Použití AS-OCT k posouzení role věku a regionu v morfologii a tloušťce epitelu limbu

Limbus nacházející se mezi rohovkou a spojivkovou tkání, široký přibližně 1,5 mm u dospělých lidských očí, je důležitý nejen tím, že poskytuje bariérovou hranici, která zabraňuje invazi spojivkové tkáně do rohovky, která obsahuje nervy procházející do rohovky, mající krevní a lymfatické cévy. pro dodávku kyslíku a živin, ale také prostředí niky limbálních kmenových buněk. Lidský limbus obsahuje radiálně orientované fibrovaskulární dráhy zvané Vogtovy palisády (POV), unikátní tkáň poprvé zaznamenanou v roce 1866 a dále podrobně popsána v roce 1921. POV má jedinečnou strukturu, konfiguraci a rozměr, který se běžně vyskytuje u všech typů výklenku epiteliálních kmenových buněk po celém těle, včetně komplikované oblasti výklenku poskytující bezpečné místo pro ochranu kmenových buněk před poškozením nebo zraněním. Během několika posledních let pokrok ve výzkumu kmenových buněk a buněčné terapie zaměřil pozornost na POV jako umístění kmenových buněk, které udržují homeostázu a jasnost rohovkového epitelu. POV také poskytuje prostředí pro výklenku pro limbální kmenové buňky. Buňky výklenku obklopující limbální kmenové buňky, stromální prostředí pod limbálními epiteliálními buňkami, krevní cévy a nervová inervace kolem limbálního epitelu, to vše pomáhá vytvořit jedinečné prostředí výklenku pro limbální kmenové buňky. Pochopení limbální struktury, zejména POV, je nezbytné pro léčbu poškození limbu a vývoj terapií kmenovými buňkami zaměřených na obnovu narušené funkce limbálních kmenových buněk.

Obrazové systémy in vivo zatím nejsou schopny přímo vizualizovat nebo identifikovat limbální kmenové buňky. Jednou z praktických alternativ je vizualizovat histologickou morfologii POV a podle toho spekulovat o možném stavu kmenových buněk. Mikrostruktura POV však není dobře definována nebo pochopena, přestože si uvědomujeme její důležitost. Biomikroskop se štěrbinovou lampou lze rutinně používat pro klinické vyšetření limbální morfologie. Tato technologie však neumožňuje zobrazení strukturálních detailů ve vysokém rozlišení a lze identifikovat pouze až 20 % pacientů. In vivo konfokální mikroskopie byla použita k vizualizaci POV a může poskytnout snímky s rozlišením na buněčné úrovni, ale tato technika je omezena velkým zvětšením, které omezuje oblast skenování. Kromě toho konfokální mikroskopie in vivo vyžaduje přímý kontakt s okem. Přestože kvalita těchto snímků je působivá, mezi nevýhody patřil přímý kontakt během vyšetření, malé zorné pole (~200 μm x 200 μm) a omezené axiální rozlišení. Kromě toho, jak biomikroskopie se štěrbinovou lampou, tak in vivo konfokální mikroskopie mají omezení v tom, že nejsou schopny poskytnout celkový pohled na rozměr a strukturu celé oblasti palisád.

Optická koherentní tomografie (OCT) je zobrazovací modalita, která umožňuje neinvazivní zobrazení morfologie biologické tkáně s rozlišením v mikrometrovém měřítku v hloubce zobrazení 1-2 mm pod povrchem tkáně. Během těchto několika let se OCT stalo užitečným klinickým a výzkumným nástrojem pro zobrazování očního povrchu. Kromě nejpoužívanější aplikace pro pozorování optické ploténky a retinální choroidiální struktury bylo široce rozvinuto také využití v předním segmentu, zejména rohovce. OCT předního segmentu (Visante; Carl Zeiss Meditec, Dublin, CA), OCT v časové doméně, je komerčně dostupný OCT určený zejména pro přední segment. Tento OCT přístroj byl široce používán při LASIK, různých lamelárních keratoplastikách, screeningu keratokonu a hodnocení onemocnění rohovky v různých vrstvách. Jeho omezené rozlišení však neumožňuje pozorování epiteliální vrstvy na povrchu oka. OCT spektrální domény s rohovkovým modulem může poskytnout mnohem lepší rozlišení než OCT v časové oblasti pro pozorování epiteliální vrstvy na povrchu oka. V poslední době se používá k hodnocení epiteliální vrstvy rohovky se spolehlivými výsledky. V této studii používáme k pozorování limbální struktury (POV) optickou koherentní tomografii OCT s Fourierovou doménou (RTvue, Optovue Inc., Fremont, CA) s adaptérem pro dlouhou čočku rohovky-anterior s malým zvětšením. Účelem studie je posoudit roli stárnutí a regionů na limbu.