Identifikace nových biomarkerů příjmu banánů a rajčat (BioBanaTom)

Vzestup metabolomiky spolu s různými platformami, jako jsou hmotnostní spektrometry pro kapalinovou chromatografii (LC-MS), umožnil posouzení tisíců metabolitů současně v biologických vzorcích a rozpoznání vzorců, které mohou představovat otisk prstu příjmu různých potravin. Nedávné studie prokázaly velký potenciál metabolomiky pro objevování nových biomarkerů příjmu v intervenčních a kohortových studiích. Rozmanitost sloučenin nalezených v potravinové metabolomice představuje velkou výzvu, a proto v mezinárodním úsilí o zlepšení identifikace a validace dietních biomarkerů vytvořila Food Biomarkers Alliance (FOODBALL) byl vytvořen. Na tomto projektu bude 22 institucí z 11 různých zemí spolupracovat na třech hlavních úkolech: 1) Objev nového dietního biomarkeru pomocí metabolomického přístupu, 2) systémové ověření existujícího a nově objeveného biomarkeru pro dosažení dobrého pokrytí příjmu potravy v různých evropských zemích. populace a 3) zkoumání biologických účinků pomocí biomarkerů příjmu (http://foodmetabolome.org/). S tím druhým vyvstává nutnost vybudovat chemickou knihovnu, která umožňuje použití standardů pro další identifikaci. Společně s FOODBALLEM si The Food Compound Exchange (FoodComEx) klade za cíl zlepšit dostupnost analytických standardů biologických sloučenin za účelem dosažení lepší a snadnější identifikace biomarkerů (http://foodcomex.org/).

V rámci spolupráce INRA s FOODBALL a FoodComEx se tento projekt pokouší identifikovat biomarkery příjmu banánů a rajčat prostřednictvím zkoumání sérového a močového metabolomu 12 subjektů, které konzumovaly tyto potraviny podle randomizovaného, ​​kontrolovaného, ​​zkříženého designu. Tato studie se skládala ze 3 různých intervenčních období a minimálně 3denního vymývání mezi intervencemi. Intervenční období se skládala ze 2 běhů ve dnech, 1 intervenčního dne a 1 pointervenčního dne. V první den zaváděcího období byly subjekty instruovány, aby se vyvarovaly příjmu banánů nebo rajčat nebo jakéhokoli z jejich produktů; den před intervencí byli dobrovolníci požádáni, aby se vyvarovali příjmu potravin a nápojů bohatých na fytochemikálie, jako je víno, káva, čokoláda, čaj a další potraviny rostlinného původu, včetně banánů a rajčat. Ráno v den intervence dorazili do postního stavu do výzkumného centra v 7.30 hodin. Dobrovolníci byli náhodně zařazeni do jedné ze tří intervencí, vláknina Fresubin ® 2 kcal, 240 g banán plus kontrolní nápoj nebo 300 g rajčata plus kontrolní nápoj plus 12 g rafinovaného slunečnicového oleje. Po celou dobu intervence měly subjekty volný přístup k vodě, maximálně 250 ml vody za hodinu do 6 hodin po příjmu testované potravy.

Vyškolený flebotomista umístil katetr na paži subjektu před příjmem testovaných potravin, aby odebral základní vzorek. Poté byly postprandiálně odebrány čtyři další vzorky po 1 h, 2 h, 4 h a 6 h. Celkem bylo odebráno 7 vzorků moči. První moč byl odebrán subjekty doma ráno 3. dne a zbytek vzorků po příjmu testovaných potravin následovně: 0-1h, 1h-2h, 2h-4h, 4h-6h. Vzorky moči odpovídající intervalu 6h-12h a 12-24h byly odebrány dobrovolníky doma až do rána po příjmu potravy.

Po 6 hodinách odběru krve byl periferní katétr odstraněn a subjekty měly oběd složený z bílého chleba a vařených těstovin, poté bylo subjektům umožněno jít domů. Před odchodem z vyšetřovacího centra byli účastníci instruováni, aby připravili standardizovanou večeři na pánvi smažené kuře s máslem a vařenou rýží se solí. Dobrovolníci nesměli jíst ani pít nic kromě vody a standardizované večeře.

Ráno v den po intervenci dorazily subjekty nalačno do výzkumného centra, aby poskytly vzorek krve za 24 hodin a dodaly sběr moči 6-12 hodin a 12-24 hodin. Poté byla subjektům podávána snídaně ve výzkumném centru a pokračovaly ve své normální stravě až do dalšího běhu ve dnech dalšího intervenčního období.

Vzorky moči a vzorky séra byly rozděleny na alikvoty a skladovány při -80 °C až do analýzy.