Dárcovské Th2 buňky k prevenci onemocnění štěpu proti hostiteli u transplantací kostní dřeně

Alogenní transplantace kmenových buněk periferní krve (PBSCT) je primárně omezena reakcí štěpu proti hostiteli (GVHD). Na myších modelech jsme prokázali, že donorové CD4+ T buňky fenotypu Th1 cytokinu (definovaného jejich sekrecí IL-2 a IFN-gama) zprostředkovávají GVHD. Naproti tomu dárcovské CD4+ T buňky fenotypu Th2 (definované jejich sekrecí IL-4, IL-5 a IL-10) negenerují GVHD a ruší GVHD zprostředkované Th-1. Důležité je, že jsme prokázali, že obohacení myších aloštěpů Th2 buňkami snižuje GVHD, aniž by narušilo schopnost dárcovských T buněk zabránit odmítnutí štěpu. Tyto studie ukazují, že podávání Th2 buněk po alogenní transplantaci představuje strategii pro dosažení alloengraftmentu se sníženou GVHD.

Kromě GVHD byla alogenní PBSCT omezena toxicitou spojenou s konvenčními myeloablativními preparativními režimy. Takové režimy, které typicky využívají celkové ozáření těla (TBI) a vysokodávkovou chemoterapii, byly kdysi považovány za nezbytné pro prevenci rejekce štěpu. Nedávné klinické studie však ukázaly, že nemyeloablativní dávky chemoterapie založené na fludarabinu mohou vést k aloengraftmentu. Na myších modelech jsme prokázali, že závažná deplece hostitelských T-buněk vyvolaná kombinací fludarabinu a cytoxanu může zabránit dokonce i plně MHC neshodnému odmítnutí dřeňového štěpu. Ačkoli nemyeloablativní režimy mohou snížit toxicitu související s režimem, takové transplantace byly spojeny s 30 až 40% incidencí těžké akutní GVHD, což je podobné četnosti pozorované u myeloablativních režimů. Protože se zdá, že nemyeloablativní režimy jsou spojeny se sníženou toxicitou související s režimem, rozhodli jsme se provést tuto studii fáze I Th2 buněk v rámci imunoablativního (nemyeloablativního) preparativního režimu.

Pacienti s leukémií v klinické remisi a pacienti s refrakterní lymfoidní malignitou budou kandidáty pro tento alogenní PBSCT protokol odpovídající HLA. Pacienti dostanou nový indukční režim (fludarabin a EPOCH) a režim preparativní transplantace (fludarabin a cytoxan) navržený tak, aby maximálně vyčerpal imunitní T buňky hostitele schopné zprostředkovat odmítnutí štěpu. Po indukční a preparativní chemoterapii dostanou pacienti nemanipulovaný G-CSF mobilizovaný PBSC štěp. U prvních šesti pacientů, kteří dostali tento transplantační postup v NCI, bylo úspěšně zabráněno odmítnutí štěpu (100% chimérismus dárce do 30. dne po transplantaci). Důležité je, že GVHD byla pozorována u všech šesti pacientů, přičemž u tří ze šesti pacientů se vyvinula závažná GVHD (stupeň III). Vzhledem k tomu, že tento režim úspěšně dosahuje přihojení dárce a je spojen s významnou GVHD, představuje tento režim transplantace vynikající klinické nastavení pro hodnocení Th2 buněk.

Pomocí tohoto nemyeloablativního alogenního PBSCT přístupu provedeme studii fáze I, abychom vyhodnotili bezpečnost a proveditelnost podávání dárcovských Th2 buněk 1. den po transplantaci. Před transplantací budou dárcovské CD4+ T buňky stimulovány in vitro za použití kultivačních podmínek, které podporují tvorbu dárcovských CD4 buněk Th2 cytokinového profilu. Pokud tato studie fáze I prokáže, že podávání Th2 buněk je bezpečné a proveditelné, bude provedena studie fáze III, aby se vyhodnotilo, zda podávání Th2 buněk snižuje výskyt a závažnost GVHD. Úspěšná implementace této Th2 strategie výrazně sníží morbiditu a mortalitu spojenou s alogenní PBSCT a může také představovat přístup k transplantaci kmenových buněk u pacientů, kteří nemají dárce odpovídající HLA.