신속한 감염성 각막염 평가를 위한 OCT 이미징과 함께 인터루킨 및 기타 사이토카인 검증 (VICTORIA)

각막의 감염성 또는 염증성 과정(각막염)은 흔하며 시력을 위협합니다. 이들은 실명의 5번째 주요 원인이며 특히 감염성 각막염은 매년(전 세계적으로) 2,000,000개의 새로운 실명을 초래합니다. 일반적으로 세균성 병원균의 존재와 특성은 각막의 긁힘, 후속 그람 염색 및 미생물 배양 검사를 통해 결정됩니다. 치료 의사 결정의 주요 문제는 병원균 검출을 위한 세균 배양 기간이 길고(약 1주), 상대적으로 낮은 민감도와 항생제에 대한 세균 내성이 점점 더 자주 발생한다는 점입니다.

소규모 이전 연구에서 눈물 사이토카인 분석과 결합된 OCT(optical coherence tomography)는 각막염을 유발하는 여러 병원균을 구별하는 데 도움이 되는 것으로 밝혀졌습니다. 이러한 연구는 각막염에 대한 신속 검사 분야의 게임 체인저인 것으로 보입니다. 그러나 이러한 연구의 문제점은 작은 표본 크기와 부분적으로 구식 장비를 사용한다는 것입니다.

이익/위험 평가 참여 대상자에게 직접적인 이익은 없지만 연구 결과는 각막염 경과에 대한 더 많은 통찰력을 얻는 데 도움이 될 수 있으며 질병 관리에서 진단 유틸리티를 추가로 개선할 수 있습니다.

이 연구에서 사용된 추가 약물은 없습니다. 본 연구의 결과는 각막염에 대한 더 나은 이해를 확립하는 데 도움이 될 수 있으며 더 빠르고 목표 지향적인 치료를 가능하게 할 수 있습니다. 적용된 모든 측정 기술은 통증이 없습니다.

따라서 위험 대비 이익 비율은 수용 가능한 것으로 보입니다.

연구 목표

주요한:

• 각막염을 유발하는 그람+와 그람- 박테리아 사이의 눈물막(pg/ml)의 TNF-알파 수준 차이 비교(짝이 없는 샘플에 대한 z 테스트).

중고등 학년:

• 사이토카인 수치와 OCT 소견을 사용하여 각막염을 일으키는 여러 병원균을 구별하는 데 도움이 되는 알고리즘을 개발합니다. 연구의 이 부분은 실험적일 것입니다(부분 최소 제곱 회귀 및 회귀 랜덤 포레스트 플롯).
• 각막염에서 IL-1alpha, IL-1beta, IL-6, IL-8, IL-10, IL-17A, TNF-alpha 수치
• 광 간섭 단층 촬영의 형태학적 소견: 각막 두께(µm), 침윤물 두께(µm), 침윤물 반사율(회색 수준, 여기서 0은 검은색이고 255는 흰색임).

설계: 전향적 단일 센터 시험 참가자는 오스트리아 린츠에 있는 Kepler University 클리닉, 안과의 구급차에서 모집할 것입니다. 총 392명의 환자가 이 연구에 포함될 것입니다. 목표 검정력: 7개의 설명 변수(7개의 서로 다른 사이토카인)에 대한 Bonferroni 보정 후 0.8 유의 수준: 0.07 사용된 값(TNF 알파 2): 그룹 1: 18.8(26.36) 및 그룹 2: 50.12(103.83) 매개변수 결과 검정력 0.800 알파 0.007 평균(그룹 1) 18.8 평균(그룹 2) 50.12 표준 편차(그룹 1) 26.36 Std. 편차(그룹 2) 103.83 샘플 크기 1 146 샘플 크기 2 146 검정력(구함) 0.798 잠재적인 반올림 오류(계산된 검정력 0.798)를 수정하려면 각 그룹에 하나의 사례를 추가해야 합니다.

연구 후속 조치는 없지만 조사자는 여전히 다음과 같은 이유로 30%의 탈락률을 예상합니다. 13 배양이 양성 결과를 제공하지 않는 경우 환자는 분석에서 제외되어야 합니다.

따라서 조사자는 147 + 147 + (147+147)*0.33을 포함하게 됩니다. = 391.02 eyes -> 392 eyes 각막 생검에서 양성(각막염을 일으키는 병원균이 발견된 경우)에만 데이터 분석이 가능합니다. 따라서 연구자는 약 30%의 환자가 분석에 포함되지 않을 것으로 예상합니다. 이러한 경우에도 OCT 이미지는 여전히 평가되지만 눈물막 샘플은 조직 폐기물의 프로토콜에 따라 폐기되거나 검사 안과의사가 비전염성 유형의 각막염(예: 신경영양성 궤양)을 예상하는 경우 사이토카인 정량이 수행됩니다.

측정 기술 CASIA 2(Tomey, Japan)는 안구 전안부의 고해상도 이미징을 가능하게 하는 ss-OCT 바이오미터입니다.

눈물 샘플링 및 사이토카인 분석 국소 마취 없이 감염된 눈의 결막 세척으로 샘플을 수집합니다. 멸균 생리 식염수는 바늘이 없는 인슐린 주사기로 아래 눈꺼풀을 부드럽게 아래로 당겨 실온에서 아래 결막낭으로 주입됩니다. 몇 초 후, 주사기가 결막에 닿지 않고 세척액이 동일한 주사기로 다시 흡인됩니다. 이후 샘플은 모든 샘플이 수집될 때까지 -80°C에서 보관됩니다. 해당 샘플에서 언급한 바와 같이 각막 생검이 음성인 경우 폐기하거나 (안과에서 비감염성 유형의 각막염을 예상하는 경우) 계속 분석합니다. 따라서 주사기의 결막액은 풀링되어 원심분리기에서 회전됩니다(4°C에서 10분 동안 400xg). 다음 사이토카인 및 케모카인: IL-1알파, IL-1베타, IL-6, IL-8, IL의 수준에 대해 Meso Scale Discovery(Gaithersburg, MD, USA)의 전염증성 다중 분석 키트를 사용하여 상청액을 분석합니다. -10, IL-17A, TNF-알파. 80개의 샘플을 동시에 분석합니다.