Hladiny IL-6, IL-17 a IL-35 v gingivální crevikulární tekutině pacientů s parodontózou a zdravými kontrolami

IL-35 je signální molekula nové generace patřící do rodiny cytokinů IL 12. Je produkován T-regulačními buňkami (Treg) sestávajícími z Α řetězce (p35). Nedávné studie ukázaly, že IL-35 je protizánětlivý cytokin. Potlačuje imunitní odpověď prostřednictvím expanze Treg a potlačení růstu Th17 buněk.

Interleukin-17 (IL-17) je prozánětlivý cytokin vylučovaný buňkami T-17. Je to silný aktivátor neutrofilů, protože reguluje G-CSF a expresi receptorů a chemokinů. Jeho zvýšená hladina byla dokumentována u chronické parodontitidy. V přítomnosti P. gingivalis je pozorováno zvýšení IL-17 a IL-23. Přestože parodontální infekce (P. gingivalis) indukuje IL-17, byla také navržena ochranná role IL-17 proti kostní resorpci. IL-17 produkuje IL-6, IL-8 ovlivněním fibroblastů.

IL-6 je produkován mnoha buňkami v reakci na LPS a má prozánětlivé i protizánětlivé role. Podílí se na zánětlivých, regeneračních, metabolických a nervových procesech. Hladina IL-6 byla zkoumána v různých studiích v séru, slinách a tekutinách gingiválního sulku. Byly hlášeny studie se zvýšenými hladinami IL-6 v tekutině gingiválního žlábku u chronické parodontitidy a studie s významným poklesem v séru po nechirurgické léčbě chronické parodontitidy. Existují však i studie, které neprokazují významný rozdíl v hladinách různých cytokinů ve slinách chronické parodontitidy a zdravých jedinců.

Klinická měření zahrnují index plaku (PI), index gingivy (GI), krvácení při sondování (BOP), hloubku sondy (PD), úroveň klinického přilnutí (CAL), polohu gingiválního okraje (DKK) a parametry mobility. Měření budou zaznamenávána ze šesti různých bodů všech zubů stejným výzkumníkem parodontální sondou Williamsova typu (Hu-Friedy, USA).

1. Zdravé kontrolní skupiny:

   Skládá se z jedinců s klinicky zdravou dásní na neporušeném parodontu, kteří měli skóre BOP méně než 10 % a PD≤3 mm, nevykazovali žádnou ztrátu vazby nebo rentgenovou ztrátu kosti.

2. Skupiny stupně B-C / fáze III-IV parodontitidy:

Stupeň B: ​​Střední rychlost progrese Střední úbytek kostní hmoty je pozorován ve srovnání s biofilmem a % ztráty kořenové kosti/věk 0,25 až 1,0 je určeno jako stupeň B.

Stádium III: Těžká parodontitida s možností další ztráty zubů Skládá se z jedinců s interdentální AL ≥5 mm, radiografickým úbytkem kosti zasahujícím do střední nebo apikální třetiny kořene, PD≥6 mm a ztrátou zubu v důsledku parodontitidy ≤4.

Stupeň C: Rychlá rychlost progrese Rychlá kostní ztráta je pozorována ve srovnání s biofilmem a % ztráty kořenové kosti/věk > 1,0 je stanoveno jako stupeň C.

Stádium IV: Pokročilá parodontitida s rozsáhlou ztrátou zubů a potenciálem ztráty chrupu Skládá se z jedinců s interdentální AL ≥ 5 mm, radiografickým úbytkem kosti zasahujícím do střední nebo apikální třetiny kořene, PD ≥ 6 mm a ztrátou zubu v důsledku parodontitidy ≥ 5. Potřeba komplexní rehabilitace z důvodu: žvýkací dysfunkce, sekundárního okluzního traumatu (stupeň pohyblivosti zubů ≥2) těžkého defektu hřebene, kolapsu kousnutí, driftování, rozšíření. Méně než 20 zbývajících zubů (10 protilehlých párů)

Skupina paradentózy:

