Identificación de Nuevos Biomarcadores del Consumo de Plátano y Tomate (BioBanaTom)

El auge de la metabolómica junto con diferentes plataformas como los espectrómetros de masas de cromatografía líquida (LC-MS) han permitido la evaluación de miles de metabolitos simultáneamente en muestras biológicas y el reconocimiento de patrones que pueden constituir una huella digital de la ingesta de diferentes alimentos. Estudios recientes demostraron el gran potencial de la metabolómica para descubrir nuevos biomarcadores de ingesta en estudios de intervención y de cohortes. La diversidad de compuestos que se encuentran en la metabolómica de los alimentos representa un desafío importante y, por lo tanto, en un esfuerzo internacional para mejorar la identificación y validación de biomarcadores dietéticos, Food Biomarkers Alliance (FOODBALL) ha sido creado. En este proyecto, 22 instituciones de 11 países diferentes colaborarán en tres tareas principales: 1) Descubrimiento de un nuevo biomarcador dietético utilizando un enfoque metabolómico, 2) Validación sistémica de biomarcadores existentes y recientemente descubiertos para lograr una buena cobertura de la ingesta de alimentos en diferentes países europeos. poblaciones y 3) explorar los efectos biológicos utilizando biomarcadores de ingesta (http://foodmetabolome.org/). Con esto último surge la necesidad de construir una biblioteca química que permita el uso de estándares para su posterior identificación. Junto con FOODBALL, The Food Compound Exchange (FoodComEx) tiene como objetivo mejorar la disponibilidad de estándares analíticos de compuestos biológicos para lograr una mejor y más fácil identificación de biomarcadores (http://foodcomex.org/).

Como parte de la colaboración de INRA con FOODBALL y FoodComEx, el presente proyecto intenta identificar biomarcadores de la ingesta de plátano y tomate, a través de la exploración del metaboloma en suero y orina de 12 sujetos que consumieron estos alimentos siguiendo un diseño cruzado, controlado y aleatorizado. El presente estudio constaba de 3 períodos de intervención diferentes y un mínimo de 3 días de lavado entre intervenciones. Los períodos de intervención comprendían 2 días de ejecución, 1 día de intervención y 1 día posterior a la intervención. En el primer día del período inicial, se instruyó a los sujetos para que evitaran la ingesta de plátano o tomate o cualquiera de sus productos; el día anterior a la intervención se pidió a los voluntarios que evitaran la ingesta de alimentos y bebidas ricos en fitoquímicos como vino, café, chocolate, té y otros alimentos de origen vegetal, como plátano y tomate. En la mañana de la intervención, los sujetos del día llegaron a estado de ayuno al centro de investigación a las 7.30 am. Los voluntarios fueron asignados al azar a una de las tres intervenciones, Fresubin ® 2kcal de fibra, 240 g de plátano más bebida de control o 300 g de tomate más bebida de control más 12 g de aceite de girasol refinado. Durante toda la intervención, los sujetos tuvieron libre acceso al agua, máximo 250ml de agua por hora hasta 6 horas después de la ingesta del alimento de prueba.

Un flebotomista capacitado colocó un catéter en el brazo del sujeto antes de la ingesta de los alimentos de prueba para recolectar la muestra de referencia. Luego se recolectaron otras cuatro muestras posprandiales después de 1 h, 2 h, 4 h y 6 h. Se recogieron un total de 7 muestras de orina. La primera evacuación de orina fue recolectada por los sujetos en casa en la mañana del día 3 y el resto de las muestras después de la ingesta de los alimentos de prueba de la siguiente manera: 0-1h, 1h-2h, 2h-4h, 4h-6h. Las muestras de orina correspondientes a intervalos de 6h-12h y 12-24h fueron recogidas por voluntarios en casa hasta la mañana siguiente a la ingesta de la comida.

Después de la recolección de sangre de 6 h, se retiró el catéter periférico y los sujetos comieron un almuerzo compuesto por pan blanco y pasta cocida, luego se les permitió irse a casa. Antes de salir del Centro de Investigación, se instruyó a los participantes para que prepararan una cena estandarizada a base de pollo frito con mantequilla y arroz hervido con sal. A los voluntarios no se les permitía comer ni beber nada excepto agua y la cena estandarizada.

En la mañana del día posterior a la intervención, los sujetos llegaron en ayunas al centro de investigación para tomar la muestra de sangre de 24h y entregar la recolección de orina de 06-12h y de 12-24h. Posteriormente, a los sujetos se les sirvió el desayuno en el centro de investigación y reanudaron su dieta normal hasta la próxima carrera en días del próximo período de intervención.

Las muestras de orina y las muestras de suero se dividieron en alícuotas y se almacenaron a -80 °C hasta su análisis.