分析。 因此，来自注射器的结膜液将被汇集并在离心机中旋转（4°C 下 400xg 10 分钟）。 上清液将使用 Meso Scale Discovery（美国马里兰州盖瑟斯堡）的促炎性多重测定试剂盒分析以下细胞因子和趋化因子的水平：IL-1alpha、IL-1beta、IL-6、IL-8、IL -10、IL-17A、TNF-α。 将同时分析 80 个样本。