• 18-65 let
• Nemít žádné systémové onemocnění (onemocnění, která neovlivňují stav parodontu)
• Nekuřák
• Během posledních 6 měsíců jste neužívali antibiotika a/nebo neužívali imunosupresiva
• Předtím jsem nepodstoupil žádnou parodontologickou léčbu
• Žádný stav těhotenství a kojení
• Neužívat pravidelně žádné léky
• Mít alespoň 20 zubů
• Ti se stupněm B-C stadia III-IV periodontálního onemocnění podle Klasifikace parodontálních a periimplantátových onemocnění a stavů z roku 2017

Zdravá skupina:

U pacientů, kteří se přihlásili na Stomatologickou fakultu Istanbulské univerzity, Ústav parodontologie, budou do studie zařazeni parodontálně zdraví jedinci, kteří nesplňují výše uvedená kritéria onemocnění, kteří nemají v anamnéze žádným způsobem parodontitidu.

Vzorky papírových proužků (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) umístěné v gingivální štěrbině budou umístěny do eppendorfových zkumavek pro laboratorní vyšetření v sezení 1 týden poté, co byl parodontálním měřením stanoven přesný stav parodontu. Vzorky budou odebírány z oblastí s největší hloubkou sondování. Při odběru vzorků gingivální štěrbinové tekutiny bude oblast izolována vatovými tampony, mikrobiální zubní plak na zubu bude odstraněn vatovými kuličkami a bude provedeno krátkodobé sušení osvěžovačem vzduchu ze vzdálenosti 20 cm při pravý úhel. Poté budou standardní absorpční papírové proužky 2x8 mm umístěny z přibližných oblastí ke vstupu do štěrbiny s mírným odporem a ponechány po dobu 30 sekund, poté budou všechny papírové proužky umístěny do stejné eppendorfovy zkumavky pro každého pacienta a uloženy při teplotě -80 °C. °C. (Nový vědecký ultranízkoteplotní mrazák Brunswick). Každému pacientovi budou odebrány vzorky ze 4 zubů. V případě krvácení v gingivální štěrbině během odběru vzorku bude papírový proužek zlikvidován. Vzorky budou izolovány z gingivální štěrbiny pomocí absorpčních papírových proužků (Periopaper®, Proflow Inc., Amitiyville, NY, USA) a ve vzorcích budou provedeny biochemické analýzy metodou ELISA v souladu s protokoly obsaženými v souprava.

Popisná data získaná ve studii budou uvedena jako průměr ± standardní odchylka (medián (min-max) pro každou skupinu. Testování předpokladu normality testováním hypotéz, testování hypotéz bude analyzováno testy Kolmogorov - Smirnov nebo Shapiro-Wilk.

Průměrné rozdíly pro každou skupinu ve srovnání pro dvě skupiny v analýzách; t-test v nezávislých skupinách v případech, kdy data vykazují normální rozdělení, v případech, kdy data nevykazují normální rozdělení; Bude použit Mann-Whitney U test.

Ve více než dvou skupinách bude One Way ANOVA použita v případech, kdy jsou data normálně distribuována; S Tukeyho testem bude provedeno více srovnání. V případech, kdy data nevykazují normální rozdělení, bude analyzován Kruskal-Wallisův H test a vícenásobná srovnání budou analyzována neparametrickou metodou S-N-K (Student Newman-Keulsův test). Statistická významnost bude považována za p< 0,05 a obousměrná.

Podle Klasifikace onemocnění a stavů parodontu a periimplantátu z roku 2017 je průměrný rozdíl 11 jednotek mezi výsledky získanými z interleukinových biomarkerů ve skupině jedinců s parodontitidou stupně B-C stupně III-IV a zdravých jedinců a minimálním vzorkem k najděte odhadovanou 15-jednotkovou směrodatnou odchylku významné velikosti (za předpokladu chyby typu I 5 %, chyby typu II 20 % za předpokladu síly 0,80): 30 osob pro každou skupinu. Při zvážení nesprávných vzorků bude do každé skupiny odebráno 30+30 osob (30 zdravých kontrol, 30 případů paradentózy).